Морфология эритроцитов в анализе крови

Принцип . Исследование окрашенных мазков крови с помощью иммерсионной системы микроскопа.

Реактивы : 1) иммерсионное масло; 2) диэтиловый эфир.

Ход исследования . Предметное стекло с окрашенным и высохшим мазком крови помещают на столик микроскопа и с помощью малого увеличения (окуляр 7×, объектив 8×) находят край мазка. Не меняя положения стекла, наносят каплю иммерсионного масла на край мазка на место, расположенное под объективом. Переводят иммерсионный объектив в вертикальное по отношению к мазку положение, при этом объектив погружается в каплю масла.

Осторожно с помощью макровинта добиваются получения изображения в поле зрения микроскопа. Затем с помощью микровинта устанавливают четкую видимость препарата. Критерием правильно подобранного для каждого глаза фокусного расстояния будет ясное изображение клеток с четкими границами и внутриклеточной структурой. После этого приступают к изучению морфологии эритроцитов, обращая внимание на их форму, размеры, интенсивность окраски, наличие патологических форм, внутриклеточных включений и т. п. Поскольку клетки имеют определенный объем, для лучшего их рассмотрения необходимо постоянно менять с помощью микровинта фокусное расстояние.

Для получения более полного представления о морфологии клеток необходимо просматривать несколько полей зрения, передвигая мазок рукой или с помощью крестообразного устройства.

Изучать морфологию эритроцитов нужно в тонких участках мазка, где они располагаются одиночно, не образуя «монетных столбиков», обычно на краю мазка вблизи краевой «метелки».

По окончании микроскопии с помощью макровинта поднимают тубус микроскопа, снимают мазок с предметного столика, стирают иммерсионное масло с объектива и предметного стекла марлей, смоченной эфиром.

У здоровых людей эритроциты имеют форму двояковогнутого диска, размеры их примерно одинаковы. В окрашенных препаратах эритроциты круглой формы, розового цвета, с равномерной окраской и небольшим просветлением в центре. Оксифилия обусловлена гемоглобином, поэтому по интенсивности окраски можно судить о степени насыщенности эритроцитов гемоглобином.

Унифицированная микроскопическая методика измерения диаметра эритроцитов с помощью окуляр-микрометра в окрашенном мазке крови

Специальное оборудование : 1) микроскоп; 2) окуляр-микрометр — окуляр, насаживаемый на тубус микроскопа, с круглой стеклянной пластинкой и нанесенной на нее шкалой, разделенной на 50 делений; 3) объект-микрометр — предметное стекло со шкалой длиной 2 мм, разделенной на 200 делений, каждое из которых равно 10 мкм.

Ход определения . Перед началом работы определяют цену одного деления шкалы окуляр-микро-метра, которая зависит от длины тубуса микроскопа и увеличения объектива. Определение проводят с помощью объект-микрометра. Его устанавливают на столик микроскопа так, чтобы шкалы окуляра-микрометра и объекта-микрометра совпали. Затем отсчитывают число делений шкалы окуляра-микрометра, совпадающих с тем или иным количеством делений шкалы объекта-микрометра, и определяют цену одного деления. Например, 40 делений шкалы окуляра-микрометра совпали с 6 делениями объекта-микрометра, что соответствует 60 мкм, т. е. одно деление окуляра-микрометра будет равно: 60 : 40 = 1,5 мкм. Это определение проводят один раз для определенного микроскопа, на котором в дальнейшем проводят эритроцитометрию.

В тонком мазке крови с помощью иммерсионной системы микроскопа с максимально освещенным полем зрения измеряют диаметр не менее 100 эритроцитов, отмечая, какое количество делений шкалы окуляра-микрометра занимает эритроцит. Отмечают результат измерения каждого эритроцита. Зная цену деления и количество эритроцитов с одинаковым числом делений, выражают результат в процентах.

Пример : эритроциты диаметром 4,5 мкм — 5 %, 6,0 мкм — 10 %, 7,5 мкм — 70 %, 9,0 мкм — 11%, 10,5 мкм — 4 %.

Результат можно представлять в виде эритроцитометрической кривой (кривая Прайса—Джонса), при этом по оси абсцисс откладывают размеры эритроцитов, а по оси ординат — количество эритроцитов данного размера. В рутинной практике кривой Прайса—Джонса пользуются редко в связи с большой трудоемкостью ее выполнения. Современные гематологические анализаторы вычерчивают кривую Прайса—Джонса автоматически.

При необходимости результат выражают в виде среднего размера эритроцитов.

Размер . Диаметр нормальных эритроцитов (нормоциты) равен 7,0–8,0 мкм, в основном 7,2–7,5 мкм. Встречаются отклонения в пределах 4,7–9,5 мкм. Микроциты имеют размер 6,7 мкм и менее, макроциты — более 7,7 мкм, и мегалоциты — более 9,5 мкм (Абрамов М. Г., 1985).

По данным Е. А. Кост (1975), нормальная величина эритроцитов колеблется от 7,1 до 7,9 мкм в диаметре, у микроцитов диаметр менее 6,5 мкм. Эритроциты более 8 мкм называются макроцитами, более 12 мкм — мегалоцитами или гигантоцитами.

Микроцитоз — это состояние, когда 30–50 % от общего числа эритроцитов составляют микроциты. Сдвиг эритроцитометрической кривой влево чаще имеет место при железодефицитных анемиях, микросфероцитозе, талассемии, отравлении свинцом.

Микросфероциты

Макроцитоз — это состояние, когда 50 % и более от общего числа эритроцитов составляют макроциты. Сдвиг эритроцитометрической кривой вправо наблюдается при В12-и фолиеводефицитной анемиях, алкоголизме, диффузных поражениях печени.

Макроциты

Анизоцитоз. Наличие в мазке крови эритроцитов разного размера называется анизоцитозом. Выделяют три степени анизоцитоза:

1-я степень: 50% эритроцитов в поле зрения представлены клетками разного размера (микро- или макроцитами);
2-я степень: 75 % эритроцитов в поле зрения представлены клетками разного размера;
3-я степень: более 75 % эритроцитов в поле зрения представлены клетками разного размера. При оценке величины эритроцитов в анализе крови целесообразно указывать преобладание микро- или макроанизоцитоза.

Форма . Эритроциты могут менять форму, становясь овальными, грушевидными, звездчатыми, зазубренными и др. Описаны патологические формы эритроцитов: микроциты (эритроциты маленького размера); микросфероциты (шаровидные эритроциты с увеличенной толщиной и уменьшенным диаметром, без просветления в центре), являющиеся патогномоничным признаком наследственной гемолитической микросфероцитарной анемии; овалоциты или эллиптоциты — в количестве до 10% встречаются у здоровых людей, у больных с наследственным эллиптоцитозом составляют 25–75 % общего числа эритроцитов; мишеневидные эритроциты (с окрашенным участком в центре клетки на фоне неокрашенной зоны) часто встречаются при талассемии, при железодефицитных анемиях; шизоциты (мелкие фрагменты величиной 2–3 мкм); акантоциты (Burr Cells) — эритроциты с зазубренным краем, с «заусеницами»; дрепаноциты (эритроциты серповидной формы), встречающиеся при серповидно-клеточной анемии; планоциты, или лептоциты (плоские эритроциты).

Овалоциты

Мишеневидные эритроциты

Дрепаноциты (эритроциты серповидной формы)

Наличие эритроцитов разной формы называется пойкилоцитозом. Выделяют четыре степени пойкилоцитоза:

0 степень: в поле зрения менее 10 % эритроцитов разной формы;
1-я степень: в поле зрения 10—25 % эритроцитов разной формы;
2-я степень: в поле зрения до 50 % эритроцитов разной формы;
3-я степень: в поле зрения более 50 % эритроцитов разной формы.

Анизо- и пойкилоцитоз — неспецифические признаки анемий различного генеза. При нарастании тяжести анемии увеличивается количество эритроцитов разной формы и размера.

Окраска . Эритроциты окрашиваются кислыми красками в розовато-красный цвет. Степень оксифилии клетки обусловлена присутствием гемоглобина и его количеством. Эритроциты здоровых людей имеют равномерную окраску и небольшое просветление в центре (нормохромия). Бледная окраска эритроцитов с широкой неокрашенной центральной частью называется гипохромией. Гипохромия эритроцитов обусловлена низким содержанием гемоглобина в эритроцитах и чаще характерна для дефицита железа, но также имеет место при свинцовом отравлении, талассемии. Гипохромия обычно сочетается с микроцитозом. Выделяют три степени гипохромии:

1-я степень: просветление в центре несколько больше нормы;
2-я степень: окрашенная часть представлена в виде узкой ленты;
3-я степень: окрашенная часть представлена в виде очень узкого кольца.

Усиленная окраска эритроцитов называется гиперхромией, обусловлена увеличением объема эритроцитов и обычно сочетается с макро- и мегалоцитозом. Гиперхромными могут быть и микросфероциты. Макроциты — большие эритроциты с сохраненным просветлением в центре, мегалоциты — гигантские эритроциты без просветления. Эти изменения эритроцитов свидетельствуют о патологическом кроветворении, связанном с дефицитом витамина В12, фолиевой кислоты. Дефицит данных факторов кроветворения часто имеет место при дифиллоботриозе, органических заболеваниях желудка, алкоголизме, беременности.

Незрелые формы. Анизохромия — различная интенсивность окрашивания отдельных эритроцитов или участков одного эритроцита, часто встречается при железодефицитной анемии.

