Реактивы для проведения анализов крови

Тема 3.12 ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СРЕДСТВА И РЕАКТИВЫ ДЛЯ МЕДИЦИНСКИХ, БИОХИМИЧЕСКИХ И КЛИНИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЙ

Состояние и перспективы развития аналитической и клиникодиагностической лабораторных служб.

1. Химические реактивы: характеристика, ассортимент.
2. Биохимические реактивы, характеристика.
3. Диагностические средства.
   1. Иммунобиологические диагностические средства.
   2. Контрастные диагностические средства.
4. Ветеринарные препараты.

1. Состояние и перспективы развития аналитической и клиникодиагностической лабораторных служб

Контроль качества ЛС является основной составной частью процесса обеспечения населения и ЛПУ высококачественными товарами. Этому вопросу придается самое серьезное значение во всем мире, т. к. речь идет о жизни и здоровье миллионов людей.
Под качеством ЛС понимается соответствие их по физикохимическим, химическим, биологическим и визуальным характеристикам стандарту, разработанному и утвержденному на момент регистрации препарата.
В настоящее время утвержден и действует приказ М3 РФ №21^ от 16.07.97 «О контроле качества ЛС, приготовляемых в аптеках», регламентирующий контроль качества ЛС.

Этот документ направлен на то, чтобы уровень требований к качеству JIC соответствовал принятой ВОЗ «Системе удостоверения качества фармацевтических препаратов в международной торговле» и отвечал международным правилам GMP.
В состав контрольно-разрешительной системы входят: Государственный фармакологический комитет, Государственный фармакопейный комитет, Комитет по новой медицинской технике и изделиям медицинского назначения, ГосНИИ по стандартизации и контролю JIC и ряд других НИИ, осуществляющих контрольноиспытательную работу, а также около 100 территориальных КАЛ или центров по контролю качества лекарств.
Для контроля качества ЛС необходимы реактивы, индикаторы, титрованные растворы, специальное оборудование и лабораторная посуда, чем оснащается аналитическая служба в фармацевтических организациях.
Клиникодиагностическая лабораторная служба функционирует при лечебных учреждениях или же иногда самостоятельно в виде клиникодиагностических центров.
Сравнительно недавно — в начале XX века — врач в своей деятельности при установлении диагноза и лечении больных руководствовался только показаниями своих органов чувств и такими инструментами, как стетоскоп, термометр, неврологический молоточек, ртутный манометр. В дореволюционной России лабораторной службы как таковой не было. Постепенно с появлением отечественных микроскопов, устройств для приготовления гистологических препаратов, термостатов, сушильных шкафов, лабораторной и мермой посуды стали усложняться лабораторные анализы, позволяющие детально анализировать кровь, мочу и другие биологические жидкости.
Научный прогресс позволил в настоящее время регистрировать и анализировать разные процессы в организме человека на любой стадии заболевания. Созданы приборы, аппараты, разработаны методы анализов, с помощью которых диагностика стала дифференцированной и сложной. Кроме того, биохимические анализы способствуют оптимальному подбору лекарственной терапии и своевременной ее коррекции.
Создание совершенной автоматизированной лабораторной техники позволяет не только диагностировать заболевание, но и моделировать физиологические и патологические явления, т.е. прогнозировать исход заболевания. На современном этапе в клиникодиагностической службе применяются электронно-оптические микроскопы, спектрофотометрия, ультразвук, радиоизотопы, лазерные установки.

1. Химические реактивы: характеристика, ассортимент

К числу веществ, предназначенных для аналитической службы, относят химические реактивы, титрованные растворы, индикаторы, индикаторную бумагу, растворители.
Реактивы химические — это химические препараты высокой или относительно высокой чистоты, предназначенные для анализа, научно-исследовательских или иных лабораторных работ.
При помощи химических реактивов можно установить какие химические процессы проходят при хранении веществ, что дает возможность решать вопросы стабилизации, разрабатывать науч- но-обоснованные условия хранения.
Термин «реактив» и «реагент» обычно считаются синонимами.
В зависимости от степени чистоты выделяют следующие категории реактивов:

1. Особой чистоты (сверхвысокой очистки), предназначаются, как правило, для применения в ядерной технологии, радиоэлектронике и т.п.
2. Химические чистые «Х.Ч.».
3. Чистые для анализа «Ч.Д.А.».
4. Чистые «Ч».
5. Очищенные «Очищ.»
6. Технические продукты, расфасованные в мелкую тару «Техн».

Чистота реактивов различных категорий регламентируется
ГОСТами и техническими условиями, номера которых указыва- « ются в маркировке.
Классификация химических реактивов представлена на рис. 91.

Рис. 91. Классификация химических реактивов.

1. Соли неорганических соединений (алюминия, аммония, бария, висмута, железа, калия, кальция, натрия и др.).
2. Окислители:

• аммония персульфат,
• бромная вода,
• раствор калия бихромата,
• раствор калия йодата,
• раствор калия перманганата,
• раствор перекиси водорода,
• хлорная вода.

1. Органические соединения (агар, ацетон, бензин, глицерин, камфора, крезол и др.).
2. Кислоты и щелочи (азотная, борная, лимонная, салициловая, серная и др.).
3. Радиоактивные реактивы, содержащие изотопы: Н2, С14, N15, О17, О18 и др.

Упаковка реактивов должна обеспечивать удобное пользование препаратом и предохранять его от загрязнения и порчи (склянки-капельницы, гранулы, таблетки, ампулы и др.). При хранении радиоактивных реактивов необходимо соблюдать специальные правила.
Многие реактивы являются ядовитыми, огнеопасными, поэтому при работе с ними необходимо также соблюдать специальные предосторожности.
Титрованные растворы — это растворы точно известной концентрации, предназначенные для целей объемного анализа.
Концентрация титрованного раствора выражается молярнос- тью, титром или титром по определенному веществу. Для изготовления титрованных растворов применяются вещества «Х.Ч.».
Основной ассортимент титрованных растворов для аптеки включает: растворы аммония роданида, йода, калия бромата, калия перманганата, едкого натра, серебра нитрата, натрия нитрата, тиосульфата, трилона Б, кислоты хлористоводородной и др.
Хранят титрованные растворы при комнатной температуре, при необходимости защищая от воздействия углекислоты, влаги воздуха и от прямых солнечных лучей.
Индикаторы — это химические вещества, которые при тит- риметрических методах анализа позволяют обнаруживать, что к титруемому веществу прибавлено эквивалентное количество тит- ранта.
Обнаружение изменений определяется визуально или инструментальным методом.
Классификация индикаторов:

• кислотно-основные для водных и неводных сред,
• металлохромные (применяются в комплексонометрии),
• адсорбционные (осадкообразующие),

• окислительно-восстановительные.

Основной ассортимент индикаторов для аптеки: бромфеноло- вый синий, железоаммониевые квасцы, калия хромат, метиленовые: красный, оранжевый, синий; фенолфталеин и др.
Хранятся индикаторы в защищенном от света месте, в банках или флаконах оранжевого стекла.
Индикаторная бумага предназначается для определения pH водных растворов и суспензий. Ее ассортимент включает: РИФАН, ФАН, красную и синюю лакмусовые, куркумовую, конго, фенолфталеиновую, йодокрахмальную.
Растворители предназначаются для растворения веществ при проведении химического анализа. Ассортимент: ацетон, хлороформ, глицерин, спирт, эфир.

