Меню Рубрики

Пцр анализа крови норма у

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) —это высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который способен идентифицировать возбудителей инфекционных болезней человека на основе выявления их генетического материала (ДНК или РНК) в пробах, полученных от обследуемого. Материалом для ПЦР-исследования служат биологические среды и жидкости человека: слизь, моча, кровь, мокрота, соскоб эпителиальных клеток, ткани плаценты, крови, сок простаты, околоплодные воды, плевральная и спинномозговая жидкость. ПЦР позволяет выявить активную стадию заболеваний в то время, когда бактериологические, вирусологические, иммунологические методы диагностики неэффективны.

Специалисты, широко практикующие ПЦР-диагностику:

  • гинеколог;
  • уролог;
  • инфекционист;
  • пульмонолог;
  • фтизиатр;
  • гастроэнтеролог;
  • гематолог;
  • онколог.

Возможны следующие результаты ПЦР-анализа:

  • отрицательный результат — означает, что в исследуемом биологическом материале не обнаружено никаких следов инфекции, которую пытались обнаружить;
  • положительный результат — с большой степенью точности указывает на наличие той или иной инфекции.

Инфекции, определяемые с помощью ПЦР-диагностики:

  • ВИЧ-инфекция;
  • вирусные гепатиты А, В, С, G;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • цитомегаловирусная инфекция;
  • папилломавирусная инфекция (в том числе ее онкогенные виды 16, 18, 31, 33, 45, 51, 52, 56, 58, и 59);
  • герпетическая инфекция;
  • инфекции, передающиеся половым путем (уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз);
  • туберкулез;
  • боррелиоз;
  • клещевой энцефалит;
  • листериоз;
  • кандидоз, в т.ч. кандидоз половых органов;
  • хеликобактерная инфекция.

В норме результат ПЦР-диагностики отрицательный.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя кандидоза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя клещевого энцефалита с большой степенью точности указывает на наличие этого заболевания.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя кандидоза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя туберкулеза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя бактериального вагиноза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя инфекционного мононуклеоза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя урогенитального кандидоза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя урогенитального трихомониаза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя хламидиоза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя кандидоза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя туберкулеза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие вируса простого герпеса с большой степенью точности указывает на наличие герпетической инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие цитомегаловируса с большой степенью точности указывает на наличие цитомегаловирусной инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя листериоза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя кандидоза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя вирусного гепатита B с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя микоплазмоза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

Положительный результат ПЦР-диагностики на наличие возбудителя уреаплазмоза с большой степенью точности указывает на наличие этой инфекции.

  • facebook
  • twitter
  • odnoklassniki
  • vkontakte
  • youtube
  • mail
  • Online диагноз
    © ООО «Интеллектуальные медицинские системы», 2012—2019 гг.
    Все права защищены. Информация сайта юридически защищена, копирование преследуется по закону.

    Размещение рекламы, сотрудничество: info@online-diagnos.ru

    Сайт не несет ответственность за содержание и достоверность размещенного пользователями на сайте контента, отзывы посетителей сайта. Материалы сайта носят исключительно информационно-ознакомительный характер. Содержание сайта не является заменой профессиональной консультации врача-специалиста, диагностики и/или лечения. Самолечение может быть опасно для здоровья!

    источник

    Впервые об анализе методом ПЦР заговорили в 1983 году. Данная методика была разработана Кэри Мюллисом и сотрудниками его лаборатории. С тех пор популярность исследования неуклонно возрастает, т.к. оно обладает существенным рядом преимуществ перед другими методиками.

    На сегодняшний день ПЦР диагностика является эталоном или стандартом в выявлении инфекций и возбудителей заболеваний, особенно протекающих бессимптомно. В первую очередь это доклиническая диагностика.

    Проведение анализа в ПЦР машине

    Сущность ПЦР анализа заключается в том, что в пробирке клонируются (многократно увеличиваются) последовательности нуклеиновых кислот (ДНК или РНК), характерных для определенного вида возбудителей.

    Аббревиатура ПЦР расшифровывается как — полимеразно цепная реакция.

    Главная отличительная черта данного метода – это амплификация, т.е. создание огромного числа копий необходимого гена или его фрагмента. Все это производится вне организма, т.е. в пробирке.

    Так, если проведено 20 циклов ПЦР, то получается примерно 1 миллион копий и более. Это позволяет обнаружить инфекцию даже при её незначительном количестве в исходном материале, когда другие методы анализа бессильны. Это определяет высокую чувствительность данного метода.

    Простыми словами можно провести такую аналогию — одну маленькую песчинку на полу вы не заметите, но после увеличения количества песчинок в миллион раз (проведение ПЦР), кучка песка уже будет хорошо видна.

    Основными преимуществами анализа на инфекции ПЦР-методом являются:

    • наиболее высокая чувствительность и специфичность в сравнении с другими методами, используемыми для выявления инфекционных агентов;
    • возможность выявления микроорганизмов в разнообразных биологических материалах (кровь, моча, влагалищный секрет, слюна и т.д.);
    • возможность выявить одновременно несколько причинных микроорганизмов, если таковое наблюдается. Для сравнения — использование бактериологических методов не дает такой возможности, т.к. необходимо применение различных сред для выращивания различных болезнетворных микробов;
    • возможность транспортировки биологического материала, т.к. для выявления возбудителя не обязательно сохранять его в живом виде;
    • скоростьвыполнения анализа;
    • точность проводимой этиологической диагностики;
    • возможность количественного определения возбудителей — особенно актуально для условно-патогенных микробов, которые только по достижении определенной концентрации способны вызывать заболевание;
    • способность контролировать течение инфекционного процесса при проведении лечения.

    В настоящее время методом полимерзной цепной реакции определяют большинство половых (и других) инфекционных заболеваний. Диагностика получила широкое распространение за счет своей высокой чувствительности и специфичности.

    Особенно большой популярностью пользуется анализ ПЦР на хламидии.

    Это связано с тем, что данные микроорганизмы обитают внутриклеточно, что создает определенные трудности в их обнаружении.

    ПЦР-диагностика позволяет выявлять даже минимальное количество хламидий, которые, как правило, еще не приводят к появлению клинических симптомов. Даже наличие только 2 молекул нуклеиновых кислот в исследуемом материале позволяет выявить причинную инфекцию.

    А это залог успешного лечения, которое начинается еще на доклиническом этапе.

    Также производится определение инфекций:

    • ВИЧ;
    • вирусные гепатиты;
    • туберкулез;
    • клещевой энцефалит;
    • различные венерические заболевания и т.д.

    ПЦР-диагностика позволяет решать и ряд других важных задач:

    • мониторинг терапии и оценка ее эффективности;
    • определение «нагрузки вирусами», на основании которой производится индивидуальный подбор дозы препарата;
    • выявление штаммов микроорганизмов, отличающихся фармакологической устойчивостью (нечувствительностью к лекарственным препаратам).