Полихроматофилия (полихромазия) — недостаточное накопление гемоглобина в эритроцитах с остатками базофильной субстанции. Полихроматофилия обусловлена смешением двух высокодисперсных коллоидных фаз, из которых одна (с кислой реакцией) представляет собой базофильную субстанцию, а другая (со слабощелочной реакцией) — гемоглобин. Благодаря этому незрелый эритроцит воспринимает и кислую, и щелочную краску и в зависимости от того, преобладает в них базофильный компонент цитоплазмы или гемоглобин, окрашивается в цвет от синего до серовато-розового. Полихроматофильными обычно бывают и ретикулоциты. В норме встречаются единичные полихроматофильные эритроциты. Число их может увеличиваться при усиленном эритропоэзе (постгеморрагические, гемолитические анемии). Анемии, протекающие с полихроматофилией, имеют благоприятное течение. Выделяют три степени полихромазии:

Р1: единичные полихроматофилы через каждые 2–3 поля зрения;
Р2: 1—4 полихроматофила в каждом поле зрения;
РЗ: более 10 полихроматофилов в каждом поле зрения.

Полихроматофилы можно определять не только в обычном препарате, но и в толстой капле крови (Кост Е. А., 1975):

в норме обнаруживают 1–2 эритроцита с базофильной сеточкой не в каждом поле зрения и обозначают Р+ (полихромазия);
Р2: 3–5 полихроматофилов;
РЗ: 5–10 полихроматофилов;
Р4: более 10 полихроматофилов.

Чаще встречается первая степень полихромазии.

При талассемии и других формах малокровия встречаются так называемые мишеневидные эритроциты — с окрашенным участком в центре клетки на фоне неокрашенной зоны.

При морфологическом исследовании эритроцитов необходимо определить наличие в мазке патологических форм эритроцитов или включений в эритроцитах. Эритроциты с ядром (нормобласты, эритробласты) встречаются при самых разных состояниях. Наиболее высокая степень содержания нормобластов имеет место при гемолитической анемии в момент гемолитического криза, при хроническом миелофиброзе, метастазах злокачественных опухолей в костный мозг. Умеренное количество отмечается при остром эритромиелозе, при миелодиспластическом синдроме (МДС) количество нормобластов колеблется от 1 до 4 на 100 эритроцитов (Яворковский Л. И. и др., 1992), при витамин В12-дефицитной анемии преходящий нормобластоз диагностирован после кровопотери.

Включения. При витамин В12-дефицитной анемии и после спленэктомии встречаются эритроциты с остатками ядер в виде колец Кебота, телец Жолли, пылинок Вейденрейха. Тельца Жолли — остатки ядерного хроматина округлой формы, размером 1 мкм и более, в количестве от 1 до 3 в эритроците, красно-фиолетового цвета. Кольца Кебота — остатки ядерной оболочки в виде тонких нитеобразных колечек, восьмерок или эллипсов, окрашенных в красный цвет. Они иногда встречаются при истинной полицитемии, лейкозах, а также отравлениях тяжелыми металлами. Пылинки Вейденрейха — остатки ядерного вещества розового, иногда голубого цвета, встречаются при тяжелых анемиях, главным образом мегалобластных, похожи на базофильную пунктацию эритроцитов.

Тельца Жолли

Кольца Кебота

Тельца Гейнца—Эрлиха представляют собой обычно одно круглое включение (реже 2–3) размером 1–2 мкм, располагающееся по периферии эритроцита. Изредка тельца обнаруживаются вне клетки. При обычной окраске по Романовскому они не видны. Определяют их по методике Дейче (Тодоров И., 1963) с метиловым фиолетовым. Тельца при этом окрашиваются в пурпурно-красный цвет. Считается, что это денатурированные липопротеины оболочки эритроцита. Появление телец Гейнца—Эрлиха — доказательство тяжелого токсического повреждения веществами, окисляющими гемоглобин (нитробензол, анилин, нитроглицерин, бертолетова соль, сульфаниламидные препараты) и приводящими к гемолизу.

Тельца Гейнца—Эрлиха

источник

Морфологическое исследование клеток крови

Морфологическое исследование эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов и подсчет лейкоцитарной формулы производят в окрашенных мазках крови.

Качественная оценка эритроцитов имеет большое диагностическое и прогностическое значение. Обязательным является определение размеров и формы эритроцитов, их окраски, наличие и степень анизоцитоза и пойкилоцитоза, наличие патологических форм эритроцитов и включений в них.

При отсутствии автоматического анализатора для определения размеров эритроцитов измеряют их средний диаметр с построением эритроцитометрической кривой Прайс-Джонса (гистограмма распределения эритроцитов по размеру). Диаметр нормальных эритроцитов в мазке равен 7–8 мкм, средний диаметр — 7,55 мкм. Эритроциты размером более 8 мкм называются макроцитами (большие эритроциты с сохраненным просветлением в центре), более 12 мкм — мегалоциты или гигантоциты (гигантские эритроциты без просветления в центре). Эритроциты диаметром менее 6,5 мкм называются микроцитами, менее 2–3 мкм — шизоцитами. В норме в периферической крови выявляется 15,5 % микроцитов и 16,5 % макроцитов.

При использовании автоматического анализатора клеток крови проводится определение среднего объема эритроцитов (MCV), в зависимости от которого различают микроциты (MCV менее 75 мкм 3 ), нормоциты (MCV в пределах 75–95 мкм 3 ) и макроциты (MCV более 95 мкм 3 ). На основании среднего объема эритроцитов строится эритроцитометрическая кривая.

Клиническое значение. При микроцитозе 30–50 % от общего числа эритроцитов составляют микроциты. Микроцитоз наблюдается при ряде наследственных анемий (талассемии, гемоглобинопатии, микросфероцитоз, серповидноклеточная анемия, атрансферринемия, врожденная форма сидеробластной анемии).

Сдвиг эритроцитометрической кривой влево (увеличение количества эритроцитов малого диаметра) наблюдается при многих приобретенных анемиях (железодефицитные анемии, анемия хронических заболеваний, анемии при отравлении свинцом и др.).

При макроцитозе 50 % и более от общего числа эритроцитов составляют макроциты. Макроцитоз чаще всего наблюдается при В₁₂— и фолиеводефицитной анемиях.

Увеличение количества эритроцитов разного размера в мазке крови называется анизоцитозом. Это ранний признак анемии, наблюдающийся при ее легкой степени.

Выделяют три степени анизоцитоза, которые обозначаются цифрами 1, 2 и 3.
«а–1» — 30–50 % эритроцитов имеют измененный диаметр.
«а–2» — 50–75 % анизоциты
«а–3» — >75 % анизоциты. Указать тенденцию изменений (микроцитоз или макроцитоз).

Мазок периферической крови при железодефицитной анемии.
Анизоцитоз, микроцитоз, гипохромия 2–3, шизоциты

Мазок периферической крови при В₁₂-дефицитной анемии.
Анизоцитоз, макроцитоз, гиперхромия, тельца Жолли.

В мазке крови большинство эритроцитов имеет округлую форму, и только малая часть (до 10 %) отличается по своей форме. Увеличение количества эритроцитов разной формы называется пойкилоцитозом. При этом эритроциты могут становиться овальными, грушевидными, звездчатыми, зазубренными и др. Пойкилоцитоз является результатом продукции патологических клеток костным мозгом либо развивается вследствие повреждения нормальных клеток после выхода их из костного мозга в кровяное русло. Присутствие некоторых специфических форм эритроцитов (микросфероцитоз, эллиптоцитоз, стоматоцитоз) в большем количестве по сравнению с нормой имеет важное диагностическое значение.

Мазок периферической крови при наследственной гемолитической анемии Минковского-Шофара

Микросфероциты — эритроцитарные клетки диаметром менее 5,0 мкм, правильной сферической формы, без физиологического просвета. В норме допускается до 0,9 % микросфероцитов.

1,4 % микросфероцитов уже считается диагностическим для анемии Минковского-Шофара. Во время гемолитического криза количество микросфероцитов достигает 25–30 % и более.

Мазок периферической крови при эллипсоцитарной наследственной гемолитической анемии

Эллипсоциты (овалоциты)
В норме у здорового человека не более 5,0 % эллипсоцитов. Если более 25 %, это диагностическое количество для эллипсоцитоза. Эллипсоцитоз, может быть, как вариант нормы, если он не сопровождается анемией — конституционная аномалия.

Если эллипсоцитоз сопровождается анемией, падением Нb и Er, это редкая наследственная эллипсоцитарная гемолитическая анемия.

Стоматоциты в мазке периферической крови

Стоматоциты — эритроциты с центральным просветлением в виде вытянутой полоски и своей изогнутостью напоминают форму рта. Встречаются при наследственном стоматоцитозе, аутоиммунных гемолитических анемиях, заболеваниях печени.

Мазок периферической крови при анемии. Мишеневидные эритроциты с центральным расположением молекулы гемоглобина в виде мишени. Характерны для талассемии с патологической формой HGB-A, HGB-A2, HGB-E, HGB-F и др. Диагноз ставится после электрофоретического исследования молекулы гемоглобина.

Мазок периферической крови при серповидноклеточной наследственной гемолитической анемии

Серповидные эритроциты (дрепаноциты)

Мазок периферической крови при идиопатическом миелофиброзе. Анизоцитоз, макроцитоз, гиперхромия, пойкилоцитоз, дакриоциты — каплевидные эритроциты встречаются при всех хронических миелопролиферативных заболеваниях, но чаще и в большем количестве при идиопатическом миелофиброзе.