1. Биохимические реактивы, характеристика

Биохимические реактивы предназначены для определения изменений химического состава и обмена веществ в организме человека в динамике течения патологического состояния, диаг- ностики и их лечения.
С помощью биохимических реактивов определяются в биологических жидкостях (кровь, моча, слюна, желудочный сок, спинномозговая жидкость, желчь, сперма и др.) различные вещества, для показателей которых установлены нормы или границы. В зависимости от величины отклонений от них можно диагностировать большинство заболеваний.
С этой целью используются различные биохимические реактивы, позволяющие определять: белок, эритроциты, гемоглобин, лейкоциты, глюкозу, кетоновые тела, нитриты, билирубин и др. показатели.
В биохимическом анализе широко применяется электрофорез, различные виды хроматографии, многочисленные физические, главным образом, оптические методы: фотометрия, флюорометрия, спек- трофотометрия, масс-спектрометрия, ЯМР, также полярография, радиоиммунный и иммуноферментный анализ и др.
Важным направлением клинической диагностики является переход к экспресс-диагностике, что значительно ускоряет процесс лечения.
С большим успехом в качестве биохимических реактивов для этого используются тест-полоски, которые в отличие от других методов исследования не требуют использования дополнительно специальной аппаратуры.
В последнее десятилетие широко распространяются иммунологические методы исследования. Это диагностические методы, осно

ванные на специфическом воздействии антигенов и антител. Они применяются для лабораторной диагностики инфекционных и паразитарных болезней, определения групп крови, тканевых и опухолевых антигенов, видовой принадлежности белка, распознавания аллергии и аутоиммунных болезней, беременности, гормональных нарушений и т. д. Иммуноферментный анализ (ИФА) основан на использовании антител, конъюгированных с ферментами. Наиболее популярной разновидностью ИФА является иммуносорбция, суть которой заключается в следующем: на специальном планшете в лунки помещается антиген, затем добавляются сыворотка крови, меченая ферментом антисыворотка (ферментзависи- мые метки) и субстрат. Результаты определяются по изменению цвета жидкой среды. ИФА отличается экологической чистотой, высокой специфичностью, точностью и воспроизводимостью.

1. Диагностические средства

Современный ассортимент диагностических средств весьма обширен, т.к. постоянно разрабатываются новые методы диагностики или модифицируются уже известные, проверенные временем методы. Классификация диагностических средств представлена на рис. 92.

Рис. 92. Классификация диагностических средств.

1. Иммунобиологические диагностические средства

Диагностика иммунобиологическая — это иммунологические методы для диагностики различных патологических состояний, определения иммунологической реактивности организма, совместимости тканей донора и реципиентов и т. д.

— —г ¦¦ =
Для диагностики применяют различные серологические реакции, кожные пробы, биохимические тесты и т. д.
Аллергены — это вещества, вызывающие аллергические реакции у человека или животных. В медицине применяются для диагностики гиперсенсибилизации организма на те или иные вещества-аллергены. Препараты-аллергены выпускаются в виде растворов для инъекций или подкожных инъекций в ампулах или флаконах. В ассортименте аллергенов около 120 наименований

• это вытяжки из растений (пыльца), насекомых, грибов, молока, домашней пыли, куриных яиц, мяса, рыбы, шерсти животных, кишечной палочки и ряда бактерий (стрептококка, стафилококка и др.) и т.п.

Антитела — это белки глобулиновой природы, образующиеся в организме в ответ на введение веществ, несущих на себе признаки генетически чужеродной информации. Выпускаются в виде лио- филизированного порошка в ампулах или флаконах. Ассортимент содержит 13 наименований, среди которых антитела диагностические и моноклональные.
Диагностикумы представляют собой сухие лиофилизированные порошки или жидкие суспензии в ампулах и флаконах, есть и наборы диагностические многокомпонентные. Ассортимент включает свыше 130 наименований. Диагностикумы позволяют определить ботулизм, геморрагическую лихорадку, энцефалит, бруцеллез, оспу, холеру, чуму и другие заболевания.
Иммуноглобулины —¦ это группа белков, глобулинов сыворотки крови, обладающая свойствами антител. У человека выделено 5 классов иммуноглобулинов IgA, IgG, IgM, IgD, IgE.
Иммуноглобулины представляют собой порошки лиофилизированные для инъекций или инфузий, растворы для инъекций. Ассортимент иммуноглобулинов составляет свыше 100 наименований, среди которых иммуноглобулины: человеческий, нормальный, аденовирусный, антилимфоцитарный, антирабический, антирезус, антистафилококковый, против гепатита В человека, клещевого энцефалита, лихорадки Эбола и др. Хранятся при температуре 2-10° С в защищенном от света месте, срок годности 1-2 года.
Микротесты (микрометоды) — это микротест-системы для биохимической идентификации и определения чувствительности различных бактерий и вирусов. Ассортимент около 20 наименований. Выпускаются отдельные тест-системы для ИФА или в виде многокомпонентных диагностических наборов-систем. Совместное русско-швейцарское предприятие «ДИАплюс» выпускает большой набор тест-систем, предназначенных для диагностики беременности, заболеваний щитовидной железы, нарушений функций генеративных (половых) органов, злокачественных заболеваний,

различных инфекционных заболеваний, в т.ч. вирусного гепатита, ВИЧ-инфекции.
Также выпускаются различными фирмами тест-системы для ИФА на диагностику развития плода, аутоиммунных заболеваний (иммунный статус), аллергических заболеваний, герпеса, заболеваний ЖКТ, крови, токсоплазмоза, цитомегалии, детских болезней: краснухи, кори, паротита, ветряной оспы; венерических заболеваний: хламидиоза, сифилиса.
Большей частью реактивы для ИФА выпускаются наборами, например, «ДИА плюс» 35 наборов.
Для контроля за наступлением беременности в аптечных учреждениях появились одноразовые тесты:
Би-шур-С — тест одноразовый на определение беременности по ХГЧ (хорионическому гонадотропину человека). Может быть использован в домашних условиях, время реакции мочи 1-5 мин. Выпускается фирмой Ситрон Биоресерч (США).
ХГЧ-ИХА-Вера — полоски для иммунохроматографического определения хорионического гонадотропина в моче для ранней диагностики беременности. В упаковке 100 шт. (Россия).
Сыворотки представляют собой жидкую фазу крови, формирующуюся после ретракции кровяного сгустка. Они имеют большое количество неорганических и органических соединений, в т.ч. белка.
Применяются для судебно-медицинских целей, а также диагностических для отдельных заболеваний (бруцеллез, сифилис, грипп, менингит, оспа, дифтерия и др.). Выпускается в виде жидкости, суспензии, порошка лиофилизированного, в ампулах, флаконах, бутылках; есть и многокомпонентные наборы. Ассортимент составляет около 110 наименований, хранятся при температуре 2-8° С, срок годности 1 -2 года.
К другим диагностическим иммунобиологическим средствам относятся антигены, белки, гидролизаты, питательные среды, реагенты, ассортимент которых по сравнению с вышеприведенными значительно меньше. В отличие от JIC ассортимент диагностику- мов практически весь отечественный;
В числе производителей диагностических иммунобиологических средств следующие российские предприятия:

• Предприятие по производству бактерийных препаратов НИИ ЭМ им. Н.Ф. Гамалеи;
• Предприятие по производству бакпрепаратов им. Г.И. Габричевского;
• Биомед им. И.И. Мечникова;
• НПО Питательные среды;
• Екатеринбургское предприятие по производству бакпрепаратов;
• С.Петербургский НИИ ВС;
• Нижегородский НИИ ЭМ;
• Аллерген;
• Вибрион;
• Ланафарм;
• Экотем;
• НПО Диагностические системы и др.
  1. Контрастные диагностические средства

В настоящее время диагностика различных заболеваний внутренних органов осуществляется с применением рентгенографии, метода ядерно магнитного резонанса, ультразвуковых исследований. Для исследования применяют контрастные средства, подразделяющиеся на 2 группы:

1. рентгенонегативные, пропускающие рентгеновские лучи;
2. рентгенопозитивные, задерживающие лучи.

К первой группе относятся диоксид углерода, азот, кислород, ксенон и др. газы; ко второй — йодозамещенные (на основе три- йодбензола) и не содержащие йод вещества, которые носят название ренттеноконтрастные вещества. Они применяются внутрь или парентерально, а затем проводятся рентгеноскопия или другие радиологические методы исследования различных органов.
Рентгеноконтрастные средства подразделяются на 2 группы, в том числе:

1. ионные контрастные средства (имеют некоторые недостатки: вызывают боль в сосудах, чувство жара, аллергоподобные реакции и др. осложнения);
2. неионные контрастные средства (лучше переносятся пациентами, отличаются меньшей химической токсичностью).

Натрия амидотризоат (МНН) — ионное контрастное средство, применяется для рентгенологических исследований сосудов,- сердца, в урологии и гинекологии. Выпускается р-р для инъекций в ампулах и флаконах. Сп. Б. Хранится в защищенном от света месте. Триомбраст (Украина), Триомбрин (Россия), Тразограф (Индия), Урографин (Германия; содержит помимо натриевой соли еще и метилглюкамин амидотризоат).
Йодамид (МНН) — по свойствам и применению аналогичен натрию амидотризоату. Выпускается p-jgt; для инъекций и для инфузий. Сп. Б. Йодамид 24% (Италия), Йодамид 300 для инъекций (Россия, Италия), Йодамид 380 для инъекций (Россия, Украина).
Йопромцд (МНН) — применяется при компьютерной томографии различных органов (сосудов, ЖКТ, в гинекологии, урологии и др.). Сп. Б. Выпускается р-р для инъекций. Ультравист 240, 300, 370 (Германия).

Йогексол (МНН) — неионное средство, р-р для инъекций во флаконах Омнипак (Ирландия, Норвегия).
Бария сульфат — применяется при рентгенографии ЖКТ, выпускается порошок для приготовления суспензии оральной (Россия). Адсобар (Россия), Корибар-Д (Россия).
Вазографин — применяется при рентгенографии сердечно-сосудистой системы, в урологии; выпускается р-р для инъекций (Россия).
Адипиодон (МНН) — для рентгенологических исследований желчных путей и желчного пузыря; р-р для инъекций. Сп. Б. Би- лигност (Россия).
Гадопентеновая кислота (МНН) — контрастное средство для магнитно-резонансной томографии головы и спинномозгового канала, р-р для инъекций. Сп. Б. Магневист (Германия).
Радиофармацевтические контрастные препараты — это вещества, меченные радиоактивными изотопами, применяются для проведения различных радиологических исследований.
Железа цитрат, меченный железом-59 — раствор во флаконах, (Россия).
Золота — 198 коллоидного раствор для внутривенных инъекций

• во флаконах (Россия), Комизол, Золото 198 (Россия).

Кукурузное масло, меченное йодом-131 (Россия).
Церетек — порошок лиофилизированный для инфузий (Великобритания).
Разные контрастные средства
Индигокармин — р-р для инъекций в ампулах (Россия).
Флюоресцеин натрия — р-р для инъекций, Флюоресцит (США).
Пентагастрин (МНН) — применяется для диагностических исследований ЖКТ, выпускается р-р для инъекций. Сп. Б. (Россия).

1. Ветеринарные препараты

В последние годы в связи с расширением перечня товаров, реализуемых в аптечных учреждениях, препараты для животных могут быть включены в ассортимент аптек. Необходимость в таких средствах обусловлена тесными контактами человека и животных, проявляющимися не только в содержании в домашних условиях последних, но и в потреблении человеком продуктов питания животного происхождения.
В настоящее время в ветеринарной практике и животноводстве применяется свыше 2 тыс. наименований лекарственных препаратов, позволяющих бороться с заболеваниями животных, а также проводить различные профилактические мероприятия против вирусных и бактериальных инфекций.

Все ветеринарные препараты проходят апробацию и контроль качества, для чего имеются соответствующие нормативные документы.
Современный ассортимент ветеринарных препаратов включает ряд групп, представленных на рис. 93.

Рис. 93. Классификация ветеринарных препаратов.

Вакцины. Ассортимент вакцин включает средства против различных заболеваний для крупного рогатого скота, свиней, кроликов, лошадей.
Сыворотки предназначены для профилактики, лептоспироза, эшерихиоза, паратифа, рожи.
Биопрепараты включают биостимуляторы из тканей животных для внутреннего и наружного применения, а также противовирусные препараты для животных и птиц (Фоспренил).
Антипаразитарные средства включают препараты против блох, клещей, глистов разных видов, чесотки и других возбудителей заболеваний (Неостомозан, Бутокс, Альбен, Пиперазин, Универм, Авер- сект, Ивомек и др.).
В ассортимент антибактериальных входят препараты антибиотики, применяющиеся и для людей, в том числе Левомицитин, Амоксициллин, Гентамицин, Бензилленициллин, Бициллин, Неомицин, Тетрациклин, Стрептомицин и др._ В ветеринарии используются Метро- нццазол, Диоксвдин, Ихтиол, Йод, Стрептоцид, Фуразолидон и др. антибактериальные препараты.
В группу химиотерапевтических включены некоторые препараты для лечения животных, например Глюкоза, Кальция хлорид, Кофеин, Новокаин как растворитель, Окситоцин, Ферроглюкин и др.
Витамины также широко представлены в ассортименте: есть препараты жирорастворимых витаминов А, Д, Е (тривитамины),

рыбий жир, комплексы витаминов группы В (комплекс В), мука костная как источник микроэлементов.
Большой ассортимент представлен витамино-минеральных подкормок (премиксов), например, Айболит, Борька для свиней, Буренка

• дойных коров, Гаврюша — телят, Гнедой — лошадей, Иван Иваныч — гусей, Пушок — пушных зверей, Рябушка — кур, Ушастик — кроликов и нутрий, Щенок — щенков и др.