    Целенаправленно готовиться к сдаче анализа, который будет проводиться методом ПЦР, не требуется. Однако очень важно, чтобы специалист производил забор материала с соблюдением всех необходимых условий стерильности.

    Так, например, для взятия крови следует применять специальные вакуумные системы, для взятия секрета половых органов следует использовать специальные пробирки и т.д.

    В некоторых случаях в лабораторию материал следует транспортировать. Чтобы это сделать правильно, необходимо герметично закрыть емкость с биологическим материалом. Это позволит предупредить проникновение туда иных микроорганизмов, обитающих во внешней среде.

    Результаты ПЦР-анализа могут быть двух вариантов:

    • положительный – возбудитель обнаружен;
    • отрицательный – возбудитель не выявлен.

    Следует знать — даже при отсутствии клинической симптоматики может быть получен положительный результат.

    В данном случае ориентироваться необходимо на данные полимеразной реакции, т.к. она позволяет выявить заболевание на доклинической стадии.

    Иногда может быть получен сомнительный ответ, когда количество выявленных копий соответствует верхней границе нормы. Чтобы уточнить причину заболевания, следует повторить анализ, уделив особое внимание условиям сбора биологического материала.

    Основные преимущества ПЦР-диагностики можно сформулировать в виде нескольких тезисов:

    • возможность получения огромного числа копий патогенных микроорганизмов;
    • большое количество копий – это залог успешного секвенирования (выявления).

    Это обеспечивает высокую точность ПЦР-анализа для обнаружения внутриклеточных возбудителей и медленно растущих микроорганизмов.

    Поэтому метод особенно информативен для выявления туберкулезных микобактерий и других подобных инфекционных агентов. Он обладает высочайшей точностью и не нуждается в перепроверке полученных результатов (кроме казуистических случаев).

    Для получения наиболее достоверных результатов необходимо выполнение двух основных условий, которые предупреждают экзогенное (внешнее) инфицирование:

    • правильный забор материала;
    • правильная транспортировка.

    источник

    Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – наиболее информативный, точный и современный метод диагностики инфекционных заболеваний, позволяющий обнаружить возбудителя в организме пациента, даже если количество вредоносных клеток исчисляется единицами, и они пока не успели спровоцировать развитие болезни. Еще 25 лет назад врачи не могли даже мечтать о таких возможностях, а сегодня сдать анализ ПЦР можно в любой крупной лаборатории.

    ПЦР-диагностика открыла перед людьми многие другие ценные перспективы – с помощью этой методики можно изучать генные мутации, устанавливать отцовство, вычислять риск развития онкологических заболеваний, оценивать возраст и происхождение археологических артефактов и даже доказывать вину преступников, обнаруживая их ДНК в уликах. Но сегодня мы обсудим именно медицинский аспект этого открытия и расскажем вам, какие заболевания можно диагностировать методом ПЦР, как сдавать анализ и что означают его результаты.

    Любое живое существо на Земле, будь то человек, животное или микроб, имеет гены – носители наследственной информации, которые представляют собой участки ДНК или РНК с определенной последовательностью нуклеотидов, уникальной для каждого организма. ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) и РНК (рибонуклеиновая кислота) образует длинные молекулы, состоящие из двух нитей, закрученных в спираль друг относительно друга, и эти нити собираются из нуклеотидов, как из бусинок.

    Допустим, требуется увидеть, есть ли в биологическом материале пациента ДНК или РНК инфекционного возбудителя или ее фрагменты. Но как это сделать, если молекулы крошечные и их мало? Методика ПЦР дает ответ: можно искусственно размножить вредоносную ДНК или РНК в лабораторных условиях, чтобы без труда ее обнаружить и идентифицировать.

    Суть полимеразной цепной реакции состоит в том, чтобы разъединить нити молекул и попытаться «подсадить» к их противоположным концам фрагменты ДНК или РНК возбудителей – если они подойдут, значит, это и есть искомый микроб. А добавленный в пробирку фермент под названием «ДНК-полимераза» запустит синтез новых копий нужных участков молекул, они многократно размножатся и станут заметны. Далее мы опишем простыми словами, как происходит этот удивительный процесс и для чего это необходимо.

    Американский ученый Кэрри Муллис изобрел ПЦР в 1983 году, а спустя десять лет, в 1993 году, получил за свое открытие Нобелевскую премию по химии. Однако методика была несовершенной и требовала существенных доработок. На сегодняшний день существует уже более десятка видов ПЦР для разных диагностических целей.

    Итак, мы знаем, что длинная молекула ДНК или РНК образована двумя цепочками нуклеотидов, всего их бывает пять типов:

    Ген – это устойчивая, многократно повторяемая уникальная комбинация нуклеотидов, и в одном гене их может быть несколько десятков или даже сотен, но все они располагаются друг напротив друга в строгом соответствии с правилом комплементарности. Это означает, что напротив гуанина в одной нити может стоять только цитозин из другой нити, а напротив аденозина – только тимин, иначе молекула ДНК не сложится и не закрутится в спираль. При этом пары «А – Т», «Т – А», «Г – Ц» и «Ц – Г» могут сочетаться в любых комбинациях: повторяться несколько раз подряд или идти вразнобой.

    Схематически это можно представить так:

    У РНК вместо тимина есть урацил, и такие молекулы выступают носителями генетической информации у некоторых вирусов, называемых ретровирусами. Например, у вируса иммунодефицита человека (ВИЧ).

    Вот это свойство – комплементарность – является ключевым для ПЦР-диагностики. Ведь чтобы началась амплификация (синтез дополнительных копий участков ДНК на родительской матрице), нужно чтобы «подсаженный» фрагмент ей подходил. Такой фрагмент называется праймером или попросту «затравкой» и содержит до тридцати нуклеотидов, расположенных в уникальной для каждого возбудителя последовательности. Праймеры для проведения ПЦР-анализов производятся отдельно и доставляются в лабораторию в готовом виде. На сегодняшний день в распоряжении врачей есть праймеры сотен различных бактерий, вирусов и простейших.

    Читайте также:  Поджелудочная железа биохимический анализ крови

    Чтобы процесс начался, необходимо соблюсти ряд условий: добавить нужные реагенты и создать особый температурный режим. Все это происходит в приборе под названием «амплификатор» или «термоциклер», который может обеспечить нагревание и охлаждение пробирок с точностью до 0,1°C. Современные модификации амплификаторов могут замораживать и хранить готовые материалы, а некоторые даже имеют встроенный флуоресцентный детектор для определения результатов анализа ПЦР в режиме реального времени, когда нужно вычислить вирусную нагрузку (об этом мы расскажем ниже).