Выделяют три степени пойкилоцитоза, которые также обозначаются цифрами п–1, 2 и 3:
«п»–1 — единичные эритроциты в каждом поле зрения имеют изменённую форму
«п»–2 — 50 % эритроцитов имеют изменённую форму
«п»–3— >50 % эритроцитов имеют изменённую форму

Как и анизоцитоз, пойкилоцитоз является неспецифическим признаком любой анемии и отражает ее степень. Однако, в отличие от анизоцитоза, пойкилоцитоз появляется только при выраженной анемии и имеет более неблагоприятное прогностическое значение.

Мазок периферической крови при гемолитической анемии. Анизоцитоз 2, пойкилоцитоз 3 микросфероциты, мишеневидные эритроциты, дакриоциты

Эритроциты здоровых людей являются нормохромными, т.е. имеют равномерную окраску и небольшое (не более 1/3 диаметра клетки) просветление в центре (MCH — 25–34 пг, MCV — 80–95 fl, ЦП — 0,85–1,05).

Гипохромия — увеличение центральной неокрашенной части эритроцита больше нормы (MCH Мазок периферической крови при железодефицитной гипохромной анемии. Анизоцитоз, микроцитоз, гипохромия 2

Гипохромный эритроцит имеет расширенный физиологический просвет, сниженную плотность окраски:
МСН 34 пг; ЦП > 1,1; MCV > 95 фл). Более интенсивно окрашиваются микросфероциты.

Мазок периферической крови при В₁₂-дефицитной анемии. Анизоцитоз, макроцитоз,гиперхромия

Гиперхромия — интенсивная окраска эритроцитов, связанная с повышенным содержанием гемоглобина, физиологический просвет уменьшен или отсутствует совсем.

В норме эритроциты окрашиваются кислыми красками, но молодые эритроциты с остатками ядерной субстанции (ретикулоциты) могут окрашиваться основными, приобретая различные оттенки серовато-сиреневого, серовато-фиолетового или серовато-голубого цвета. Эти клетки называются полихроматофилами. Полихроматофилия (полихромазия) — показатель усиленной регенерации костного мозга (наблюдается при гемолитических и постгеморрагических анемиях, при хронических миелопролиферативных заболеваниях, в результате лечения В₁₂-дефицитной анемии).

В зависимости от числа полихроматофилов в поле зрения различают три степени полихромазии (1, 2, 3).
Полихромазия 1 — Единичные через поле зрения.
Полихромазия 2 — Единичные в каждом поле зрения.
Полихромазия 3 — Несколько полихроматофилов в каждом поле зрения.

Мазок периферической крови при гемолической анемии. Полихромазия 3

При различных состояниях в мазке крови могут обнаруживаться патологические формы эритроцитов (ядерносодержащие — нормобласты), а также внутриэритроцитарные включения ядерного и цитоплазматического происхождения. Ядро содержащие эритроциты (синонимы: эритрокариоциты, нормобласты) в значительном количестве встречаются при гемолитических анемиях (прежде всего — гемолитическом кризе) и остром эритромиелозе (М6 по FAB-классификации). Умеренный нормобластоз наблюдается при постгеморрагических анемиях, сублейкемическом миелозе и метастазах злокачественных опухолей в костном мозге. Единичные нормобласты могут встречаться при В₁₂-дефицитной анемии, миелодиспластических синдромах, хроническом миелолейкозе.

Нормобласты отмечаются во время подсчета лейкоцитарной формулы на 100 лейкоцитов.

Пример:
Нормобласты — 80 на 100 лейкоцитов, возможно и 100 на 100 лейкоцитов и даже более.

Гематологический анализатор считает лейкоциты и нормобласты в одном канале и суммирует их, как лейкоциты, увеличивая при этом истинное количество WBC в разы. Требуется пересчет истинного количества лейкоцитов.

Пример:
Количество лейкоцитов в периферичекой крови — 18,0 х 10 9 /л (данные анализатора). Нормобласты — 80/100 лейкоцитов. Составляем пропорцию:

(100+80) — 18 х 10 9 /л
100 — Х,

где Х — истинное количество лейкоцитов.

Истинное количество лейкоцитов в периферической крови равно 10 х10 9 /л.
Уровень лейкоцитов при гемолитическом кризе повышается, отмечается сдвиг влево до миелоцитов.

Мазок периферической крови при гемолитической анемии. Анизоцитоз, пойкилоцитоз, полихромазия, нормобластоз.

Мазок периферической крови больного после спленэктомии. Множественные тельца Жолли.

Мазок периферической крови при гипохромной анемии. Анизоцитоз, микроцитоз, гипохромия, базофильная пунктация и кольцо Кебота.

Мазок периферической крови при B₁₂-дефицитной анемии. Анизоцитоз, макроцитоз, гиперхромия, множественные кольца Кебота.

Мазок периферической крови при гиперхромной анемии.

Базофильная пунктация эритроцитов
Среди внутриэритроцитарных включений ядерного происхождения различают тельца Жолли (круглые включения сине-фиолетового или вишнево-красного цвета диаметром 1–2 мкм — остатки ядра), кольца Кебота (остатки ядерной оболочки в форме тонких нитеобразных колец, “восьмерки” или эллипса, окрашенные в красный цвет) и пылинки Вейденрейха (мелкая азурофильная, иногда голубая зернистость, чаще обнаруживается в мегалоцитах). Ядерные включения свидетельствуют о неэффективном эритропоэзе и встречаются при В₁₂-дефицитных и гемолитических анемиях. Кроме того, эритроциты с тельцами Жолли появляются после спленэктомии и при функциональной гипосплении и асплении у больных хроническими миелопролиферативными заболеваниями.

К внутриэритроцитарным включениям цитоплазматического происхождения относится базофильная пунктация (зернистость), которая представляет собой патологическую преципитацию вещества рибосом, перерожденных митохондрий и сидеросом и выглядит как точечная зернистость темно-синего цвета различной величины. Эритроциты с базофильной пунктацией встречаются при токсическом повреждении костного мозга (отравления свинцом, цинком, ртутью и др.), ряде анемий талассемии, мегалобластные анемии), миелодиспластических синдромах, тяжёлых анемиях другого происхождения, при лечении цитостатиков.
Это является неблагоприятным прогностическим признаком.

источник

Морфологическое исследование эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов и подсчет лейкоцитарной формулы производят в окрашенных мазках крови.

Качественная оценка эритроцитов имеет большое диагностическое и прогностическое значение. Обязательным является определение размеров и формы эритроцитов, их окраски, наличия и степени анизоцитоза и пойкилоцитоза, наличия патологических форм эритроцитов и включений в них.

При отсутствии автоматического анализатора для определения размеров эритроцитов измеряют их средний диаметр с построением эритроци-тометрической кривой Прайс-Джонса (гистограмма распределения эритроцитов по размеру). Диаметр нормальных эритроцитов в мазке равен 7-8 мкм, средний диаметр — 7,55 мкм.

Эритроциты размером более 8 мкм называются макроцитами (большие эритроциты с сохраненным просветлением в центре), более 12 мкм — мегалоциты или гигантоциты (гигантские эритроциты без просветления в центре). Эритроциты диаметром менее 6,5 мкм называются микроцитами, менее 2-3 мкм — шизоцитами. В норме в периферической крови выявляется 15,5% микроцитов и 16,5% макроцитов.

При использовании автоматического анализатора клеток крови проводится определение среднего объема эритроцитов (MCV), в зависимости от которого различают микроциты (MCV менее 75 мкм3), нормоциты (MCV в пределах 75-95 мкм3) и макроциты (MCV более 95 мкм3). На основании среднего объема эритроцитов строится эритроцитометрическая кривая.

При микроцитозе 30-50% от общего числа эритроцитов составляют микроциты. Микроцитоз наблюдается при ряде наследственных анемий (талассемии, гемоглобинопатии, микросфероцитоз, серповидноклеточная анемия, атрансферринемия, врожденная форма сидеробластной анемии).

Сдвиг эритроцитометрической кривой влево (увеличение количества эритроцитов малого диаметра) наблюдается при многих приобретенных анемиях (железодефицитные анемии, анемия хронических заболеваний, анемии при отравлении свинцом и др.).

При макроцитозе 50% и более от общего числа эритроцитов составляют макроциты. Макроцитоз чаще всего наблюдается при В12- и фолиеводефицитной анемиях.

Увеличение количества эритроцитов разного размера в мазке крови называется анизоцитозом. Это ранний признак анемии, наблюдающийся при ее легкой степени. Выделяют три степени анизоцитоза, которые обозначаются цифрами 1, 2 и 3.

Степень анизоцитоза эритроцитов (RDW — the Red cell Destribution Width) в современных гематологических анализаторах определяется автоматически. У здоровых людей большая часть эритроцитов (68%) представлена нормоцитами; микроциты составляют около 15%, макроциты — 17%. В норме RDW колеблется от 9,9 до 14,5%. При увеличении количества эритроцитов разного размера RDW нарастает.

В мазке крови большинство эритроцитов имеет округлую форму и только малая часть (до 10%) отличается по своей форме. Увеличение количества эритроцитов разной формы называется пойкилоцитозом. При этом эритроциты могут становиться овальными, грушевидными, звездчатыми, зазубренными и др.

