Резистентность эритроцитов в анализе крови

Осмотическая резистентность эритроцитов — показатель устойчивости эритроцитов к осмотическому давлению. Стойкость ККТ определяется только путем диагностических мероприятий. Превышение или понижение нормы будет свидетельствовать о развитии определенного патологического процесса, а потому показатель следует всегда контролировать.

Осмотическая резистентность эритроцитов имеет свои минимальные и максимальные значения:

• максимум — воздействие гипотонического раствора натрия хлорида, когда в течение трех часов происходит гемолиз совершенно всех клеток;
• минимум — воздействие вещества другой концентрации, при которой происходит разрушение только минимально устойчивых клеток.

Следует отметить, что осмотическая резистентность эритроцитов будет зависеть от их возраста. Самая большая устойчивость у молодых ККТ как у самых плоских.

Определение осмотической резистентности эритроцитов осуществляется следующим образом:

• используется несколько стеклянных пробирок, в которые заливается раствор натрий хлорида разной концентрации — чаще всего от 0,7 до 22 %;
• в пробирки с раствором добавляют образцы крови, но только в одинаковом количестве;
• образцы помещают в условия комнатной температуры на 60 минут;
• по истечении срока пробирки с образцами центрифугируют;
• полученный после этого окрас жидкости будет указывать на показатели осмотической стойкости эритроцитов.

Если окрас жидкости розовый, это говорит о минимальной концентрации, а вот ярко-красный цвет будет говорить о максимальной. Норма для сферической резистентности эритроцита составляет 0,32–0,44 процента раствора натрия хлорида.

Норма для взрослого человека следующая:

• максимальная устойчивость — норма 0,32–0,34 %;
• минимальная осмотическая резистентность эритроцитов — 0,46–0,48 %.

Если норма не соблюдается, то есть показатели выше или ниже, это может свидетельствовать о развитии определенного патологического процесса в организме. Даже незначительное отклонение от нормы может указывать на довольно тяжелые патологические процессы в организме, поэтому осмотическое давление нужно обязательно контролировать.

Норма показателей может нарушаться вследствие определенных заболеваний как острого, так и хронического типа. Максимальные показатели резистентности могут наблюдаться в следующих случаях:

• атеросклероз;
• злокачественные новообразования в желудочно-кишечном тракте;
• талассемия;
• полицитемия, но только в некоторых случаях;
• спленэктомия;
• гемоглобинопатия;
• гемоглобиноз;
• застойная желтуха;
• врожденные заболевания крови;
• системные и аутоиммунные патологии.

Минимальная осмотическая резистентность может быть следствием таких патологических процессов:

• железодефицитная анемия;
• гемолитическая анемия у новорожденных;
• отравление тяжелыми металлами;
• обширная интоксикация организма;
• наследственная форма гемолитической анемии.

Небольшое отклонение от нормы может быть обусловлено такими заболеваниями:

Предрасполагающие факторы для снижения устойчивости ККТ:

• выработка шарообразных эритроцитов — генетическое отклонение;
• завершение жизненного цикла ККТ, что приводит к шарообразной форме;
• сердечно-сосудистые заболевания.

Определить, что именно привело к такому нарушению, можно только путем диагностических мероприятий. Поводом для начала обследования будет соответствующая клиническая картина.

Клиническая картина будет носить общий характер. Специфических симптомов, которые будут характерны только отклонению от нормы резистентности ККТ, нет.

Может присутствовать симптоматика такого характера:

• бледность кожных покровов;
• снижение веса без видимой причины;
• повышенная утомляемость и нарастающая слабость, что будет больше похоже на синдром хронической усталости;
• плохой аппетит;
• сонливость;
• обострение хронических заболеваний.

При наличии клинической картины нужно обращаться к врачу. Первоначально это врач общей практики, то есть терапевт. Далее обследованием занимаются гематолог и смежные специалисты.

Если диагностически будет установлено, что показатели ниже или выше допустимых, в обязательном порядке нужно проходить лечение, так как большая часть этиологических факторов представляет опасность не только для здоровья, но и для жизни пациента.

Лечение будет полностью основываться на первопричинной патологии. Терапевтические мероприятия могут быть как консервативными, так и радикальными. Прогноз носит исключительно индивидуальный характер.

источник

Главная задача эритроцитов – это транспортировка кислорода в ткани и вывод их них углекислого газа. Для этого их мембраны должны обладать прочностью и эластичностью, что крайне важно при поддержании необходимого уровня объемного гомеостаза. Лабораторный метод исследования стойкости мембраны позволяет определить степень сопротивления стенки красной кровяной клетки при искусственной смене давления осмоса.

Осмотическая резистентность эритроцитов характеризует их устойчивость относительно деструктивных факторов: химических, температурных, механических. При лабораторных опытах особое внимание уделяется их стойкости к гипотоническим р-рам NaCl, а именно, какая концентрация вызывает гемолиз. Нормально функционирующие клетки сопротивляются осмосу и сохранят прочность. Такая способность характеризует осмотическую устойчивость, или резистентность эритроцитов.

Если они становятся слабыми, то маркируются иммунной системой, после чего удаляются из организма.

Основной лабораторный метод определения стойкости эритроцитов к разрушению – это реакция гипотонического солевого раствора и крови, смешанного в одинаковых объемах. Анализ позволяет выявить стабильность мембраны клетки. Альтернативный метод определения ОРЭ – фотоколориметрический, при котором измерения производят специальным аппаратом – фотоколориметром.