    Внутри амплификатора взятый у пациента биоматериал проходит несколько десятков циклов, каждый из которых состоит из трех стадий: денатурации, отжига и элонгации. Это самая интересная часть ПЦР-диагностики, давайте рассмотрим весь процесс в подробностях, а начнем с необходимых реагентов.

    Стандартный набор выглядит так:

    Биоматериал, предположительно содержащий ДНК возбудителя заболевания;

    Праймеры, то есть два комплекта нуклеотидов, комплементарных противоположным концам цепочек нужного фрагмента ДНК;

    ДНК-полимераза – термостабильный фермент, который выступает катализатором реакции амплификации. К этому ферменту очень серьезные требования: он должен сохранять активность при высокой температуре длительное время – несколько часов, пока повторяются циклы ПЦР. Поэтому для проведения анализа используются ферменты, выделенные из термофильных микроорганизмов: Thermus aquaticus (Taq-полимераза), Pyrococcus woesei (Pwo-полимераза), Thermus thermophilus (Tth-полимераза), Pyrococcus furiosus (Pfu-полимераза) и другие;

    Mg2+, то есть ионы магния, двухвалентного металла, необходимого ДНК-полимеразе для эффективной работы;

    dATP, dGTP, dCTP и dTTP, четыре дезоксирибонуклеозидтрифосфата, из которых будут строиться новые фрагменты цепочек ДНК;

    Буферный раствор, позволяющий поддерживать оптимальные условия – в него входят некоторые соли и сывороточный белок альбумин.

    Итак, реагенты помещены в пробирку, она установлена в амплификатор, что же происходит дальше? Запускается повторяющийся цикл из трех стадий, целью которых является амплификация ДНК инфекционных возбудителей, если таковые будут обнаружены в пробе.

    Амплификатор нагревает пробирку до 94-98 °C и сохраняет такую температуру на протяжении 30 секунд – 2 минут, чтобы цепочки ДНК разошлись в стороны. Конкретное значение температуры и времени зависит от типа полимеразы и от того, какого именно микроба ищут. По-другому этот период называется стадией плавления. Большинство видов ПЦР-диагностики требуют прогрева пробирки перед первым циклом в течение 2-5 минут.

    В игру вступают праймеры – один из них комплементарен первой нити развалившейся надвое цепочки ДНК, а другой подходит ко второй нити, причем, праймеры ограничивают начало и конец того участка молекулы, который необходимо достроить. Праймеры называют «затравкой», потому что фермент полимераза катализирует производство новых копий нужного фрагмента ДНК именно после соединения праймеров с родительской матрицей.

    Чтобы это соединения произошло, амплификатор должен понизить температуру пробирки. Как правило, отжиг с праймерами производится при температуре на 5 °C ниже, чем нужно для их денатурации. Если установить слишком высокую температуру, праймеры будут плохо соединяться с матрицей, а если слишком низкую, они могут прикрепиться не в том месте, где нужно. Поэтому лучше показывают себя праймеры с температурой плавления выше 60 °C, ведь они позволяют проводить отжиг и элонгацию одновременно при 60-75 °C. Стадия отжига длится 30 секунд, и за этот короткий период полимераза уже успевает катализировать синтез двух-трех сотен новых нуклеотидов.

    Происходит собственно амплификация, то есть размножение нужного участка вредоносной ДНК, если таковая обнаружена. В рамках одного цикла количество участков увеличивается вдвое, каждый последующий цикл опять приводит к двукратному увеличению их числа, то есть действует принцип геометрической прогрессии. А всего за время ПЦР-анализа проводится 30-50 циклов, что по времени занимает 2-3 часа.

    Температура элонгации и длительность этой стадии зависит от того, какая полимераза используется и какова длина размножаемого участка ДНК. Например, для Taq и Pfu-полимеразы оптимальна температура 72 °C, при этом фермент произведет 1000 пар оснований за 1 минуту. По окончанию всех циклов ПЦР, как правило, запускают дополнительную, финальную стадию элонгации – она длится около 10 минут и позволяет достроить все оставшиеся участки ДНК.

    Существует два способа определения итогов ПЦР-анализа: традиционный – электрофорез, когда в реакции задействуются обычные праймеры, а оценку результатов проводит человек, и более современный – сканирование в режиме реального времени, когда «затравки» меченые, а их свечение регистрирует прибор.

    В первом случае все цепочки ДНК сортируются по размерам. У этого способа есть существенные недостатки: во-первых, лаборанту приходится открывать пробирки с материалом, следовательно, в них могут попасть посторонние фрагменты ДНК из соседних пробирок (контаминация ампликонами), и тогда результат анализа ПЦР будет ложноположительным. Во-вторых, оценку производит человек, что называется, «на глаз», поэтому достоверность полученных данных целиком зависит от внимательности и профессионализма специалиста.

    В случае с ПЦР-диагностикой в режиме реального времени (Real-Time PCR) влияние человеческого фактора на итоги исследования минимально – пробирки помещаются в современный высокотехнологичный прибор и ни разу не открываются на протяжении всех циклов, включая анализ результатов, который тоже проводит умная машина. У этого способа только два очевидных недостатка – высокая стоимость и ограниченная доступность, поскольку амплификаторами нового поколения оснащена далеко не каждая лаборатория.

    ПЦР-диагностика активно используется во многих отраслях клинической медицины:

    Урогинекология и дерматовенерология. Это, пожалуй, самые заинтересованные в ПЦР врачебные направления. С помощью соответствующего анализа можно диагностировать любые заболевания, передающиеся половым путем: гонорею, трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз, хламидиоз, гарднереллез и т. д. Метод ПЦР позволяет обнаружить и вирусы, часто поражающие органы половой сферы человека – например, генитальный герпес или папилломовирус. А эти возбудители, как известно, обладают онкогенной активностью, то есть могут провоцировать развитие злокачественных опухолей (рака шейки матки у женщин, рака предстательной железы у мужчин);

    Инфектология и эпидемиология. На втором (а возможно и на первом) месте по частоте использования ПЦР-диагностики находится инфекционная медицина, поскольку обсуждаемая методика позволяет диагностировать все распространенные заразные болезни, некоторые из которых несут смертельную угрозу здоровью людей и представляют эпидемиологическую опасность. Речь идет о ВИЧ, гепатитах, сифилисе, холере, бруцеллезе, токсоплазмозе, дифтерии, туляремии и прочих серьезных заболеваниях;

    Донорство и трансплантология. ПЦР-диагностика позволяет службе крови оценивать качество донорского материала: выявлять опасных возбудителей и отсортировывать непригодный материал. А при пересадке органов очень важно оценить совместимость тканей донора и реципиента – тут на помощь тоже приходит методика ПЦР;