Пойкилоцитоз является результатом продукции патологических клеток костным мозгом либо развивается вследствие повреждения нормальных клеток после выхода их из костного мозга в кровяное русло. Присутствие некоторых специфических форм эритроцитов (микросфероцитоз, эллиптоцитоз, стоматоцитоз) в большем количестве по сравнению с нормой имеет важное диагностическое значение.

Выделяют три степени пойкилоцитоза, которые также обозначаются цифрами 1, 2 и 3. Как и анизоцитоз, пойкилоцитоз является неспецифическим признаком любой анемии и отражает ее степень. Однако, в отличие от анизоцитоза, пойкилоцитоз появляется только при выраженной анемии и имеет более неблагоприятное прогностическое значение.

Эритроциты здоровых людей являются нормохромными, т. е. имеют равномерную окраску и небольшое (не более 1/3 диаметра клетки) просветление в центре. Гипохромия — увеличение центральной неокрашенной части эритроцита больше нормы. В зависимости от размеров просветления выделяют три степени гипохромии (1, 2, 3).

Усиленная окраска эритроцитов называется гиперхромией. Гиперхромия обусловлена увеличением объема эритроцитов и обычно сочетается с макроцитозом и мегалоцитозом. Более интенсивно окрашиваются микросфероциты.

В норме эритроциты окрашиваются кислыми красками, но молодые эритроциты с остатками ядерной субстанции (ретикулоциты) могут окрашиваться основными, приобретая различные оттенки серовато-сиреневого, серовато-фиолетового или серовато-голубого цвета. Эти клетки называются полихроматофилами. Полихроматофилия (полихромазия) — показатель усиленной регенерации костного мозга (наблюдается при гемолитических и постгеморрагических анемиях). В зависимости от числа полихроматофилов в поле зрения различают три степени полихромазии (1, 2, 3).

При различных состояниях в мазке крови могут обнаруживаться патологические формы эритроцитов (ядросодержащие — нормоциты), а также внутриэритроцитарные включения ядерного и цитоплазматического происхождения. Ядросодержащие эритроциты (синонимы: эритрокариоциты, нормоциты) в значительном количестве встречаются при гемолитических анемиях (прежде всего — гемолитическом кризе) и остром эритромиелозе (М6 по FAB-классификации).

Умеренный нормоцитоз наблюдается при постгеморрагических анемиях, сублейкемическом миелозе и метастазах злокачественных опухолей в костном мозге. Единичные нормоциты могут встречаться при В12-дефицитной анемии, миелодиспластических синдромах, хроническом миелолейкозе.

Среди внутриэритроцитарных включений ядерного происхождения различают тельца Жолли (круглые включения сине-фиолетового или вишнево-красного цвета диаметром 1-2 мкм), кольца Кебота (остатки ядерной оболочки в форме тонких нитеобразных колец, «восьмерки» или эллипса, окрашенные в красный цвет) и пылинки Вейденрейха (мелкая азурофильная, иногда голубая зернистость, чаще обнаруживается в мегалоцитах). Ядерные включения свидетельствуют о неэффективном эритропоэзе и встречаются при В12-дефицитных и гемолитических анемиях.

Кроме того, эритроциты с тельцами Жолли появляются после спленэктомии и при функциональной гипосплении и асплении у больных хроническими миелопролиферативными заболеваниями.

К внутриэритроцитарным включениям цитоплазматического происхождения относится базофильная пунктация (зернистость), которая представляет собой патологическую преципитацию вещества рибосом, перерожденных митохондрий и сидеросом и выглядит как точечная зернистость темно-синего цвета различной величины. Эритроциты с базофильной пунктацией встречаются при токсическом повреждении костного мозга (отравления свинцом, цинком, ртутью и др.), ряде анемий (талассемии, мегалобластные анемии), миелодиспластических синдромах и являются неблагоприятным прогностическим признаком.

источник

Морфология эритроцитов изменяется при многих гематологических заболеваниях и синдромах, что проявляется уменьшением размеров, изменением формы эритроцитов, интенсивности и характера их окрашивания, появлением патологических включений. О морфологии эритроцитов судят при исследовании окрашенных мазков крови с помощью иммерсионной системы микроскопа.

Микроцитоз — преобладание в мазках крови эритроцитов с диаметром 5-6,5 мкм — наблюдают при наследственном сфероцитозе, железодефи-цитной анемии, талассемии. Все эти клетки имеют уменьшенный объём и меньшее количество Hb. В основе изменений размеров эритроцитов лежит нарушение синтеза Hb.

Макроцитоз — присутствие в мазках крови эритроцитов диаметром более 9 мкм — выявляют при макроцитарных анемиях, заболеваниях печени, дефиците витамина В₁₂ и фолиевой кислоты, анемии беременных, у больных со злокачественными образованиями, при гипотиреозе, лейкозах.

Мегалоцитоз — появление в мазках крови эритроцитов диаметром 11-12 мкм, гиперхромных, без просветления в центре, овальной формы. Наличие мегалоцитов в мазках крови характерно для анемий, обусловленных дефицитом витамина В₁₂ и фолиевой кислоты, анемии при глистных инвазиях.

Анизоцитоз — присутствие в мазках крови эритроцитов, различающихся по размеру: с преобладанием эритроцитов малого диаметра — микроани-зоцитоз, с преобладанием эритроцитов большого диаметра — макроанизо-цитоз. Анизоцитоз — ранний признак анемии, изолированно, без других морфологических изменений в эритроцитах развивается при лёгких формах анемии.

Пойкилоцитоз — изменения различной степени выраженности формы эритроцитов, которая становится отличной от дисковидной. Это важнейший признак патологического изменения эритроцитов. В отличие от ани-зоцитоза, он развивается при сильно выраженных анемиях и является более неблагоприятным признаком.

Лишь немногие типы форм эритроцитов оказываются специфичными для конкретных патологий. К ним относятся микросфероциты, специфичные для наследственного микросфероцитоза (болезни Минковского-Шоффа-ра); серповидные клетки, характерные для серповидноклеточной анемии. Другие изменения формы эритроцитов — мишеневидные клетки, аканто-циты, стоматоциты, эллиптоциты, дакриоциты и др., могут появляться при различных патологических состояниях.

Наиболее часто наблюдают бледную окраску эритроцитов с более широкой неокрашенной центральной частью — гипохромия, которая обусловлена низким насыщением эритроцита Hb. Гипохромия эритроцитов, как правило в сочетании с микроцитозом, — характерный признак железоде-фицитных анемий. Гипохромия возможна при отравлениях свинцом, та-лассемии и других наследственных повреждениях эритроцитов.

Усиленная окраска эритроцитов — гиперхромия — связана с повышенным насыщением эритроцитов Hb. Её наблюдают значительно реже, в сочетании с макроцитозом и мегалоцитозом. Эти изменения характерны для больных с дефицитом витамина В₁₂ и фолиевой кислоты (при анемии Аддисона-Бирмера, дифиллоботриозе, злокачественных опухолях желудка, кишечника, алкоголизме).

Полихроматофилия (эритроциты сероватого цвета) обусловлена способностью незрелых эритроцитов (вследствие недостаточного насыщения Hb) окрашиваться кислыми и основными красителями. В норме выявляют единичные полихроматофильные эритроциты. Их количество повышается при усиленном эритропоэзе (постгеморрагические анемии, гемолитические анемии после криза).

Включения в эритроцитах представлены элементами патологической регенерации костного мозга.

Кольца Кебота — остатки ядерной оболочки мегалобласта, имеют вид колечка, восьмерки, окрашиваются в красный цвет. Кольца Кебота обнаруживаются при дизэритропоэзе, в частности при мегалобластных анемиях (витамин В₁₂— и фолиеводефицитных), талассемии, остром эритромиелозе.

Тельца Жолли — мелкие фиолетово-красные включения, присутствующие по 2-3 в одном эритроците, представляют собой остатки ядра мегалобласта. В норме тельца Жолли обнаруживают только в крови новорождённых. Их постоянно находят в мазках крови после спленэктомии. Тельца Жолли можно обнаружить при отравлениях гемолитическими ядами, анемиях различного генеза.

Базофильная зернистость — агрегированная базофильная субстанция в виде синих гранул, лучше выявляется при окраске метиленовым синим. Появление базофильной зернистости в эритроцитах характерно для от

равления свинцом (образована агрегатами рибосом и железосодержащих митохондрий), но также возможно при сидеробластной и мегалобластной анемиях, талассемии.

Тельца Гейнца-Эрлиха — единичные или множественные включения, образованные из денатурированного Hb, которые выявляют при окраске метиловым фиолетовым. Тельца Гейнца-Эрлиха — первый признак наступающего гемолиза, их обнаруживают при отравлениях гемолитическими ядами, анемиях, вызванных дефицитом глюкозо-6-фосфат дегидрогеназы, глутатион редуктазы.

Ядросодержащие клетки эритроцитарного ряда

При различных патологических состояниях в периферической крови можно обнаружить базофильные, полихроматофильные и оксифильные нормобласты (нормоциты). Большое количество нормобластов характерно для гемолитических анемий. Они могут появляться в мазках крови при постгеморрагических анемиях, анемии Аддисона-Бирмера (в стадии ремиссии), острых лейкозах (иногда), метастазах новообразований в костный мозг, лейкемоидных реакциях при злокачественных новообразованиях, после спленэктомии, при тяжёлой сердечной недостаточности.