Для домашних собак и кошек имеются моющие зоошампуни с инсектицидным действием (Шампунь деликс, Шампунь луговой).
Вопросы для самоконтроля

1. Дайте определение термина «качество ЛС».
2. Какой приказ М3 регламентирует контроль качества ЛС в аптеках?
3. Расскажите состав контрольно-разрешительной системы.
4. Дайте характеристику химических реактивов.
5. Какие титрованные растворы и индикаторы применяются в аптечных учреждениях?
6. Для чего предназначены биохимические реактивы?
7. Дайте классификацию диагностических средств.
8. Дайте характеристику иммунобиологических диагностических средств.
9. Расскажите о контрастных диагностических средствах.
10. Дайте характеристику ветеринарных препаратов.

источник

1. Правильная подготовка к сдаче анализов крови
2. Сдача крови на анализ
3. Самостоятельное проведение экспресс-теста
4. Виды анализа на холестерин
5. Расшифровка результатов анализа
6. Что лучше есть перед сдачей крови на анализ

Для снижения холестерина наши читатели успешно используют Aterol. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Чтобы диагностировать атеросклероз и вовремя выявить риск развития инсультов и инфарктов, необходимо сделать анализ на холестерин. Для этого кровь отбирается из вены, причем делается это натощак.

Далее рассмотрим, как специалисты рекомендуют готовиться к сдаче анализов, как правильно сдавать кровь, какие анализы будут проводиться, а также о чем будут говорить их результаты.

Обычно вся подготовка перед тем, как сдавать кровь на холестерин, заключается в воздерживании от принятия пищи в течении минимум восьми часов.

Обычно полным людям врачи рекомендуют не употреблять за два дня до анализов любую жирную пищу. Это способствует более качественной подготовке.

Существуют утвержденные правила, которые по пунктам расписывают, как подготовиться к сдаче крови на холестерин:

• Прием пищи проводится за 12-16 часов перед посещением медицинского учреждения. Более длительное голодание может привести к ослаблению организма, вследствие чего результаты лабораторного теста окажутся недостоверными.
• Минимум сутки перед проведением исследования нельзя употреблять алкоголь, а за 1,5-2 часа также не рекомендуется курить.
• Перед сдачей крови можно пить только негазированную воду без сахара, хотя и это также нежелательно. По возможности ограничьтесь стаканом очищенной воды.
• Если употребляются медицинские препараты, об этом обязательно предупреждается врач, дающий направление на проведение исследования. В этом случае отменяется прием лекарственных средств, влияющих на содержание холестерина (витамины, мочегонные средства, антибиотики, гормональные препараты и другие).
• Уровень холестерина у женщин репродуктивного возраста находится вне зависимости от менструального цикла, поэтому от специализированного исследования не следует отказываться даже в ходе месячных.

Иногда, напротив, специалисты требуют от пациентов вообще специально не готовиться к сдаче крови. Это нужно, если будет проводиться определение среднего показателя.

Только в специализированных лабораториях медицинских учреждений может быть проведен анализ на холестерин. Как сдавать кровь, непосредственно на месте объяснит сотрудник лаборатории, а от самого пациента лишь требуется правильно подготовиться к процедуре и прийти утром в медучреждение.

Непосредственно перед сдачей рекомендуется минут 10-15 посидеть и расслабиться. Сразу после быстрой ходьбы или, например, подъема на несколько этажей по лестнице процедуру начинать нельзя.

С высокой точностью самостоятельно анализ крови на холестерин провести не удастся, так как универсальных приборов для этого еще не существует. Такой процесс проводится исключительно в специализированной лаборатории по специальным схемам с использованием высокочувствительных реактивов.

Тем не менее для пациентов, которым показана гиполипидемическая терапия, существует специальный экспресс-метод диагностики при помощи электронного экспресс-анализатора с тестовыми одноразовыми полосками или же экспресс-теста, тоже одноразового.

С их помощью можно получить представление об эффективности лечения дома, не посещая врача.

Для проведения экспресс-теста следует обязательно проводить все подготовительные мероприятия, связанные с ограничением приема пищи, алкоголя и т. д.

Удобство метода заключается не только в отсутствии необходимости посещения лаборатории, но и в быстрых результатах диагностики — сделать вывод о примерном содержании холестерина можно уже через пять минут, в то время, как заключение медицинским учреждением выдается только через 1-3 суток.

Приборы для экспресс-тестов используются по типу глюкометра:

1. На специальную тест-полоску в аппарате помещается капля крови пациента;
2. Через примерно три минуты на дисплее появится цифра, которая и будет результатом анализа общего содержания холестерина в крови.

Подобные исследования крови у здоровых людей проводятся обычно раз в год. Пациентам же с повышенным фактором риска развития сердечно-сосудистых заболеваний проверку следует проводить чаще, в т. ч. с использованием описанного портативного прибора.

Всегда для оценки состояния здоровья в ходе диспансеризации, медобследований и т. д. проводится общий анализ крови, холестерин при котором определяется наряду с другими важнейшими показателями.

Если выявляется его превышение (более 5,2 ммоль/л), то это служит основанием для проведения более развернутого исследования, называемого липидограммой.

Наиболее точно об опасности развития атеросклероза можно судить, проведя т. н. развернутый анализ крови на холестерин. Он представляет собой расширенное исследование (липидограмму), которая определяет не только содержание общего холестерина, но и его фракций, триглицеридов и коэффициента атерогенности.

Холестерин, а точнее его фракции в результатах развернутого анализа обозначаются как:

• ЛПВП или альфа-холестерин (липопротеид с высокой плотностью). Он представляет собой «полезный» вид холестерина, который не откладывается в сосудах, а напрямую транспортируется в печень. Нормальные показатели ЛПВП должны превышать 1 ммоль/л.
• ЛПНП или бета-холестерин (липопротеид с низкой плотностью). Это уже т. н. вредный холестерин, служащий строительным материалом для атеросклеротических бляшек в сосудах. Его содержание в крови должно быть менее 3 ммоль/л.

Еще один важный показатель в результатах исследований — индекс атерогенности, обозначаемый аббревиатурой КА. Он представляет собой соотношение ЛПНП/ЛПВП.

Если значение рассматриваемого коэффициента меньше трех, то человек здоров, а риск поражения сосудов у него минимальный. О имеющемся уже атеросклерозе будет свидетельствовать превышающее 5 единиц значение КА. В этом случае высока вероятность развития ишемического поражения внутренних органов, включая ИБС.

Еще раз отметим, что именно от питания перед проведением исследования во многом будут зависеть его результаты.

Поэтому обязательно нужно знать, как сдать анализ на холестерин правильно, в противном случае вслед за обычным общим анализом необходимо будет провести развернутый, а также и другие исследования, так как превышение или, напротив, недостаточное количество рассматриваемого органического соединения обычно свидетельствует о развитии различных патологий.

Повышенный холестерин встречается у пациентов с ишемической болезнью сердца, а также при сахарном диабете, болезнях почек, ожирении, раке поджелудочной железы, алкоголизме.