    Генетика и репродуктология. С помощью специальных разновидностей ПЦР-анализа можно установить отцовство, просчитать риск возникновения опасных генных мутаций у предполагаемого потомства пары, обратившейся в центр планирования семьи, а также изучить взятый у беременной женщины биоматериал (например, амниотическую жидкость) с той же целью – вовремя обнаружить тяжелый порок развития плода;

    Акушерство и неонатология. Современные родильные дома тоже часто используют ПЦР-диагностику, а некоторые даже имеют собственную лабораторию. Это нужно для того, чтобы максимально оперативно обследовать новорожденных малышей при подозрении на наличие у них внутриутробной или полученной во время родов инфекции: ВИЧ, сифилиса, хламидиоза, цитомегаловируса, мононуклеоза, краснухи и других;

    Пульмонология и фтизиатрия. Метод ПЦР дает возможность специалистам этих врачебных направлений бороться с редкими, устойчивыми штаммами бактерий, вызывающих респираторные заболевания, например, атипичный хронический бронхит. В этом случае успех лечения целиком зависит от того, удастся ли точно идентифицировать возбудителя болезни и назначить адресную терапию. Кроме того, ПЦР-анализ позволяет проводить максимально раннюю диагностику туберкулеза;

    Гастроэнтерология и аллергология. Врачи этих двух специальностей тоже крайне заинтересованы в методе ПЦР, поскольку он дает возможность обнаружить главную причину развития гастрита и язвы желудка – коварную бактерию Хеликобактер пилори, а также установить индивидуальную непереносимость продуктов питания у конкретного человека. Существуют врожденные особенности работы пищеварительного тракта, не позволяющие правильно перерабатывать и усваивать некоторые компоненты пищи, например, глютен или лактозу. Эти особенности наследуются генетически, следовательно, могут быть обнаружены методом ПЦР. Кстати, если у кого-то из родителей есть аллергия на определенный продукт (орехи, грибы, цитрусовые), то велика вероятность того, что у ребенка возникнет такая же проблема;

    Онкология. Специалисты этого серьезнейшего направления медицины используют ПЦР-диагностику для оценки риска развития злокачественных опухолей у пациента, поскольку те клетки человеческого тела, которые подвергаются мутации и начинают бесконтрольно делиться, меняют структуру своей ДНК и начинают отличаться от здоровых клеток. Необходимо взять пункцию или биопсию подозрительных тканей и изучить материал методом ПЦР, чтобы установить масштабы угрозы.

    А вот лишь неполный список тех вредоносных микроорганизмов, которые можно обнаружить с помощью ПЦР-анализа:

    Обширное семейство герпес-вирусов, в том числе цитомегаловирус, варицелла-зостер, вирус Эпштейна-Барра и другие;

    источник

    Диагностика инфекционных заболеваний – бактериальных и вирусных – направлена на раннее выявление возбудителей, что позволяет назначать раннюю и максимально эффективную терапию. Самым современным способом диагностики инфекций является ПЦР или полимеразная цепная реакция. Так что же это за метод, и для чего он нужен?

    Любой микроорганизм и вирус содержат в своей структуре молекулы ДНК или РНК. У каждого из них эти соединения уникальны, поэтому, если выделить в анализе крови у детей или взрослых нуклеиновые кислоты, можно с абсолютной точностью поставить диагноз.

    К сожалению, концентрация ДНК в образцах крови или других биологических материалах достаточно низка и с помощью обычных методов диагностики определить ее не получается. Чтобы справиться с этой проблемой, была изобретена полимеразная цепная реакция.

    Сущность ПЦР заключается в специальной обработке образца крови, в результате чего в ней увеличивается концентрация ДНК молекул, определение типа которых в дальнейшем позволяет установить вид возбудителя и поставить диагноз.

    При подготовке к анализу следует придерживаться общих рекомендаций: не пить и не есть непосредственно перед анализом крови. Хотя для сдачи крови на ПЦР можно так строго не придерживаться этих требований, так как точность исследования не зависит от того, на сытый или голодный желудок был взят анализ.

    С помощью ПЦР можно выявить практически любые вирусные и бактериальные заболевания. Для анализа используется не только кровь, но и другие биологические материалы: сперма, слюна, мазки из уретры и с шейки матки. Анализ крови будет информативен в том случае, если возбудитель конкретного заболевания проникает в кровь человека. Поэтому ПЦР крови назначают при следующих заболеваниях:

    • вирусные гепатиты А, В, С, D и TT;
    • цитомегаловирус;
    • герпетическая инфекция (вирусы герпеса 1, 2 и 4-го типов);
    • ВИЧ-инфекция
    • энтеровирусная инфекция;
    • опоясывающий лишай;
    • краснуха;
    • токсоплазмоз;
    • инфекционный мононуклеоз;
    • листериоз.

    Если же взять во внимание возможность проведения ПЦР других биоматериалов, то в список заболеваний, выявляемых с помощью ПЦР, следует добавить:

    Особо актуально в настоящее время ПЦР анализа крови беременной на так называемые TORCH-инфекции: цитомегаловирус, токсоплазмоз, краснуху и герпесвирусную инфекцию. Связано это с тем, что упомянутые заболевания могут привести к аномалиям развития плода.

    1. 100% точность диагностики – если в крови есть даже несколько фрагментов ДНК возбудителя, с помощью ПЦР они буду выявлены, и будет поставлен точный диагноз. Это главное отличие данного метода от других способов диагностики – ИФА, общего анализа крови и прочих.
    2. Специфичность. При проведении ПЦР отсутствует такое понятие, как ложноположительный или ложноотрицательный результат. В отличие от иммуноферментного анализа (ИФА).
    3. Возможность проведения анализа сразу на несколько возбудителей из одного образца биоматериала, что делает метод удобным для пациента – не нужно несколько раз сдавать анализ.
    4. Быстрота. Не нужно выделять и выращивать возбудителя на питательных средах, как это делается при бактериологическом исследовании. Результат может быть готов уже в день сдачи анализа.
    5. С помощью ПЦР выявляют возбудителей латентных заболеваний, когда возбудитель в организме есть, но он еще не вызвал заболевание, или когда пациент является носителем инфекции (гепатита или ВИЧ).
    6. Низкая стоимость. Цена анализа ПЦР на одного возбудителя составляет 250-500 рублей. Чуть дороже стоит полуколичественный анализ на вирусы – около 1000 рублей.

    ПЦР является высокотехнологичным методом исследованием и предъявляет высокие требования к оснащению лаборатории. Помещение, где делают анализ, обязательно должно быть оснащено фильтром биологической очистки, так как в воздухе постоянно присутствуют частицы кожи, слюны, содержащие в своем составе молекулы ДНК. Несоблюдение техники работы с биоматериалами может стать причиной неверного результата.