источник

• Могут быть выявлены различные изменения формы эритроцитов: микро-, сферо-, овало-, эллипто-, стомато-, аканто-, пиропикноцитоз, мишеневидность эритроцитов, что дает основание предположить один из вариантов мембранопатии, а мишеневидность эритроцитов характерна для талассемии.

• При наличии в эритроцитах телец Гейнца-Эрлиха на фоне анизопойкилоцитоза можно предположить один из вариантов наследственной ферментопатии.

• При серповидноклеточной гемолитической анемии проводят метабисульфитную пробу или пробу с герметизацией капли крови, что позволяет увеличить число серповидных эритроцитов и тем самым облегчает диагностику.

• Внутрисосудистый гемолиз проявляется наличием фрагментированных эритроцитов, количество которых иногда достигает 100 %,.

Подтверждение внутриклеточного гемолиза осуществляется при помощи следующих лабораторных показателей:

гемоглобинемия – наличие свободного гемоглобина в крови вследствие активного разрушения эритроцитов;

гемосидеринурия – наличие в моче гемосидерина – продукта окисления в почках избыточного гемоглобина;

гемоглобинурия – наличие в моче неизмененного гемоглобина, признака крайне высокой скорости разрушения эритроцитов.

Подтверждение внутрисосудистого гемолиза осуществляется при помощи следующих лабораторных анализов:общий анализ крови – снижение количества эритроцитов и\или гемоглобина, увеличение количества ретикулоцитов;

· биохимический анализ крови – увеличение общего билирубина за счет непрямой фракции.

· мазок периферической крови – при различных способах окраски и фиксации мазка определяется большинство аномалии строения эритроцита.

Биохимические и иммунологические исследования

· прямой и непрямой тест Кумбса;

· циркулирующие иммунные комплексы;

· осмотическая резистентность эритроцитов;

· исследование активности ферментов эритроцита (глюкоза-6-фосфатдегидрогназа (Г-6-ФДГ), пируваткиназа и др.);

· проба на серповидность эритроцитов;

· бактериологический посев крови;

· исследование «толстой капли» крови;

· проба Хема, проба Хартмана (сахарозная проба).

Приобретенные иммунные гемолитические анемии характеризуются образованием антител против антигенов на поверхности аутологичных эритроцитов.

¢ 1. Аутоиммунные а) с тепловыми аутоантителами б) холодовыми аутоантителами

¢ 2. Аллоиммунные (изоиммунные) при посттрансфузионных реакциях, трансплацентарной передаче материнских аллоантител плоду ГБН

¢ 3. Иммунные, вызванные приемом лекарственных препаратов

Лечение.Необходимо установить причину анемии. При гемолитической анемии:

2. глюкокортикостероиды при аутоиммунных гемолитических анемиях в средних дозах

4. трансфузия эритроцитов при гемолитических кризах, нужны отмытые эритроциты, индивидуально подобранные

5. при повышении уровня железа необходимо его удалить — десферал

Хронический миелоидный лейкоз

Хронический миелолейкоз(ХМЛ) – форма лейкоза, в основе которого лежит поражение стволовой клетки, характеризующееся увеличением миелоидных элементов на разных стадиях их развития и обязательным наличием Ph хромосомы (филадельфийской хромосомы) или BCR-ABL транскрипта

Этиология.Хромосомный маркер опухолевого клона Ph\’-хромосома, называемая филадельфийской, которая присутствует почти во всех клетках костного мозга гранулоцитах, моноцитах, эритрокариоцитах и мегакариоцитах, в лимфоцитах ее нет.

Патогенез.Болезнь связана с генетической аномалией: хромосомной транслокацией, которая проявляется присутствием в кариотипе филадельфийской хромосомы. При этой транслокации, участки 9-й и 22-й хромосом меняются местами. В результате, фрагмент гена BCR из хромосомы 22 и ген ABL из хромосомы 9 образуют единую рамку считывания. В норме белок ABL содержит тирозин-киназный домен, продукт мутантного гена также является тирозин-киназой. Белок BCR-ABL взаимодействует с с частью клеточного рецептора к ИЛ-3 (CD123-антигеном). BCR-ABL активирует сигнальный каскад, контролирующий клеточный цикл, ускоряя деление клеток и кроме этого подавляет репарацию ДНК, вызывая неустойчивость генома и делая клетку более восприимчивой к дальнейшим генетическим аномалиям. Bcr-Abl тирозин-киназа — молекулярная патология, ведущая к превращению клетки-предшественника гемопоэза в злокачественный клон.

Клинические фазы

хроническая фаза средняя продолжительность 5-6 лет,Ведущий клинический симптом — спленомегалия как следствие миелоидной метаплазии (инфильтрации) селезенки

• фаза акселерации (10%) (прогрессирующая) — средняя продолжительность 5-6 месяцев

• бластный криз – средняя выживаемость 3-6 месяцев

Основные проявления хронической фазы: Жалобы: слабость, потеря веса (анорексия), тяжесть в животе.

При осмотре – пальпируется увеличенная селезенка, могут выявляться склонность к экхимозам и кровоточивости, повышение температуры, лимфоаденопатия, гепатомегалия, кровоизлияния в сетчатку глаз.

Увеличение селезенки и печени связано с лейкозной инфильтрацией и появлением очагов миелоидного кроветворения в этих органах.

Лабораторные параметры: Лейкоциты >20 x 10 9 /л, Бласты — 1%–10%, базофилы увеличены. Цитогенетика Ph+; BCR-Abl +

В клиническом анализе крови:

• нейтрофильный лейкоцитоз с выраженным ядерным сдвигом влево:

• палочко- и сегментоядерные формы гранулоцитов.

• Часто — увеличение числа базофилов и эозинофилов (базофильно-эозинофильная ассоциация).

Фаза акселерации

Критерии прогрессирующей стадии

• Миелобластов в крови или костного мозга ³10%,

источник

Клинический анализ крови входит в список обязательного диагностического минимума. Анализ дает представление о количестве и качестве эритроцитов, содержании гемоглобина, показателе гематокрита, общем количестве лейкоцитов и тромбоцитов, лейкоцитарной формуле и скорости оседания эритроцитов. На исследование берут венозную кровь в пробирку с ЭДТА (наличие сгустков не допустимо).

2.1. Морфология эритроцитов.

Это «красные кровяные клетки» — высокоспецифичные клетки крови животных и человека, содержащие гемоглобин. Эритроциты переносят кислород от легких к тканям и двуокись углерода от тканей к органам дыхания. Сухое вещество эритроцита содержит около 95% гемоглобина и 5% других веществ — белков и липидов. У млекопитающих эритроциты лишены ядра и имеют форму двояковогнутых дисков. Специфическая форма эритроцитов обусловливает более высокое отношение поверхности к объему, что увеличивает возможности газообмена. Средний диаметр эритроцитов приблизительно равен диаметру кровеносных капилляров. Эритроцит способен «складываться» при прохождении по капиллярам, просвет которых меньше диаметра эритроцита.

Изменение количества эритроцитов в периферической крови может носить, как физиологический, так и патологический характер.

Заболевания крови (первичный эритроцитоз, полицитемия)
Гипоксия при заболеваниях легких, снижающие насыщение крови кислородом, врожденных пороках сердца
Обезвоживание (рвота, диарея)
Недостаточность функции коры надпочечников

Кровопотеря
Гемолиз
Дефицит железа
Дефицит витамина В-12
Дефицит фолиевой кислоты

Изменение размера и формы эритроцитов.

Анизоцитоз — это изменения эритроцитов по размеру. Анизоцитоз может быть физиологическим и патологическим.

Физиологический анизоцитоз — вариабельность диаметра эритроцитов у здорового животного.

Патологический анизоцитоз — изменение эритроцитов по размеру в условиях патологии. Выделяют микроцитоз, шизоцитоз, макроцитоз и мегалоцитоз.

железодефицитная анемия;
заболевания с наличием нормального и патологически измененного пула эритроцитов: гипопластическая анемия, гемоглобинурия, миелопролиферативные заболевания.

Микроцитоз — преобладание в мазке крови эритроцитов малых размеров.

наследственный сфероцитоз;
железодефицитная анемия;

Макроцитоз — преобладание в мазках крови эритроцитов с размерами, превышающими норму.

физиологическая особенность у новорожденных;
макроцитарная анемия, В12 и фолиеводефицитная анемия;
беременность;
заболевания печени;
злокачественные новообразования;
гипотиреоз;
миелопролиферативные заболевания.

Мегалоцитоз — наличие в мазках крови крупных гиперхромных эритроцитов, без просветления в центре, овальной формы.

В12 и фолиеводефицитные анемии;
беременность;
глистная инвазия;
дизэритропоэз.

Шизоцитоз — наличие мелких фрагментов эритроцитов, или дегенеративно измененных клеток неправильной формы.

микроангиопатическая гемолитическая анемия;
васкулиты;
гломерулонефрит;
уремия;
гемоглобинопатия;
ДВС-синдром;
миелодиспластический синдром.

Пойкилоцитоз — изменение формы эритроцитов разной степени выраженности, наблюдающееся практически при любых анемиях. К пойкилоцитам относятся: эхиноциты, акантоциты, стоматоциты, серповидные клетки, мишеневидные клетки, слезовидные клетки, микросфероциты, эллиптоциты.

Эхиноциты — сферические клетки, на поверхности которых располагаются спикулы.