Но и низкая концентрация также не является нормой и может говорить о наличии таких заболеваний, как запущенный цирроз, хроническая анемия, а также болезнях костного мозга, имеющихся раковых образованиях и т. п.

Ранее приведенное значение допустимого уровня холестерина на уровне 5 ммоль/л является усредненным, т. к. данный показатель зависит от возраста и более детально определяется по специальной шкале SCORE:

• Лицам, входящим в низкую группу сердечно-сосудистого риска (без плохой наследственности, молодого возраста) допустимый уровень лежит ниже отметки 5,5 ммоль/л.
• Для пациентов с умеренным риском (страдающих ожирением, с низкой физической активностью, среднего возраста) допустимым уровнем является 5 ммоль/л.
• Для лиц из высокой группы риска (гипертоников, с сахарным диабетом, сосудистой патологией) значение должно быть ниже 4,5 ммоль/л.
• Для людей с очень высоким сердечно-сосудистым риском (инсульт, ИБС, атеросклероз) нормальным уровнем холестерина будет считаться концентрация менее 4-х ммоль/л.

Также нужно учитывать, что нормальные результаты анализов различаются, например, у детей разного возраста и у взрослых, поэтому точно определить необходимость проведения дополнительных исследований и назначить соответствующее лечение может только врач.

Если общий анализ выявил превышение содержания холестерина в крови, необходимо проводить развернутое исследование. Как правильно сдать кровь на холестерин, ранее уже было отмечено.

В данном случае перед проведением развернутого анализа важно как можно более тщательно следовать приведенным рекомендациям, так как на его основе в случае выявления патологии будет назначаться соответствующее лечение.

Такой важнейший показатель, как уровень «плохого» холестерина ЛПНП определяет возможность развития сосудистых патологий. Поэтому на основании его значений с учетом степени сердечно-сосудистого риска врачом назначается (или, напротив, не назначается) лечение с использованием статинов.

Эти препараты, несмотря на эффективность в борьбе с повышенным холестерином, имеют массу противопоказаний, вот почему крайне важно качественно сдать анализ на холестерин. Как сдавать кровь на общее исследование, ранее было подробно описано. Порядок подготовки к сдаче на развернутый анализ ничем не отличается.

Более подробно рассмотрим расшифровку развернутого исследования крови. Помимо определения ранее рассмотренных ЛПВП и ЛПНП («полезного» HDL-холестерина и «вредного» LDL-холестерина) определяется также и уровень триглицеридов.

Последние являются производными жирных кислот и глицерина, т. е. поступающими из пищи в кровь растворенными жирами и не относятся к соединениям холестерина.

Ниже подробно представим нормальные, повышенные и высокие значения концентраций рассмотренных соединений:

Особое внимание следует обратить на «хороший» холестерин. Его уровень в отличие от «плохого» ЛПНП определяется максимальным показателем, т. е. чем больше его в организме, тем более защищенными от различных патологий являются ваши сосуды.

Итак, вам требуется сдать кровь на холестерин. Как подготовиться к этому мероприятию, уже было описано. То есть нельзя есть как минимум за 12 часов до сдачи, употреблять алкоголь за сутки и т. д.

Однако если до сдачи анализов есть несколько дней, можно подготовиться получше, выбрав диету, которая поможет максимально подготовить ваш организм.

Для этого полностью исключите из рациона всю жирную, копченую, жареную пищу, выпечки, шоколад и любые сладости, жирные молочные продукты. Старайтесь по возможности употреблять большее количество морепродуктов и овощей.

Больше находитесь на воздухе, совершайте пешие прогулки, увеличьте физическую активность. В этом случае при отсутствии серьезных заболеваний ваш холестерин в крови всегда будет в норме.

Ревмопробы – биохимическое исследование, подразумевающее не один анализ, а целый набор лабораторных тестов, используемых для диагностики аутоиммунных состояний организма.

Отправляя пациента на «ревмопробы», врач, как правило, составляет перечень показателей, интересующих его (что зависит от того, какую патологию подозревает доктор). Это может быть С-реактивный белок (СРБ, СРП, CRP), ревматоидный фактор (РФ), антистрептолизин-О (АСЛ-О, ASO), общий белок, белковые фракции, креатинин и др. Причем, определения «положительные ревмопробы» или «отрицательные результаты» применимы только в отношении СРБ, РФ и АСЛ-О (качественный анализ). Что касается других биохимических показателей (общий протеин, белковые фракции, мочевина, креатинин), то их содержание должно иметь цифровое выражение.

Для снижения холестерина наши читатели успешно используют Aterol. Видя, такую популярность этого средства мы решили предложить его и вашему вниманию.
Подробнее здесь…

Обычно ревмопробы назначают после перенесенной бактериальной или вирусной инфекции, коль есть подозрение, что она могла запустить аутоиммунный процесс, или в случае появления признаков развития хронической воспалительной реакции, обусловленной другими причинами. Итак, поводом сдать анализ крови и сделать ревмопробы можно считать:

• Иммунновоспалительные болезни почек (гломерулонефрит);
• Частые ангины (диагноз: хронический тонзиллит);
• Онкологическая патология различной локализации;
• Аутоиммунные заболевания (СКВ – системная красная волчанка, РА — ревматоидный артрит).

В подобных случаях анализ крови (ревмопробы) показывает, насколько далеко зашел аутоиммунный процесс, какие изменения в организме он вызвал, как организм откликнулся (или откликается) на проведенные лечебные мероприятия. Отвечая на поставленные вопросы, данное лабораторное исследование помогает врачу правильно оценить степень прогрессирования болезни и состояние пациента, а также дает возможность прогнозировать исход заболевания и эффективность назначенной терапии.

Как указывалось выше, ревмопробы могут включать различные лабораторные показатели:

• С-реактивный протеин (СРБ, СРП, CRP);
• Ревматоидный фактор (РФ);
• Антистрептолизин О (АСЛ-О, ASO);
• Антитела к циклическому цитрулиновому пептиду (А-ЦЦП, А-ССР, anti-CCP);
• Общий белок с разделением его на фракции (α, β, γ);
• Мочевую кислоту (МК), креатинин, мочевину, креатин;
• Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК);
• В иных случаях в перечень ревмопроб могут быть добавлены сиаловые кислоты (сиалогликопротеины), занимающие краевое положение в углеводно-белковых комплексах и имеющие склонность к повышению в случае компенсаторных воспалительных реакций, а также серомукоиды (фракция углеводно-белковых комплексов, в состав которых входят протеины «острой фазы), заметно отклоняющиеся от нормы при любых воспалительных процессах.

Отдельные биохимические показатели не всегда присутствуют в списке лабораторного исследования под названием «ревмопробы». Например, общий протеин и белковые фракции интересны, если у пациента предполагаются (или диагностированы) гематологические заболевания, в том числе, злокачественные, миелома, аутоиммунные процессы, тяжелые поражения печени. Тест на мочевую кислоту проводится тогда, когда наличествуют симптомы подагры. А креатин, креатинин и мочевина подтвердят подозрения в отношении развития почечной патологии (или, наоборот, исключат заболевания почек).