    Читайте также:  Изменения общем анализе крови при онкологии

    Трактовка результатов этого исследования не представляет сложностей, потому что отсутствует таблица норм анализа крови на ПЦР. В бланке результатов могут фигурировать лишь две фразы:

    • отрицательный результат – возбудитель, на который проводился анализ, не выявлен;
    • положительный результат – в организме имеется возбудитель указанного заболевания.

    Следует знать, что ПЦР может быть положительной даже при отсутствии клинических симптомов заболевания! Расшифровка анализа крови на ПЦР у детей не отличается от таковой у взрослых.

    Любой человек может сдать кровь для исследования. Прямым показанием для исследования является подозрение на инфекции передающиеся половым путем (хламидиоз, гарднереллез, ВИЧ-инфекция). При случайном незащищенный половом контакте только ПЦР поможет поставить диагноз на ранней стадии, если человек заразился каким-либо заболеванием. В обязательном порядке кровь на TORCH-комплекс сдают беременные женщины. А также женщины, только планирующие беременность.

    Хотя ПЦР является максимально эффективным методом диагностики, зацикливаться только на нем не стоит. Обследование пациента при любом заболеваний должно носить комплексный подход. Если цепная полимеразная реакция позволяет выявить возбудителя, то серологическое исследование позволяет оценить эффективность лечения, реакцию организма на возбудителя и лекарства. Назначать все исследования должен врач по показаниям.

    Увидеть, как выполняется анализ крови ПЦР, вы сможете, просмотрев данный видео-обзор:

    Гудков Роман, врач-реаниматолог

    39,110 просмотров всего, 7 просмотров сегодня

    источник

    Результаты ПЦР и особенности их расшифровки интересуют многих людей, чьим диагнозом является подозрение на ЗППП.

    Как отмечают доктора, метод обладает высокой результативностью и минимальным процентом ошибок. Поэтому зачастую используется как контрольный в диагностике инфекционных процессов.

    В чем состоит суть ПЦР методики, хотят знать больные люди, и благодаря чему обеспечивается высокая вероятность получения верных результатов. Как расшифровываются полученные итоги, и есть ли связь между этим методом и другими способами диагностики?

    • Суть метода ПЦР
    • Какие материалы можно использовать для ПЦР
    • Что значит положительный результат ПЦР
    • Что значит отрицательный результат ПЦР
    • Кто из докторов выполняет расшифровку результатов ПЦР
    • Когда показатели ПЦР становятся положительными после заражения
    • Вид бланка анализов на ПЦР
    • Вероятность ошибочных итогов при ПЦР
    • Связь ПЦР с другими методиками

    ПЦР-методика – исследование, используемое довольно широко в современном мире. Диагностика позволяет поставить диагноз не только при инфекционных процессах, но и при генетических патологиях, некоторых онкологических недугах. Изначально ПЦР изобреталась не для применения в медицине.

    В отрасль здравоохранения метод пришел из области молекулярной биологии, в которой активно использовался после своего открытия. Ученый, создавший ПЦР, получил нобелевскую премию.

    Прежде чем разбираться, как расшифровывать результаты анализов ПЦР, необходимо понять, в чем основная суть методики.

    На самом деле на словах все выглядит довольно просто. У пациента берется биологический материал. Затем он обрабатывается особым образом с помощью специальных химических реагентов.

    Затем получившуюся смесь помещают в особую машину, которая проводит процесс амплификации. То есть многократного умножения определенных фрагментов ДНК или РНК, что удалось выявить с помощью добавления реагентов.

    Когда процесс амплификации подойдет к концу, доктору остается только идентифицировать полученные результаты, чтобы поставить верный диагноз.

    Главное – проявить внимательность на этапе идентификации. Но учитывая, что сегодня большую часть работы делает компьютер, все сильно упрощается.

    ПЦР отличается высокой эффективностью. Ее широко применяют для того, чтобы определять наличие в организме скрытых инфекционных процессов, которые не дают положительных серологических реакций. Также скрытые инфекции обычно нельзя выявить с помощью посева или микроскопии. Поэтому зачастую ПЦР – единственный достоверный способ постановки диагноза в этом случае.

    Часто удачность исследования зависит от того, как и какой материал брался для выполнения анализа. Однако в случае с полимеразной цепной реакцией расшифровка результатов ПЦР исследований мало зависит от биологического материала, который брался у пациента. Гораздо большее значение имеет подготовка к обследованию с помощью метода.

    В качестве материала могут служить:

    • кровь, сдаваемая в соответствии со стандартными рекомендациями из вены на локтевом сгибе
    • мокрота, собираемая при откашливании
    • налет с ротовой полости, собираемый доктором в утреннее время, пока пациент еще не завтракал и не чистил зубы
    • мазок с половых органов, дающий хорошие результаты в том случае, если больной не мочился в течение нескольких часов, отказывался от сексуальных контактов несколько дней и соблюдал ряд других рекомендаций
    • исследование мочи, при котором биоматериал также предпочтительно собирать с утра, не проводя накануне гигиену половых органов
    • биоптаты органов или тканей, получаемые с помощью специальных инструментов и др.

    Как отмечают врачи, материалом для ПЦР может быть совершенно любая жидкая среда организма человека.

    При выборе главное помнить о том, что предпочтение отдают той среде, где с большей долей вероятности будет присутствовать возбудитель. Например, при половых инфекциях целесообразнее брать мазок с половых органов или кровь, чем мазок из ротовой полости.

    Решать вопрос о том, какие материалы используются для получения результатов ПЦР в том или ином случае, лучше всего с лечащим врачом на приеме. Доктор сделает оптимальный выбор, исходя из предполагаемого у пациента заболевания.

    ПЦР – метод, который может похвастаться своей высокой специфичностью.

    Предположим, доктор поставил себе цель обнаружить какой-то патогенный микроорганизм в теле пациента. И если тот на самом деле присутствует в теле, он будет обнаружен. При этом спутать его с каким-либо другим патогеном благодаря уникальному коду ДНК будет невозможно.

    Если ПЦР положительный, значит, в организме с вероятностью почти в 100% находится возбудитель, поиск которого проводился врачом. Ведь методика рассчитана, в отличие от многих других диагностических методов, именно на поиск самих возбудителей, а не их следов.

    Как отмечают доктора, при данном исследовании вероятность случайно принять один возбудитель за другой сводится к нулю. Зато существует вероятность получения положительных результатов после терапии.

    Если в организме будут оставаться обломки нуклеиновых кислот. Однозначно положительной реакция чаще всего бывает, если пациент предъявляет жалобы на какие-то конкретные симптомы инфекционного процесса. Причем результат будет сохраняться даже в течение нескольких месяцев после того, как возбудитель будет полностью побежден и удален из организма.