старение эритроцитов;
длительное хранение забранной крови.

Акантоциты — эритроциты, имеющие зубчатую форму. Имеют 3..12 спикул с булавовидными расширениями на концах. Длина и толщина спикул разнообразны. Объем, площадь поверхности, концентрация гемоглобина нормальны.

тяжелые формы гемолитической анемии;
болезни печени.

Стоматоциты — клетки с увеличенной на 20-30% объемом и площадью поверхности, имеют щелевидную форму центрального просвета.

обструктивные болезни печени;
кардиоваскулярной патологии.

Серповидные клетки — характерны для серповидно-клеточной анемии, а также других гемоглобинопатий, содержат гемоглобин S, который способен полимеризоваться и деформировать мембрану (особенно при дефиците кислорода в крови).

Мишеневидные клетки — имеют повышенное содержание холестерина, как следствие — увеличенную площадь поверхности. У них окрашенная периферия, и на фоне светлой центральной части небольшой более темный сферический участок.

гемоглобинопатии;
свинцовая интоксикация;
болезни печени;
длительная механическая и обструктивная желтухе.

Слезовидные клетки — имеют одну большую спикулу и часто содержат тельце Гейнца, являются микроцитами.

миелофиброз;
реже различные формы анемий.

Микросфероциты — специфические клетки для наследственного микросфероцитоза. Выявление их на мазках требует большой тщательности.

Причины: Если популяция микросфероцитов разнородна, то это более характерно для гемолитической анемии.

Сфероцитоз можно рассматривать как терминальную, предгемолитическую стадию, в которую переходят эхиноциты, акантоциты, стоматоциты при необратимых повреждениях.

Эллиптоциты — составляют в норме менее 1% клеток. При разнообразных анемиях их концентрация увеличивается до 10 раз. При этом популяция овалоцитов неоднородна по размерам. Однородность популяции (более 25%) характерна для наследственного эллиптоцитоза.

– красный железосодержащий пигмент крови, выполняющий функцию переноса кислорода из органов дыхания к тканям и углекислого газа от тканей в органы дыхания. У позвоночных и некоторых беспозвоночных находится в красных кровяных клетках — эритроцитах. В общем анализе крови подсчитывается для расчета эритроцитарных параметров, по которым эритроциты делятся на гипо- и нормохромные.

«Рабочие» породы собак (при постоянных усиленных физических нагрузках повышается потребность в кислороде и повышается уровень гемоглобина)
Врожденные пороки сердца
Легочный фиброз
Кишечная непроходимость
Онкологические заболевания

Кровопотери (явные и скрытые)
Инфекционные и аутоиммунные болезни
Глистные инвазии
Недостаток железа в пище
Беременность и лактация
Нарушение усвояемости железа и витамина В12
Злокачественные заболевания крови
Опухолевые поражения желудочно-кишечного тракта
Патологии в системе кровообразования
Болезни костного мозга
Химиотерапия

Собака 130-180 г/л
Кошка 90-150 г/л

Гематокрит — объёмная фракция эритроцитов в цельной крови (соотношение объёмов эритроцитов и плазмы). Величина гематокрита зависит от количества и объёма эритроцитов.

гипоксия различного происхождения
новообразования почек, сопровождающиеся усиленным образованием эритропоэтина
поликистоз и гидронефроз почек
уменьшение объема циркулирующей плазмы (ожоговая болезнь, перитонит и др.)
дегидратация
лейкозы

Анемии
Увеличение объема циркулирующей крови (напр. Беременность, гиперпротеинемия)
Гипергидратация

2.2. Эритроцитарные индексы

Средний объем эритроцита (MCV)— средний корпускулярный объем — средняя величина объема эритроцитов, измеряемая в фемтолитрах (fl) или кубических микрометрах. Средний объем эритроцита нельзя достоверно определить при наличии в исследуемой крови большого числа аномальных эритроцитов. Существует значительные межвидовые различия в значениях среднего объема эритроцитов. Увеличение MCV характеризуется как макроцитоз, уменьшение как микроцитоз. Этот показатель дает важную информацию для дифференциации различных видов анемии.

Анемия апластическая,
гипотиреоз,
заболевание печени,
онкологические заболевания,
мегалобластная анемия (фолиево-, В12-дефицитная).

гемоглобинопатии,
анемии гипохромные и микроцитарные (при недостатке железа, талассемии, хронической патологии),
редко гипертиреоз.

Собака 60-75 мкм^3(фл)
Кошка 39-53 мкм^3(фл)

Средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах (MCHC) – Данный показатель используют для определения типа анемии. Вычисляют его по формуле: MCH = Hb/RBC (Hb – гемоглобин, RBC – количество эритроцитов). Высокие значения средней концентрации гемоглобина в эритроците являются артефактом. Причиной этого может быть гемолиз, хилез, присутствие телец Хейнца, агглютинация эритроцитов или неисправность анализатора.

Гипохромная железодефицитная анемия,
анемия, вызванная онкологическими заболеваниями.

Ширина распределения эритроцитов (RDW) – выражается в процентах и свидетельствует о том, насколько сильно эритроциты различаются между собой по размерам. Это соотношение больших и маленьких по размеру эритроцитов или показатель их гетерогенности.
Повышено:

Анизоцитоз (может быть вызван рядом причин, см. «морфология эритроцитов»)

Норма, т.е. эритроциты одинакового размера

Скорость оседания эритроцитов — скорость разделения крови с добавлением антикоагулянта на два слоя: верхний (прозрачная плазма) и нижний (осевшие эритроциты). СОЭ оценивается по высоте слоя плазмы в мм за 1 час.

животное старшей возрастной группы,
воспалительные процессы,
интоксикации,
острые и хронические инфекции,
аутоиммунные заболевания,
травмы, переломы костей,
состояние после шока, операционных вмешательств,
анемии, состояние после кровопотери,
заболевания почек (хронический нефрит, нефротический синдром),
парапротеинемии (миеломная болезнь, макроглобулинемия Вальденстрема),
прием лекарственных препаратов (эстрогенов, глюкокортикоидов),
некоторые онкологические заболевания,
ревматологические заболевания.

голодание, снижение мышечной массы,
прием кортикостероидов,
беременность,
гипергидратация,
миодистрофии.

Собака 0 – 6 мм/час
Кошка 0 – 13 мм/час

2.3. Ретикулоциты

Ретикулоциты – молодые незрелые эритроциты, которые уже лишились ядра, но их цитоплазма содержит рибосомы и небольшое количество гемоглобина. Цитоплазма ранних ретикулоцитов содержит митохондрии и полирибосомы, необходимые для синтеза гемоглобина. Свое название ретикулоциты получили благодаря присутствию в цитоплазме сети, выявляемой при окрашивании мазков крови основными красителями. У собак, кошек и свиней созревание ретикулоцитов начинается в костном мозге и завершается в периферической крови и селезенке. У кошек при регенераторной анемии в крови обнаруживается ретикулоциты двух типов: агрегатные – более молодые у которых рибосомальная РНК осаждается крупных глыбок и пунктатные – более зрелые в виде отдельных мелких включений. У здоровых кошек, а также у кошек с регенераторной анемией число пунктатных или зернистых ретикулоцитов значительно больше, чем у животных других видов. Это связано с тем, что созревание ретикулоцитов, сопровождающееся утратой рибосом, у кошек протекает медленнее по сравнению с другими животными. В норме у здоровых кошек могут обнаруживаться в крови единичные пунктатные ретикулоциты. У кошек производится отдельно подсечет агрегатных и пунктатных ретикулоцитов, что дает дополнительную информацию о степени регенерации при анемии. В течение дня или быстрее циркулирующие в крови агрегатные ретикулоциты созревают в зернистые. Для созревания зернистых в крови кошек требуется неделя или больше. У собак и других животных из костного мозга высвобождаются относительно незрелые ретикулоциты агрегатного типа, поэтому в окрашенных обычным способом мазках крови они выглядят полихроматофильными и у них процент ретикулоцитов прямо коррелирует с процентом полихроматофильных эритроцитов, выявляемых при обычной окраске мазков крови.

Содержание ретикулоцитов выражают в виде процента от общего числа эритроцитов. Если известно общее число эритроцитов, можно определить абсолютное число ретикулоцитов (в расчете на микролитр). Для этого процент сосчитанных ретикулоцитов умножают на общее число эритроцитов. Изучая ретикулоцитоз, возникший после кровотечения, можно оценить динамику регенерации. Число агрегатных эритроцитов достигает максимума через 4 дня, поскольку необходимо время для их образования из клеток предшественников. У кошек наивысший подъем зернистых ретикулоцитов наступает позднее, их поступление из костного мозга в кровь продолжается после того как начинает повышаться гематокрит и прекращается выход в кровь агрегатных ретикулоцитов и у кошек с умеренной анемией число зернистых ретикулоциов может быть повышенным при незначительном содержании агрегатных.

При гемолитической анемии абсолютное число ретикулоцитов обычно выше, чем при кровотечении, это связано с тем, что концентрация железа в плазме в случае гемолитической анемии не снижена как при кровотечении.

2.4. Морфология лейкоцитов.

Лейкоцитарная формула — процентное соотношение различных видов лейкоцитов, определяемое при подсчёте их в окрашенном мазке крови под микроскопом.