Не всегда проводят определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) — показателей формирования воспалительных реакций и активности аутоиммунных процессов, протекающих в организме (ревматизм, коллагенозы, гломерулонефрит, последствия вирусных и бактериальных инфекций). Это связано с некоторыми трудностями: выявление ЦИК не относится к традиционным биохимическим исследованиям, анализ подобного рода находится в компетенции иммунологических лабораторий, которые обеспечены тест-наборами для производства таких анализов и занимаются подобной деятельностью ежедневно. Разумеется, это преимущество имеют клинико-диагностические лаборатории, расположенные в многопрофильных клиниках больших городов.

Нет смысла давать подробную характеристику всем биохимическим показателям, входящим в состав ревмопроб (они перечислены выше), если на нашем сайте их значимость, расшифровка и особенности уже представлены вниманию читателей в соответствующих разделах. Между тем, нельзя еще раз коротко не упомянуть о тех трех факторах, которые признаны главными — СРБ, РФ, АСЛ-О. Правда, в последнее время отдельные лаборатории для диагностики ревматоидного артрита стали использовать четвертый показатель – антитела к циклическому цитрулиновому пептиду (А-ССР), об основных достоинствах которого читатель также сможет узнать в данной статье. При всем этом, следует заметить, что каждый из тестов, хоть и хорош по-своему, но может не давать полной картины происходящего, поэтому врачи не назначают их по отдельности (только СРБ или только АСЛО…). Как правило, они (с расшифровкой каждого) идут все вместе под одним названием – ревмопробы, поскольку совместно они помогут не только установить диагноз ревматоидного артрита, но и позволят дифференцировать его (РА) от другой, схожей по клинике, патологии.

Расшифровка данных тестов проста, однако по каждой позиции отдельна, например: РФ (СРБ, АSO) – отрицательно. В случае положительной реакции, нужна отметка о проведении полуколичественного, количественного анализа или титровании с результатом исследования либо о необходимости привлечения дополнительных методов, если сама лаборатория по каким-либо причинам не может их обеспечить. При наличии указания на количественное содержание показателя, чтобы не запутаться в нормах, которые в разных лабораториях могут отличаться, следует узнать референсные значения, принятые в КДЛ, производившей анализ.

Расшифровка других биохимических показателей, которые могут войти в исследование под названием «ревмопробы», приведена в соответствующих темах, размещенных на других страницах сайта.

С-реактивный белок – острофазный протеин в биохимическом анализе крови проявляющийся увеличением фракции гамма-глобулинов, к которым он и относится. Норма в крови — до 5 мг/л .Повышение СРБ, в первую очередь, провоцирует острый воспалительный процесс (в таких случаях данный показатель может увеличивать свои значения в 100 и более раз).

Методика определения СРБ (латексная агглютинация) сложностью не отличается и позволяет получить ответ в самое ближайшее время. Если результаты качественного латекс-теста отрицательные, значит, можно сделать вывод, что с С-реактивным протеином все в порядке. Если же при проведении анализа отмечается положительная ревмопроба, то в тест-наборе имеются реактивы, обеспечивающие дальнейшее проведение исследования (полуколичественный анализ).

СРБ для диагностики острого воспаления имеет особую ценность, ведь этот белок реагирует практически немедленно и повышается раньше других показателей (СОЭ, лейкоциты). Кстати, и в норму он приходит раньше других: процесс затих – результаты отрицательные.

Уже по названию видно, что ревматоидный фактор имеет непосредственное отношение к ревмопробам и определенной патологии – ревматоидному артриту (РА). И в самом деле, ревматоидный фактор (РФ) – главный анализ, выявляющий эту болезнь. Кроме этого, данный лабораторный показатель не лишен способностей «заметить» другие патологические состояния: острый воспалительный процесс любой локализации, системные заболевания. Норма РФ в большинстве лабораторий фиксируется как «отрицательный результат», либо не более 14 МЕ/мл.

Сам по себе РФ представляет совокупность антител (M, A, E, G), где наибольшую часть занимают иммуноглобулины класса М (IgM). Иммуноглобулины М, подвергаясь воздействию инфекционного агента, начинают изменять свои обычные свойства и брать на себя роль аутоантигенов, чем «вводят в заблуждение» собственные иммуноглобулины класса G. Метаморфозы, происходящие с IgM в определенных условиях, легли в основу данного исследования.

РФ, подобно СРБ, можно определить с помощью латекс-теста. Это качественный анализ, который нередко дает ложноположительные ответы, поэтому больше подходит для скрининга, нежели для окончательного установления диагноза. Норма качественного анализа на РФ – отрицательный результат. Однако следует иметь в виду и то, что существует серонегативная форма заболевания (РА), когда результаты отрицательные, а симптомы не оставляют сомнений в развитии воспалительной реакции подобного рода.

При положительной ревмопробе (имеется в виду – РФ) или при подозрении на серонегативную форму заболевания, следует обратиться к другим лабораторным тестам, например, ИФА (иммуноферментный анализ), который позволяет определить не только количественное содержание иммуноглобулинов М в плазме, но и найдет другие антитела, присутствующие в ревматоидном факторе.

Антистептолизины-О представляют собой антитела (АТ), направленные к стрептолизину (так называют антиген бета-гемолитического стрептококка). Норма для взрослых — до 200 Ед/л; для детей до 14 лет — до 150 Ед/л.

Учитывая особую «вредность» гемолитического стрептококка (вторичные инфекции, всевозможные осложнения), тест, определяющий его присутствие в организме, считается весьма значимым лабораторным показателем. Его применяют не только для диагностики патологических состояний, вызванных Streptococcus pyogenes, но и с целью мониторинга развития воспалительного процесса, его прогноза и эффективности лечения. Между тем, следует заметить, что однократное исследование может не дать должной информации, то есть, отрицательные результаты за первым разом не способны успокоить ни врача, ни больного (у 15% пациентов-ревматиков повышение титров АТ может фиксироваться через раз или вовсе не обнаруживаться).

Для определения антистрептолизинов-О и его титров (в набор входит отдельный комплект для титрования) также существует латекс-тест – исследование быстрое и нетрудоемкое, однако некоторые врачи предпочитают проведение анализа крови турбидиметрическим методом, к нему у них больше доверия. Но этот метод (турбидиметрический) уже нуждается в привлечении более сложного оборудования.

Тест на выявление anti-CCP вошел в лабораторную практику, можно сказать, недавно, ведь сами антитела были описаны только в 1998 году. Однако высокая чувствительность и специфичность для РА позволила новому исследованию быстро занять место лучшего маркера ревматоидного артрита. Антитела к циклическому цитрулиновому пептиду взяли на себя ключевую роль в развитии данного патологического состояния. Кроме этого, определение anti-CCP хорошо себя зарекомендовало в вопросах проведения дифференциальной диагностики, прогнозирования течения процесса, разработки стратегии терапевтического воздействия.

Исследование А-ССР проводится с помощью передового иммунохимического метода с электрохемилюминисцентной детекцией (ECLIA). К сожалению, пока не каждая лаборатория может гордиться внедрением новой технологии. Анализ требует участия дорогостоящего оборудования и специальных тест-систем, закупаемых за рубежом, что иным медицинским учреждениям оказывается не по карману.