    Если ПЦР результат отрицательный, значительное число пациентов автоматически считают, что они здоровы. Это практически правильное решение.

    Ведь если итоги оказались отрицательными, значит фрагменты патогенного микроорганизма не были определены тест-системой. Из этого следует логичный вывод, что микроорганизма в теле нет.

    Однако стоит учитывать, что несмотря на всю свою высокую чувствительность и специфичность, методика имеет определенный порог чувствительности. Если концентрация возбудителя на момент обследования не переходит границу этого порога, результат будет расцениваться, как отрицательные. Хотя на самом деле окажется ложным до поры до времени.

    Доктора акцентируют особое внимание на том, что отрицательный результат не всегда означает отсутствие патологии. Чтобы на 100% быть уверенным в своем здоровье, пройти исследование повторно рекомендуется через несколько недель, а порой и месяцев.

    Часто среди пациентов звучит вопрос о том, какой врач будет проводить расшифровку ПЦР исследования.

    В первую очередь необходимо запомнить, что доверять результаты стоит тому же медицинскому работнику, что первоначально давал направление на исследование. Связана эта рекомендация с тем, что в этом случае доктор будет представлять себе, что он ожидает увидеть в анализах. Сможет грамотно интерпретировать итоги, соотнося их с клинической картиной.

    Получить направление наиболее часто можно от уролога, гинеколога или венеролога. Соответственно, после получения итогов относить бланк с результатами стоит кому-то из них. Важно помнить, что ПЦР – довольно дорогой метод диагностики. Его не принято использовать просто так, без специальных показаний к обследованию.

    • появление специфических для ЗППП симптомов
    • обследование перед планированием беременности или процедурой искусственного оплодотворения
    • поиск причин бесплодия и другие показания

    Часто пациенты задают на приеме у медицинского работника вопрос о том, когда результаты ПЦР крови и мазков становятся положительными после заражения. Все зависит от того, насколько быстро конкретная инфекция сможет, размножаясь, пройти пороговую для теста концентрацию в материале.

    Преимуществом ПЦР является то, что порог чувствительности у теста довольно низкий. Это значит, что выявить признаки заражения можно даже в том случае, если количество возбудителя в биологическом материале будет минимальным.

    Подобная особенность дает возможность постановки диагноза даже в период инкубации, когда симптомы еще полностью отсутствуют.

    Однако осечка возможна и при применении ПЦР методики. Это происходит, например, если пороговая концентрация все же не успела достичь определяемых тестом значений. В этом случае велика вероятность получения далеких от правды результатов.

    Вопрос о том, как выглядит бланк результатов анализов ПЦР, весьма актуален.

    Как отмечают доктора, ничего сложного во внешнем виде бумаги нет. Зачастую на документе можно обнаружить название искомого возбудителя. А напротив него пометку «обнаружен» или «не обнаружен».

    В первом случае пациенту рекомендуется озаботиться собственным здоровьем. Так как анализ расценивается как положительный, а человек, как зараженный. Следовательно, ему требуется терапия.

    Во втором случае чаще всего состояние пациента оценивают, как здоровое, хотя могут быть и исключения. Важно помнить, что количество возбудителей, указанных на бланке, зависит во многом от того, какое конкретно вид анализа применялся.

    Если проводился поиск только одного патогенного микроорганизма, в результате будет фигурировать только его название с соответствующей пометкой. Если ПЦР проводилось сразу на несколько инфекций, что тоже возможно, в бланке будет список патологий с пометками.

    Сегодня в лабораториях при комплексном анализе на группу инфекций не принято выдавать на каждый патогенный микроорганизм отдельный бланк. Их все указывают на одном листе.

    Часто пациенты интересуются вопросом о том, возможно ли получение ложных результатов обследования при использовании методики. К сожалению, как отмечают врачи, ошибки хоть и редко, но случаются.

    Существует, например, вероятность получить ложноположительные результаты ПЦР сразу после лечения. Объясняется это очень просто.

    Терапия уже окончена, возбудитель удален из организма и не может заражать новые ткани. Однако остатки ДНК или РНК еще могут циркулировать в крови или ином диагностическом материале. В этом случае тест-система будет улавливать их и воспринимать за полноценную патологию, выдавая ложноположительный итог.

    Именно поэтому рекомендуется после терапии сдавать исследование несколько раз с разными промежутками времени. Только в этом случае итоги будут достаточно объективными.

    Ложноотрицательные результаты анализов ПЦР после приема антибиотиков также возможны. Происходит это в том случае, если пациент, неверно используя препараты антибактериального ряда, смазал симптомы болезни.

    Не позволил микроорганизму активно размножаться в теле, но при этом и не довел его уничтожение до конца. В этом случае количество возбудителей может упасть ниже пороговой концентрации чувствительности. Это и даст неверные результаты тестирования.

    С помощью метода ПЦР доктора нередко подтверждают или, напротив, опровергают результаты других методов обследования, используемых для диагностики ИППП.

    Например, с этой целью может использоваться ИФА.

    Бывает так, что ПЦР отрицательный, а ИФА положительный. Тогда больной оказывается в замешательстве относительно своего состояния.

    Доктора рекомендуют не теряться, а сначала провести оба теста повторно. Если ИФА останется положительным, а ПЦР отрицательным, с большой вероятностью заболевание в организме пациента отсутствует.

    Ведь иммуноферментный анализ направлен на реакцию антиген-антитело. И порой может принимать сходные по структуре антигены других возбудителей за искомый, выдавая ложноположительные результаты.

    Вероятность того, что ИФА дало верный результате на второй раз, а ПЦР, напротив, выдало ошибку, например, из-за низкого титра возбудителя, сведена к минимуму. Это скорее казуистика, чем реальная клиническая практика.

    Результаты ПЦР диагностики обладают высокой ценностью в диагностике большого количества различных патологий. В первую очередь методика является незаменимой при подозрении на различные ЗППП.

    Если вам нужно сдать получить комментарии по результатам ПЦР, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

    • ВИЧ
    • Гарднереллез
    • Кондиломатоз
    • Молочница
    • Сифилис
    • Трихомониаз
    • Баланопостит
    • Герпес
    • Гонорея
    • Микоплазмоз
    • Уреаплазмоз
    • Уретрит
    • Хламидиоз
    • ЗППП

    источник

    • Рядом с метро Кропоткинская
    • Работаем каждый день с 9:00 до 20:00
    • Стоимость консультации 900 рублей
    Читайте также:  Нет крови при взятии анализа

    ПЦР – часто применяемый в венерологии и инфектологии метод выявления различных патологий.