Сдвиг лейкоцитарной формулы влево — увеличение количества незрелых (палочкоядерных) нейтрофилов в периферической крови, появление метамиелоцитов (юных), миелоцитов;

острые инфекционные заболевания,
физическое перенапряжение,
ацидоз и коматозные состояния.

Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо — уменьшение нормального количества палочкоядерных нейтрофилов и увеличение числа сегментоядерных нейтрофилов с гиперсегментированными ядрами (мегалобластная анемия, болезни почек и печени, состояние после переливания крови).

мегалобластная анемия,
болезни почек и печени,
состояния после переливания крови.

Значительное омоложение клеток — так называемый «бластный криз» — наличие только бластных клеток: острые лейкозы, метастазы злокачественных новообразований, обострение хронических лейкозов;

«Провал» лейкоцитарной формулы – бластные клетки, промиелоциты и зрелые клетки, промежуточных форм нет: характерно для дебюта острого лейкоза.

Палочкоядерные нейтрофилы — разновидность нейтрофилов. Имеют S-образное ядро (отсюда и название). С течением времени палочкоядерные нейтрофилы созревают и преобразуются в сегментоядерные нейтрофилы, под действием определенных стимулов дифференцировки. Палочкоядерные нейтрофилы являются лишь одним из заключительных этапов дифференцировки нейтрофильного гранулоцита в сегментоядерный нейтрофил.

инфекции вызванные риккетсиями, бактериями, грибами,спирохетами, некоторыми вирусами,
послеоперационный период,
ишемический некроз тканей,
интоксикация ртутью или свинцом,
эндогенные интоксикации при сахарном диабете, эклампсии, уремии, некрозе гепатоцитов,
онкологические заболевания,
воспалительные процессы: болезни суставов, перитонит, тиреоидит, дерматит,
реакция на некоторые препараты.

бактериальные инфекции, например буцуллез,
некоторые вирусные инфекции, например вирусный гепатит,
тиреотоксикоз,
болезни кровеносной системы: железодефицитные, гипо- и апластические и мегалобластные анемии, острый лейкоз, гиперспленизм,
индивидуальная чувствительной к вводимым препаратам,
анафилактический шок.

Сегментоядерные нейтрофилы — разновидность нейтрофилов, дифференцированных из незрелого палочкоядерного нейтрофила путем сегментации ядра. Выполняют защитную функцию в отношении различных бактериальных и грибковых инфекций, а также поддерживают иммунную систему в норме.

пневмония,
гнойное воспаление (перитонит, отит и т.д.),
острая ишемия или некроз тканей,
обширный ожог,
онкологические заболевания,
заболевания кровеносной системы,
острая кровопотеря.

вирусные инфекции,
аутоиммунные заболевания,
химиотерапия или лучевая терапия,
апластическая анемия,
агранулоцитоз.

Лимфоциты — клетки иммунной системы, представляющие собой разновидность лейкоцитов группы агранулоцитов, белых кровяных клеток. Главные клетки иммунной системы, обеспечивают гуморальный иммунитет (выработка антител), клеточный иммунитет (контактное взаимодействие с клетками-жертвами), а также регулируют деятельность клеток других типов.

вирусные инфекции,
гипертиреоз,
онкологические заболевания крови и костного мозга.

бактериальные инфекции, сепсис,
лечение кортикостероидами,
иммуносупрессивная терапия,
некоторые разновидности лимфом,
лучевая терапия.

Моноциты — крупный зрелый одноядерный лейкоцит группы агранулоцитов с эксцентрично расположенным полиморфным ядром и азурофильной зернистостью в цитоплазме. Моноцит — наиболее активный фагоцит периферической крови.

Может быть относительныи и абсолютным. Относительный моноцитоз встречается часто при заболеваниях, которые протекают с абсолютной нейтропенией и лейкопенией, и его диагностическое значение в таких случаях невелико.

Инфекции (вирусной, грибковой, протозойной и риккетсиозной этиологии), а также период реконвалесценции после острых инфекций;
Гранулематозы: бруцеллез, саркоидоз, язвенный колит (неспецифический);
Системные коллагенозы (системная красная волчанка), ревматоидный артрит, узелковый периартериит;
Болезни крови (острый моноцитарный и миеломоноцитарный лейкоз, миелопролиферативные заболевания, миеломная болезнь, лимфогранулематоз);
Отравление фосфором, тетрахлорэтаном.

поражение костного мозга со снижением его функции (апластическая анемия, В12-дефицитная анемия),
лучевая болезнь.

Эозинофилы — клетки лейкоцитарного ряда, содержащие в цитоплазме округлые зернистые структуры, окрашиваемые кислыми красителями (в частности, эозином). Уровень содержания их в крови подвержен суточному ритму и регулируется системой гипофиз — кора надпочечников. Основные функции: защитная роль при аллергических реакциях, которая связана с высвобождением содержащегося в них ингибитора (его относят к простагландинам E1 и E2) гистамина, фагоцитарная активность.

паразитарные заболевания,
аллергические реакции,
болезни легких (эозинофильная пневмония, астма, саркоидоз, аллергический аспергиллез, инфильтрат легочный),
заболевания крови (лейкозы, истинная полицитемия, гистиоцитоз с эозинофилией, эозинофильный лейкоз),
аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, склеродермия),
заболевания желудка и кишечника (язвенная болезнь, гастроэнтеропатия аллергическая, гастроэнтерит, эозинофильный гастрит),
ревматические болезни (ревматоидный артрит, периартериит узелковый, фасциит эозинофильный, эозинофильный миозит)
злокачественные новообразования (карциноматоз, рак влагалища и полового члена, рак щитовидной железы, рак кожи, аденокарцинома матки и желудка),
другие болезни (цирроз печени, врожденные пороки сердца, состояние после спленэктомии, перитонеальный диализ, период реконвалесценции после острых инфекционных заболеваний, реакция «трансплантант против хозяина», состояние гипоксии, дефицит магния, радиоактивное облучение),
прием некоторых лекарственных препаратов (аспирин, папаверин, димедрол, эуфиллин, антибиотики пенициллинового ряда, сульфаниламидные препараты, β-блокаторы, витамины группы В, фенибут, имипрамин, химотрипсин, мисклерон, хлорпропамид, препараты половых гормонов).

В12-дефицитная анемия,
травма, шок,
часто клинического значения не имеет.

Базофилы — подвид гранулоцитарных лейкоцитов. При окраске по Романовскому интенсивно поглощают основной краситель и не окрашиваются кислым эозином, в отличие и от эозинофилов, окрашиваемых только эозином, и от нейтрофилов, поглощающих оба красителя.

Базофилы крупнее нейтрофилов и эозинофилов. Гранулы содержат большое количество гистамина, серотонина, лейкотриенов, простагландинов и других медиаторов аллергии и воспаления. Принимают активное участие в развитии аллергических реакций немедленного типа (реакции анафилактического шока).

болезни крови (острый лейкоз, полицитемия),
хронические воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта,
аллергические реакции, в том числе пищевые или на введение препаратов,
хронический миелолейкоз, миелофиброз, эритремия,
хронический язвенный колит,
гипофункция щитовидной железы,
лечение эстрогенами.

острые инфекционные процессы,
повышение уровня гормонов щитовидной железы (гипертиреоз),
беременность,
повышение уровня кортикостероидных гормонов (болезнь Кушинга, прием преднизолона и его аналогов),
часто клинического значения не имеет.

Изменения лейкоцитов.

Токсогенная зернистость.

Образование токсогенной зернистости происходит внутри клетки в результате физико-химических изменений белковой структуры цитоплазмы под влиянием продуктов интоксикации. Появляется раньше ядерного сдвига.

гнойно-септические заболевания,
крупозная пневмония,
прогрессирование патологического процесса,
опухолевый распад,
крупозная пневмония в период рассасывания воспалительного инфильтрата,
перитонит, флегмона и прочие гнойные процессы.

Вакуольная дистрофия.

Является признаком дегенеративных изменений лейкоцитов . Обнаруживается реже, чем токсогенная зернистость , но имеет не менее важное диагностическое значение.

интоксикация,
сепсис, абсцессы,
острая дистрофия печени.

При остром сепсисе, вызванном анаэробной инфекцией, с выраженным лейкоцитозом может наблюдаться вакуолизация почти всех лейкоцитов — «дырявые», «простреленные», лейкоциты.

2.5. Морфология тромбоцитов.

Один из видов форменных элементов крови, участвующий в процессе её свертывания.

В тромбоцитах выявляются специфические гранулы, содержащие серотонин и вещества, участвующие в свёртывании крови. У млекопитающих тромбоциты образуются в кроветворных органах из мегакариоцитов путём отделения участков их цитоплазмы.

обострение хронических заболеваний (болезни печени, ЖКТ, суставов и т.д.),
вирусные или бактериальные инфекции,
заболевания крови или кроветворения,
состояние после хирургических манипуляций,
следствие приёма некоторых групп лекарств,
злокачественные опухоли.

идиопатическая гипоплазия гемопоэза,
мегалобластные анемии (недостаток фолиевой кислоты и витамина В12),
опухолевые поражения (острый лейкоз, раковые метастазы, саркомы, остеомиелосклероз, миелофиброз),
ионизирующее изучение и интоксикация (ряд антибиотиков, миелодепрессивные препараты и химические вещества, уремия, заболевания печени),
вирусные инфекции (гепатит, аденовирусы),
тромбоцитопении, спровоцированные увеличенной деструкцией тромбоцитов,
вирусные инфекции,
механическое повреждение тромбоцитов: в результате протезировании сердечных клапанов, экстракорпоральном кровообращении,
аутоиммунные заболевания.