Норма anti-CCP — «отрицательный результат», до 20 Ед/л.

Шаг 2: после оплаты задайте свой вопрос в форму ниже ↓ Шаг 3: Вы можете дополнительно отблагодарить специалиста еще одним платежом на произвольную сумму ↑

Цоликлоны – это моноклинальные антитела, полученные путем генной инженерии из крови стерильных мышей и применяемые для определения группы крови системы АВО. В отличие от стандартных сывороток, цоликлоны отличаются очень высокой активностью и авидностью, то есть временем наступления и выраженностью реакции агглютинации (склеивания). Основными цоликлонами являются: анти-A, анти-B, анти-AB, анти-0 и другие. По ним определяют группы крови и резус-фактор.

Определение группы крови данным методом проводится в лаборатории. Температура воздуха в помещении должна составлять от +15 до + 25 градусов C. Исследование должно проходить при хорошем освещении. Все реагенты нужно хранить плотно закрытыми, поскольку при высыхании активность антител значительно снижается. Нельзя использовать мутные и содержащие хлопья реагенты. Для каждого из них нужна отдельная пипетка. Процедура проводится на планшете или тарелке белого цвета, поверхность которых должна хорошо смачиваться. Благодаря высокой авидности и активности цоликлонов, есть возможность применения по одной серии анти-A и анти-B реагентов.

На планшете делают надписи: анти-A и анти-B. Под соответствующие надписи капают цоликлоны в количестве примерно 0,1 мл. Реагент анти-A имеет желтовато-розовый цвет, анти-B – синий. Рядом с моноклональными антителами капают по капле крови и смешивают ее с реагентами стеклянной палочкой или уголком предметного стекла. Перед смешиванием следующей пары капель палочку или стекло тщательно промывают и вытирают насухо.

На протяжении 2,5 минут ведут наблюдение за агглютинацией, при этом планшет слегка покачивают. Затем оценивают результат. Надо сказать, что для наблюдения за процессом не требуются никакие приспособления. Агглютинаты хорошо видны невооруженным глазом, они быстро сливаются и образуют большие хлопья. Если склеивания не происходит, капля реагента равномерно окрашивается в красный цвет.

1. Если агглютинация отсутствует (и с цоликлоном анти-A, и с анти-B), в эритроцитах нет ни антигена A, ни B. Это I группа.
2. Если агглютинация есть лишь с цоликлоном анти-A, в эритроцитах содержится только антиген A. Это кровь II группы.
3. Если агглютинация наблюдается лишь с цоликлоном анти-B, в красных клетках есть только антиген B. Это III группа.
4. Если агглютинация произошла c цоликлоном и анти-A, и анти-B, в эритроцитах есть оба антигена. Для исключения аутоагглютинации проводят контрольную процедуру: смешивают изотонический раствор натрия хлорида (0,1 мл) и исследуемую кровь (0,01 мл). Если агглютинация отсутствует, то это IV группа.

На планшет наносят большую каплю реагента анти-D-супер. Рядом – маленькую (в 10 раз меньше) исследуемой крови, которую смешивают с реагентом и оценивают результат. Если началась агглютинация, кровь является резус-положительной, при отрицательном резус-факторе агглютинации не происходит.

Моноклональные реагенты для определения группы крови имеют явные преимущества по сравнению со стандартными изогем-агглютинирующими сыворотками. Они обеспечивают очень точный результат, а сама процедура безболезненна, безопасна и занимает очень мало времени.

Почему лопаются сосуды в глазах?

источник

2.1. Техника забора крови и подготовки
образца крови для исследования

Шаг А. Подготовка растворов, пробирок и другого инструментария (табл. 1).

Таблица 1. Необходимые подготовительные процедуры при проведении общего анализа крови

Забор крови из мякоти пальца (капиллярная кровь).

Тщательно протирают кожу мякоти пальца ватным шариком, смоченным спиртом, делают укол стерильным копьем до упора. Первую выступившую каплю крови вытирают сухим ватным шариком; из следующих капель, выступающих из мест укола при легком надавливании, быстро набирают необходимое количество крови: для СОЭ, для определения гемоглобина, для определения числа эритроцитов, для определения числа лейкоцитов, для исследования лейкоцитарной формулы, для определения тромбоцитов.

Забор крови из вены (венозная кровь).

Накладывают жгут на 8–10 см выше локтевого сгиба. Обрабатывают кожу локтевого сгиба над обнаруженной по характерному вздутию вены шариком, смоченным спиртом или другим антисептиком. В вену вводят иглу с подсоединенным шприцем и набирают необходимое для анализа количество крови. Кровь осторожно (не вспенивая, так как при этом происходит разрушение эритроцитов и других клеток крови) выпускают в пробирку с порошком ЭДТА или другим антикоагулянтом. Пробирку закрывают пробкой и тщательно перемешивают кровь для распределения антикоагулянта, опрокидывая пробирку сначала пробкой вниз, затем пробкой вверх. В настоящее время используются специальные системы для забора крови и ее одновременного помещения в одноразовую пластиковую пробирку с антикоагулянтом. Предпочтение исследования венозной крови связано с возможностью одновременного получения объема крови, необходимого для разных анализов.

Шаг В. Внесение крови в подготовленную лабораторную посуду

Кровь вносят в подготовленную посуду специальным капилляром объемом 20 мкл согласно приведенным в табл. 2 разведениям в указанном выше порядке. Набирают ее капилляром до метки 0,02 из мест укола в мякоти пальца или пробирки с венозной кровью, кончик капилляра промокают фильтровальной бумагой, выдувают кровь в соответствующую пробирку и промывают капилляр (путем заполнения капилляра и выдувания раствора) в реактиве той же пробирки для максимально полного внесения образца крови.

Таблица 2. Объемы крови для определения показателей общего анализа крови

Затем для последующего определения лейкоцитарной формулы каплю крови наносят на край обезжиренного предметного стекла и быстро готовят тонкий мазок с помощью шлифованного стекла, краем которого быстрым движением продвигают каплю крови по предметному стеклу.

Таким образом, после выполнения шага В для исследования образца крови имеются 4 пробирки со смесью крови и соответствующего реактива и приготовленный тонкий мазок крови на предметном стекле, необходимые для дальнейших диагностических процедур с использованием специального оборудования (табл. 3).

Таблица 3. Оборудование и методы определения основных показателей общего анализа крови

2.2. Техника определения показателей
общего анализа крови

источник

Забор крови, с последующим её исследованием производился у мужчин в возрасте от 20-ти до 35-ти лет, до и после физической нагрузки. В исследовании приняла участие группа из тридцати трёх человек, каждый из которой, после взятия пробы до физической нагрузки, проходил стандартную тренировку в течение часа. В таблице 3 сведены типы и продолжительность упражнений, которым подвергались все испытуемые.