    Биоматериалом для исследований может служить любая биологическая жидкость. Многие инфекции могут быть выявлены в крови, если их ДНК попадает в системный кровоток. С помощью анализа крови на РНК или ДНК микроорганизмов можно выявить множество различных инфекций.

    Таким способом диагностируют в основном:

    • вирусные инфекции
    • бактериальные инфекции в случае их генерализации

    Реже ПЦР делают на грибки или паразиты. В большинстве случаев в крови определяются вирусы. Потому что другие группы микроорганизмов чаще создают локальные очаги воспаления. Но иногда происходит генерализация процесса.

    Бактерии могут проникать в кровь, разноситься по организму. В этом случае проводится анализ крови методом ПЦР с целью их выявления.

    Диагностика крови методом ПЦР бывает количественной и качественной. Иногда также проводятся полуколичественные тесты. При стандартном исследовании подтверждается или опровергается сам факт присутствия патогена в организме. Количественный метод используют для оценки уровня вирусной или бактериальной нагрузки. Полуколичественный способ используют для инфекций, которые иногда опасны, но в большинстве случаев не вызывают воспаления. Например, есть определенная концентрация, за границей которой есть риск патологии.

    Тогда результатов может быть три:

    • ДНК не обнаружено
    • ДНК выявлено, но концентрация в пределах допустимой
    • ДНК обнаружено в высокой концентрации, достаточной для развития воспаления

    При этом сами цифры, сколько именно копий ДНК содержит кровь в 1 мл, не указывают. Молекулярная диагностика методом ПЦР и дает возможность определить инфекции даже при небольшой концентрации возбудителей. Потому что данный диагностический тест обладает высокой чувствительностью.

    У него также высокая специфичность. Ложноположительные результаты встречаются редко.

    В основном ДНК вируса выявляют в биоматериале, полученном из поверхности высыпаний. Но анализ крови тоже делают. В ней могут быть обнаружены специфические участки ДНК.

    Есть исследования с типированием или без него.

    Часто анализ проводят сразу на 1 и 2 тип герпеса. При этом выявляется характерный для обоих типов фрагмент ДНК. То есть, он присутствует и у одного вируса, и у другого. Поэтому при положительном результате нельзя понять, каким типом заражен человек.

    Часто это не имеет значения для определения терапевтической тактики. Потому что разные типы герпеса подавляются одними и теми же препаратами. Но есть значение для оценки прогноза заболевания.

    Герпес 2 типа чаще рецидивирует. Соответственно, таким пациентам чаще назначается супрессивная терапия, направленная на снижение частоты обострений инфекции. Если возникает необходимость определения типа вируса герпеса, проводится ПЦР с типированием. В этом случае мишенью для выявления служат участки ДНК, характерные для одного либо другого вируса.

    В результатах выдается не только «выявлено» или «не выявлено». Указывается и тип вируса простого герпеса.

    Варицелла зостер – это возбудитель ветрянки и опоясывающего лишая.

    Данный вирус входит в семейство герпеса. При анализе крови с помощью ПЦР можно обнаружить его ДНК.

    Проводится диагностика:

    • перед беременностью
    • при появлении симптомов опоясывающего лишая или ветрянки
    • для дифференциальной диагностики этих заболеваний с энтеровирусными инфекциями или простым герпесом

    Хотя герпес зостер может долгое время пребывать в организме в случае перенесенной ветрянки, инфекция протекает в латентной форме.

    Вирус «прячется» в нервных ганглиях.

    Потому его ДНК в крови не определяется.

    ПЦР даст позитивный результат, только если есть симптомы инфекции. Поэтому, если симптомы появились, а ДНК варицеллы зостер в крови нет, это означает, что болезнь вызвана другим возбудителем.

    Кровь на туберкулез сдают из локтевой вены. Это требуется для обнаружения ДНК микобактерий в системном кровотоке. Исследование делают для того, чтобы дифференцировать ограниченные и генерализованные формы туберкулеза.

    Показания, при которых врачи могут назначить этот анализ:

    • лихорадка с постоянными повышениями и понижениями температуры тела на фоне положительной туберкулиновой пробы
    • острое воспаление респираторных органов при наличии в анамнезе контакта с больным туберкулезом
    • дифференциальная диагностика ложноположительных результатов туберкулиновой пробы
    • рентгенологические признаки туберкулеза

    Кроме того, женщины сдают менструальную кровь для выявления туберкулезного поражения репродуктивных органов.

    • воспалительный процесс эндометрия
    • гистерографические признаки туберкулеза
    • бесплодие при исключении другой патологии

    Результат выдается «обнаружено» или «не обнаружено». Выявление микобактерий – показание к назначению лечения.

    Стафилококки являются условно-патогенными микроорганизмами. Это часть нормальной микрофлоры человека.

    Бактерии живут на коже, в носу и мочеполовых органах.

    Но иногда стафилококки способны вызывать тяжелые патологии.

    При подозрении на генерализацию инфекции назначают ПЦР крови на стафилококк. Небольшое количество этих бактерий может присутствовать в крови в норме. Поэтому положительный результат выдается при их присутствии более чем 10 в 4 степени копий ДНК в мл крови. Это говорит о высокой вероятности заболеваний, таких как сепсис, менингит, пневмония стафилококковой этиологии.

    С током крови бактерии могут попадать в различные органы. Установление этиологического фактора воспалительных процессов помогает подобрать более эффективное лечение.

    На глисты ПЦР крови не делают.

    Для диагностики используют ИФА – определяют уровень иммуноглобулинов в крови. А также исследуют материал, который взят непосредственно из очага поражения.

    Паразитами также считаются одноклеточные простейшие микроорганизмы. Это трихомонада и токсоплазма.

    На трихомонаду ПЦР делают. Но исследуют на кровь, а мазок из урогенитального тракта, мочу или эякулят.

    А вот на токсоплазму делают и анализ крови методом ПЦР. Этот патоген опасен для беременных. Поэтому часто анализы проводят как скрининг при подготовке к зачатию.

    Основные показания к проведению ПЦР на токсоплазмы:

    • ВИЧ
    • планирование беременности
    • лимфаденопатия неустановленной этиологии
    • увеличение печени и селезенки
    • миозиты, энцефалиты, лихорадка непонятного происхождения

    Специфичность теста ПЦР очень высокая – она достигает 98%. Паразиты выявляются в крови даже в малых количествах.

    Часто выполняется анализ крови методом ПЦР на гепатиты, которые передаются половым и парентеральным путем.

    Хотя основными методами диагностики остаются серологические исследования крови. Диагноз обычно подтверждается путем определения антигенов и антител.

    Тем не менее, ПЦР дает возможность:

    • выявить скрытую инфекцию
    • определить мутантные штаммы вируса гепатита B, при которых не обнаруживаются другие маркёры этого заболевания

    ПЦР крови позволяет обнаружить ДНК вируса даже в инкубационный период.