Собака 160-550 х10^9л
Кошка 160-630 х10^9л

2.6. Перекрестная проба для определения совместимости переливаемой крови.

Перекрестные пробы на совместимость показывают серологическую совместимость или несовместимсть между донором и реципиентом и выявляют присутствие или отсутствие аллоантител в плазме крови. Если в крови реципиента присутствуют антитела против антигенов, на поверхности эритроцитов доноров происходит гемагглютинация этих антител и гемолиз эритроцитов. Если в крови донора или реципиента изначально наблюдается гемолиз или агглютинация пробу на совместимость провести невозможно.

У собак, которым до этого никогда не делали переливания, кровь всегда будет совместимой, так как у этих животных естественным образом не возникают аллоантитела. Однако, если собаке уже раньше проводили переливание крови (не важно как давно), необходимо в обязательном порядке проводить тест на совместимость даже в том случае если используется тот же донор, что и в первый раз, поскольку совместимая группа крови не предотвращает сенсибилизацию пациента против клеток донора, так как не известны точные группы крови донора и реципиента. Промежуток времени между первоначальным переливанием и реакцией на несовместимость может длиться до 4 дней, а риск возникновения такой реакции сохраняется многие годы прошедшие после последнего переливания, при возможном наличии аллоантител.

У кошек первоначальный результат перекрестной пробы до проведения первого переливания может оказаться несовместимым из-за наличия естественным образом возникших аллоантител. Если известна группа крови донора, у кошек, исходя из результата перекрестной пробы, можно предположить группу крови реципиента, основываясь на степени несовместимости основной и второстепенной перекрестной пробы из-за сильного анти-А агглютинина. Развитие макроскопической агглютинации в течение одной минуты даже при проведении простой реакции на стекле между плазмой и эритроцитами показывает А-В несовместимость у кошек.

2.7. Дифференциальная диагностика анемии

Анемия – снижение количества эритроцитов и гемоглобина в крови. Это один из наиболее распространенных синдромов связанных с очень широким спектром заболеваний. Все анемии делятся на регенеративные и нерегенеративные. Регенеративные анемии характеризуются адекватным ответом костного мозга на потерю эритроцитов, который заключается в повышенной продукции и выделении в кровь новых клеток. Регенераторные анемии не связаны с нарушением работы костного мозга и возникают вследствие кровотечения или гемолиза.

При нерегенераторных анемиях костный мозг не может адекватно восполнять уменьшение количества эритроцитов. Для дифференциации регенераторной и нерегенераторной анемии исследуют такие эритроцитарные показатели как общее количество эритроцитов RBC, гемоглобин HB, гематокрит НСТ, средний объем эритроцита MCV, средняя концентрация гемоглобина в эритроците MCHC, ширина распределения эритроцитов по объему RDV, а так же данные биохимического анализа крови (белок, железо) и исследования окрашенного мазка крови.

Исходя из значений эритроцитарных показателей, различают 4 морфологические разновидности эритроцитов, которые лежат в основе классификации анемий:

Макроцитарные гипохромные (↓ MCHC; ↑ MCV) .

Молодые незрелые эритроциты количество которых возрастает при регенераторной анемии и отражает величину эритропоэтической реакции костного мозга. Количество макроцитарно-гипохромных эритроцитов соответствует числу ретикулоцитов, особенно в максимальной точке их продукции т.е. через 4-5 дней после начала тяжелой формы анемии.

При рутинном исследовании мазков крови ретикулоциты определяются как полихроматофилы и их повышение называется полихромазия. У кошек с умеренной анемией в крови появляются только зернистые ретикулоциты, которые в отличие от агрегатных не содержат достаточного количества рибосом, чтобы придать цитоплазме синий цвет, поэтому полихромазия у них может не проявляться. Присутствие в мазках крови ядросодержащих эритроцитов – нормобластов так же может свидетельствовать в пользу регенераторной анемии, однако эти клетки могут также появляться в крови при расстройствах не анемического характера.

Ложная макроцитарно гипохромная анемия может наблюдаться у собак и кошек с персистирующей гипернатриемией.

Макроцитарные нормохромные анемии (↑ MCV).

Это регенераторная анемия с незначительным ретикулоцитозом. Возникает при:

FeLV у кошек,
миелодиспластические синдромы,
макроцитоз в норме у пуделей и у кошек при гипертиреозе (без анемии),
при некоторых иммуноопосредованных нерегенераторных анемиях,
при миелофиброзе у собак.

Нормоцитарные нормохромные анемии.

Большинство эритроцитов имеют нормальные размеры и концентрацию гемоглобина. Такое состояние, когда уровень эритроцитов в крови снижен, а MCHC и MCV находятся в пределах нормальных значений, может свидетельствовать о недостаточном эритропоэзе в костном мозге и отсутствии ретикулоцитов. Наблюдается при нерегенеративной или пререгенеративной анемии. Пререгенеративная анемия бывает при слабой кровопотери или в первые 4-5часов после острой кровопотери или гемолизе эритроцитов, когда в крови еще не успели появиться молодые клетки. Нормоцитарная нормохромная анемия характерна также для следующих состояний:

в ранний период железодефицитной анемии,
хроническое воспаление и неоплазия,
хроническая болезнь почек,
эндокринная недостаточность,
аплазия и гипоплазия костного мозга,
отравление свинцом.

Микроцитарные гипохромные эритроциты (↓ MCHC ; ↓MCV).

Характеризуют железодефицитную анемию у собак и кошек. Однако в этом случае изменения MCHC и MCV проявляются только при значительном снижении запасов железа (месяцы у взрослых, недели у вскармливаемых животных), и изменении морфологии большого числа эритроцитов. Кроме этого у половины собак с хроническим дефицитом железа может иногда наблюдаться ретикулоцитоз, который смещает значение MCV в сторону увеличения.

при портосистемных шунтах у собак и кошек,
длительном лечении рекомбинантным эритропоэтином,
применении лекарственных препаратов или агентов ингибирующих синтез гема,
некоторых наследственных нерегенраторных анемиях,
в норме у акита и шиба-ину (анемия отсутствует),
печеночном липидозе у кошек (нормоцитарная) и др.

Физиологическая анемия у новорожденных животных.

В течение нескольких недель после рождения величина гематокрита и содержание гемоглобина быстро снижаются, а затем возрастают до уровня характерного для взрослых животных к 4-месячному возрасту. Такое понижение эритроцитарных показателей у новорожденных обусловлено всасыванием белков молозива и как следствие повышение объема плазмы за счет осмотического эффекта, сниженной продукции эритроцитов в раннем постнатальном периоде, укороченного времени жизни эритроцитов и быстрого роста животного.

2.8. Группы крови кошек

У кошек существует система групп крови АВ, которая включает три группы крови: группа А, группа В и группа АВ. Наследование групп крови у кошек уникально и имеет важное значение в селекционной работе в отношении неонатального изоэритролиза. Аллель А является доминантным над аллелем В и только у гомозиготных В\В на их эритроцитах появляется антиген группы В. Группа А проявляется у кошек либо гомозиготных А\А, либо гетерозиготных А\В. Редкая группа АВ наследуется отдельно как третий аллель, который является рецессивным по отношению к А и кодоминантным по отношению к В.

В отличие от собак, у кошек от природы имеются аллоантитела или изоантитела, направленные против антигена группы крови, которого им недостает. Так у всех кошек с группой крови В в возрасте несколько недель образуются очень сильные анти-А антитела с высоким гемолизином и титрами агглютинации. Эти анти-А антитела отвечают за реакции несовместимости, представляющие опасность для жизни, например неонатальный изоэритролизис и острые гемолитические реакции на переливание крови.

Несовместимое переливание крови группы А кошек с группой В приводит к очень тяжелой острой гемолитической реакции с признаками гипотонии, брадикардии, конвульсий.

Котята с группой крови А и АВ, получающие в первый день жизни анти А аллоантитела из молозива породистых кошек с крупой В подвергаются риску неонатального изоэритролиза. В отличие от кошек с группой крови В, кошки с группой крови А обычно имеют слабые анти-В аллоантитела с низкими титрами. Эти антитела сокращают срок жизни клеток переливаемой крови группы В кошкам с группой А с сравнительно слабыми признаками острой гемолитической анемии. Однако эти анти-В антитела не связаны с неонатальным изоэритролизом у котят с группой крови В, родившихся у породистых кошек с группой А.

Определение группы крови у кошек проводится для определения совместимости переливаемой крови для выбора подходящих партнеров при спаривании.

Следует проявлять осторожность при аутоагглютинации крови или ее очень низком показателе гематокрита. Рекомендуется проводить проверку крови на аутоагглютинцию с помощью физиологического раствора на предметном стекле. Постоянно присутствующая аутоагглютинация не дает установить группу крови.

У кошек основываясь на результатах перекрестных проб и знании группы крови донора, можно предположить группу реципиента. При сильной несовместимости главных перекрестных проб у кошки-реципиента, вероятно группа В, а у донора тип А или АВ – из-за сильного анти-А у реципиента. При сильной несовместимости второстепенной перекрестной пробы у реципиента, скорее всего, группа А или АВ, а у донора тип В – из-за сильного анти-А в крови донора. Поэтому, если нет возможности определить группу крови, нужно, по крайней мере, выполнить перекрестные пробы на совместимость.

источник