Таблица 3 — типы физической нагрузки, применяемой в исследовании

Тренировка включала в себя 15 минут бега в нормальном темпе (один тридцатиметровый круг в минуту); выполнение комплекса упражнений (подтягивания, отжимания от пола, приседания) в течение 15 минут в ускоренном темпе (20 подтягиваний в минуту, 50 приседаний в минуту, 30 отжиманий в минуту); 30 минутный спарринг в нормальном темпе (20-25 бросков в минуту). По окончанию тренировки вновь бралась проба такого же объёма, у тех же испытуемых, что и до тренировки.

Основные этапы выполнения общего анализа крови:

2 приготовление мазков крови;

3 проведение анализов на гематологическом анализаторе;

6 подсчёт лейкоцитарной формулы.

Взятие материала. Кровь для исследования получили путём прокола четвёртого пальца левой руки обследуемого слева от срединной линии на некотором расстоянии от ногтя. В зависимости от толщины кожи глубина прокола составляет 2-3 мм. Обработанная кожа пальца высыхает несколько секунд. Цель этого «высыхания» — исключить растекание крови по пальцу, а также гемолитического воздействия антисептика на эритроциты. Скарификатор одноразового использования плотно зажимается между указательным и большим пальцами правой руки; производится прокол. Прокол произвели перпендикулярно рисунку кожных покровов пальца, так как в этом случае происходит повреждение нескольких капилляров, ход которых совпадает с ходом линий кожного рисунка. Учитываем, что разрез произведённый параллельно кожным линиям, спадается, что затрудняет забор крови. Первую, выступившую каплю крови удалили ватным тампоном, а последующие были взяты на исследование. Взятую кровь поместили в пронумерованные и обработанные раствором антикоагулянта. Трилоном-Б, пластиковые микрокюветы. На следующем рисунке показаны одноразовые пластиковые микрокюветы, более удобные и безопасные в использовании, чем стеклянные пробирки.

Все манипуляции связанные с забором крови проводились используя стерильные комплекты инструментов для взятия крови (капилляры Панченкова, предметные стёкла, скарификаторы и микрокюветы). Для каждого обследуемого использовалась индивидуальная пара перчаток и стерильных ватных укладок. Все манипуляции проводились в соответствии с требованиями приказа №165 МЗ РБ от 25.11.2002 г «О методах стерилизации и дезинфекции в медицинских учреждениях» [21].

Рисунок 1 — Микрокюветы с раствором антикоагулянта

Приготовление мазков крови. Для изготовления мазка крови использовались тщательно обезжиренные предметные стёкла. Мазок крови готовился шлифованным стеклом с идеально ровным краем, ширина которого была приблизительно на 2-3 мм уже предметного стекла. К куполу свеже выпущенной из прокола капли было сделано прикосновение предметным стеклом на расстоянии 1,5-2 см от его края, не касаясь кожи в месте прокола. Размер капли на стекле не менее 2-3 мм в диаметре. Шлифованным стеклом, приставленным к предметному под углом 45°, быстрым движением справа налево был сделан мазок. Критерием правильности выполненного мазка является его полупрозрачность и желтоватый цвет. Техника приготовления мазка крови представлена на следующем рисунке.

Рисунок 2 — Техника приготовления мазка крови

Проведение анализов на гематологическом анализаторе. Для исследований использовался гематологический анализатор SISMYX-500. Взятую кровь в миниёмкастях тщательно перемешали и поместили в загрузочную часть аппарата. Предварительно была проведена калибровка данного аппарата, которая заключалась в проведении полного анализа микрокюветы с дистиллированной водой. Определение параметров исследуемой крови протекает в автономном режиме, без непосредственного участия человека. По завершению цикла исследования сняли выданные аппаратом результаты [22].

Изображение аппарата SISMYX-500, и момента отбора пробы для анализа, представлены на рисунке 3.

Фиксация мазков крови. Данный этап предохраняет форменные элементы от содержащейся в красителях воды, под влиянием которой в не фиксированных мазках происходит гемолиз эритроцитов и изменяется морфология лейкоцитов.

Фиксатор также вызывает коагуляцию белков и тем самым закрепляет препарат на стекле. В качестве фиксирующей жидкости использовали раствор эозинметиленового синего по Май-Грюнвальду. Высушенные мазки опускались в широкогорлую банку с фиксатором на 3-5 минут. Далее пинцетом мазки были извлечены и высушены на воздухе.

Рисунок 3 — Гематологический анализатор SISMYX-500

Окраска мазков крови. Фиксированные сухие мазки поместили в контейнер, который опустили в кювету с рабочим раствором красителя и выдержали в нём экспозицию в 30 минут.

Затем, контейнер был перенесён в кювету с водопроводной водой, а затем в вертикальный штатив для сушки. В качестве красящего раствора был использован краситель по прописи Романовского-Гимзы. В состав красителя входят: азур-2 (смесь равных количеств азура-1 и метиленового синего) и эозин. Критериями правильности данной окраски являются розово-оранжевые гранулы эозинофилов, светло-розовый цвет эритроцитов, нейтрофильная зернистость фиолетового цвета.

Подсчёт лейкоцитарной формулы производят с помощью иммерсионной системы микроскопа с увеличением Ч630. Для работы используется специальное иммерсионное масло, каплю которого наносят на препарат. Удобный обзор препарата настраивают с помощью микро- и макровинтов. Для регистрации клеток при подсчёте лейкоцитарной формулы использовался счётчик лабораторный СЛ-1.

Это простейший арифмометр снабжённый клавишами, обозначенными буквами для подсчёта соответствующих видов лейкоцитов, изображён на рисунке 4.

Рисунок 4 — Счётчик лабораторный СЛ-1

Подсчёт лейкоцитов производился в тонкой части мазка, где эритроциты располагаются одиночно. Препарат просматривают по зигзагообразной линии («линии Меандра») в количестве 3-5 полей зрения. Когда сосчитано 100 клеток, счётчик издаёт характерный сигнал, что означает окончание подсчёта лейкограммы данного препарата. Подсчитывались только целые, не разрушенные клетки.

Для оценки влияния физической нагрузки на состояние показателей периферической крови использовались результаты общего анализа крови до и после физической нагрузки.

В ходе исследования нами были вычислены среднее арифметическое, стандартное отклонение, стандартная ошибка, коэффициент вариации по продуктивности и устойчивости внимания, а также по показателям темпа выполнения.

Средняя арифметическая вычисляется по формуле:

где Xi — значение признака, варианта;

где x2 — сумма квадратов центральных отклонений, т. е. квадратов разностей между каждым значением и средней арифметической;

n — 1 — число степеней свободы, равное числу объектов в группе без одного.

Ошибка стандартного отклонения:

где у — стандартное отклонение;

м — средняя арифметическая.

В результате обработки полученного материала, был проведён статистический анализ, построены графики зависимости показателей концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, от воздействующего на них фактора физической нагрузки, а также таблицы результатов дисперсионного анализа, для каждого из исследуемых показателей.

Статистическая обработка результатов исследований выполнена с использованием прикладных программ MS Excel 2007 и Statistica for Windows 6.0. Оценка достоверности различий осуществлялась на основе критерия Фишера. Влияние физической нагрузки на показатели крови оценено методом однофакторного дисперсионного [23].

источник