    В период ранней и поздней реконвалесценции генетический материал возбудителя исчезает из крови. Поэтому метод может применяться для подтверждения излеченности. Анализы проводят не только качественные, но и количественные.

    Они позволяют оценивать:

    • вирусную нагрузку
    • риск перехода болезни в хроническую форму
    • риск тяжелого течения патологии
    • течение инфекции
    • динамику излечения (по уменьшению вирусной нагрузки)

    С помощью количественного теста можно установить, какой вирус является главным виновником поражения печени. Ведь у одного пациента их может быть сразу несколько.

    Часто ПЦР используют для обследования контактных лиц. Потому что это самый ранний маркёр вирусного гепатита В. Метод также позволяет обнаружить репликацию вирусов при хроническом течении заболевания ещё до появления клинических симптомов.

    Введение в клиническую практику ПЦР позволило:

    • эффективно выявлять больных с низкой виремией
    • устанавливать взаимосвязь между вирусной нагрузкой и неблагоприятными исходами патологии

    Стабильно высокая вирусная нагрузка – основание для противовирусной терапии.

    Исследование применяют для:

    • раннего обнаружения вируса гепатита С (РНК патогена выявляется в крови уже спустя 10-14 дней после инфицирования, в то время как антител ещё нет)
    • тестирования донорской крови
    • подтверждения излеченности (при выздоровлении РНК вируса больше не определяется в крови, в то время как антитела продолжают обнаруживаться ещё некоторое время)

    ПЦР – более достоверный тест, чем анализ на антитела, который дает до 20% ложноположительных результатов. Метод дает возможность идентифицировать разные типы вируса.

    В свою очередь это позволяет оценить прогноз заболевания и подобрать терапевтическую тактику. Кроме того, может использоваться анализ крови ПЦР количественный. Его назначают для оценки уровня вирусной нагрузки.

    Исходная вирусная нагрузка оценивается для определения показаний к началу терапии. Она влияет на выбор схемы лечения.

    В последующем анализ делают для оценки результативности терапии. Расшифровка анализа крови ПЦР на гепатит С дает возможность установить оптимальные дозы препаратов и сроки лечения.

    Основным исследованием для первичной диагностики ВИЧ-инфекции остается анализ крови на антитела.

    ПЦР применяется в ограниченном количестве случаев. Это исследование необходимо для подтверждения диагноза при слабоположительном результате крови на антитела.

    ПЦР также проводится для первичной диагностики ВИЧ у новорожденных. Потому что наличие у них антител ни о чем не говорит.

    Ведь долгое время после рождения в крови детей циркулируют материнские антитела. Таким образом, серологические тесты не позволяют врачу узнать, вырабатывает организм малыша собственные иммуноглобулины или нет. В то же время ПЦР позволяет определить вирусную РНК.

    Поэтому позитивный результат теста свидетельствует о том, что ребенок болен ВИЧ.

    ПЦР сдают при наличии подозрения на острую инфекцию. То есть, когда человек только недавно заразился, и у него проявился гриппоподобный синдром. В этом случае серологические анализы крови могут ещё не дать положительные результаты. Ведь с момента заражения прошло слишком мало времени.

    ПЦР дает положительные результаты гораздо раньше других тестов, даже в ранние периоды инфекции. Поэтому именно этот метод используется в острой фазе заболевания.

    ПЦР применяется для оценки качества донорской крови. Тем не менее, для первичной диагностики ПЦР применяется не вместо серологических тестов, а в дополнение к ним.

    Причин тому несколько:

    1. ПЦР не выявляет ВИЧ 2 типа, который составляет около 0,5% случаев

    2. Возможны мутации ВИЧ, и в этом случае искомый фрагмент РНК может быть не найден Проблему решает проведение ПЦР с двойной мишенью. В этом случае определяется не один, 2 фрагмента генетического кода.

    3. Организм некоторых пациентов сдерживает развитие ВИЧ. Вирусная нагрузка у них ниже определяемой. То есть, ПЦР дает отрицательный результат. При этом антитела в крови присутствуют. Таких пациентов около 1% от общего числа инфицированных.

    Количественное исследование применяется не для выявления, а для мониторинга инфекции. Это исследование определяет показания к лечению и оценивает его результаты.

    Виремия обозначается в количестве копий в мкл. Нагрузка ниже 10 тысяч копий считается низкой.

    Если она превышает 100 тысяч копий, то её называют высокой. Эти границы весьма условны. Потому что даже у одного пациента в разных образцах крови возможны колебания значений вирусной нагрузки. Показателем успешности лечения ВИЧ и её целью является неопределяемая вирусная нагрузка.

    У каждого теста ПЦР есть граница чувствительности. Это количество копий генетического материала вируса, при котором они передают определяться в крови. Обычно это 50 копий в мкл.

    Если уровень вирусной нагрузки ниже, она считается неопределяемой. Это благоприятный прогностический знак.

    Он говорит о том, что:

    1. Антиретровирусная терапия работает. К препаратам ещё не выработалась резистентность. Поэтому в замене препаратов и коррекции схемы лечения нет необходимости.

    2. Уровень СД4 лимфоцитов не будет уменьшаться. То есть, иммунитет человека не страдает. Поэтому в ближайшее время ожидать оппортунистических инфекций нет оснований.

    У некоторых пациентов наблюдаются всплески вирусной нагрузки. Это значит, что иногда анализ крови на ВИЧ методом ПЦР показывает положительный результат.

    Но при этом вирусная нагрузка минимальная. Она обычно не превышает 200 копий в мкл. Это не говорит о том, что терапия стала неэффективной. Со временем вирусная нагрузка снова может снизиться до неопределяемого уровня.

    Благодаря определению вирусной нагрузки анализ крови методом ПЦР позволяет:

    • определить стадию инфекционного процесса
    • дать прогноз развитию заболевания
    • оценить заразность человека
    • определить показания к назначению антиретровирусной терапии
    • оценить её эффективность
    • определить момент, когда стоит ввести другие препараты для терапии

    Если вам нужно исследовать кровь методом ПЦР, обращайтесь в нашу клинику.

    Мы предлагаем:

    • аккуратный забор биоматериала
    • соблюдение всех правил, позволяющих избежать загрязнения крови в пробирке (это может привести к ложноположительным результатам)
    • дополнительные методы диагностики инфекций
    • расшифровку анализов
    • при положительном результате – лечение инфекционных заболеваний

    В нашей клинике работают опытные врачи.

    Анализы ПЦР крови на гепатиты С и В, ВИЧ и другие патологии можно сдать по доступным ценам.

    Если вам необходимо сдать анализы крови методом ПЦР, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

    источник