Физраствор представляет собой смесь дистиллированной воды и хлорида натрия. В растворе с концентрацией 0,85% эритроциты не разрушаются, его называют изотоническим. При более высокой концентрации получится гипертонический, а ниже – гипотонический раствор.

Определение ОРЭ проводится добавлением равного количества крови (обычно 0,22 мл) в гипотонический раствор NaCl различных концентраций (0,7-0,22%). После часа выдержки смесь центрифугируют. В зависимости от цвета устанавливают начало распада и полный гемолиз. В начале процесса раствор имеет слегка розовый цвет, а ярко красный свидетельствует о полном распаде эритроцитов. Результат выражается в двух характеристиках резистентности, имеющих процентное выражение – минимальной и максимальной.

При наличии вторичной гемолитической анемии при дефиците глюклзо-6-фосфатдигидрогеназы, анализ может показать нормальную ОРЭ, что обязательно учитывают перед проведением исследования

Норма резистентности для взрослого человека независимо от пола является следующей (%):

1. Максимальная – 0,34-0,32.
2. Минимальная – 0,48-0,46.

В детском возрасте до 2 лет осмотическая устойчивость несколько выше нормального показателя, а норма ОРЭ у пожилых людей, как правило, ниже от стандартного минимального показателя.

Анна Поняева. Закончила нижегородскую медицинскую академию (2007-2014) и Ординатуру по клинико-лабораторной диагностике (2014-2016).Задать вопрос>>

Резистентность и прочность мембран эритроцитов находятся в зависимости от наследственных заболеваний или особенностей патологии.

Причинами роста или падения ОРЭ выступают следующие факторы:

1. Повышение стойкости эритроцитов наблюдается при механической желтухе, когда на них оседают холестериновые отложения, приобретенном или наследственном сфероцитозе, стомацитодозе, различных формах гемоглобиноза.
2. Значительная кровопотеря способствует перенасыщению крови незрелыми эритроцитами и истончению их мембран. Эти же признаки характерны при наличии онкогематологии, железодефицитной анемии, иммуносекретирующих опухолей и гемоглобинопатий.

Отдельные сердечно-сосудистые болезни вызывают насыщение крови уплощенными эритроцитами, имеющими небольшой индекс сферичности, а некоторые наследственные заболевания – клетками, имеющими чрезмерно шарообразную форму. Клетки с подобными аномалиями характерны плохой резистентностью.

Причины снижения ОРЭ:

1. Сердечная недостаточность, вызывающая набухание до приобретения клетками сферической формы.
2. Генетически обусловленная аномалия, когда в крови находятся шарообразные эритроциты.
3. При старении эритроцитов и на последних этапах их жизненного цикла. В этот период клетки становятся округлыми, а проницаемость стенок заметно возрастает.

Нарушение ОРЭ сопровождается следующими симптомами:

1. Упадком сил.
2. Отсутствием аппетита.
3. Быстрой общей усталостью.
4. Падением веса тела.
5. Постоянной сонливостью.
6. Бледностью слизистых.
7. Значительным повышением температуры.

При падении устойчивости, эритроциты помечаются системой иммунитета (маркерами), и выводятся из организма селезенкой. При этом печень не успевает нейтрализовать выделившийся при разрушении клеток билирубин, в результате развивается гемолиз. При развитии такого процесса анализ крови показывает недостаток красных клеток, а организм испытывает дефицит кислорода.

При обнаружении нарушения ОРЭ, проводятся дополнительные исследования с целью выявления причины расстройства. Если патология имеет не наследственную природу, то после устранения ее причины свойства эритроцитов возвращаются в пределы нормы. Так, при анемиях проводится кортикостероидная терапия, при гемолизе назначают фолиевую кислоту, железосодержащие препараты и витамины.

При частых рецидивах заболевания возможно проведение сплеэктомии.

Наследственный сфероцитоз нельзя предупредить, но пациенты, страдающие данной патологией, могут обратиться к генетику, чтобы провести анализ по обнаружению дефектного гена, способного передать болезнь их детям. Профилактика наследственной формы болезни сводится к терапевтическим мерам при наступлении криза. В остальных случаях профилактические меры заключаются в обеспечении оптимальных условий для нормального кроветворения при помощи правильного питания, витаминотерапии и здорового образа жизни.

Форму эритроцитов определяют сопоставлением размеров: диаметра и толщины, что выражают индексом сферичности. Для нормальных клеток он находится в пределах 0,27-0,28, а значительные отличия от нормы наблюдаются при отклонениях, обусловленных наследственностью, когда эритроциты имеют шарообразную форму, что значительно снижает их резистентность.

Что касается возраста красных кровяных клеток, то самыми резистентными являются эритроциты, только вышедшие из кроветворных органов, а самую высокую стойкость имеют молодые клетки плоской формы, имеющие незначительный индекс сферичности. Красные клетки, завершающие жизненный цикл, приобретают округлую форму, и имеют устойчивость 0,4-0,6% с нормой 0,32-0,44%.

Принято отмечать верхнюю и нижнюю границу резистентности. Нижняя соответствует такой концентрации гипотонического р-ра, когда распадаются самые неустойчивые эритроциты, а верхняя – концентрации, при которой за 3 часа подвергаются гемолизу все клетки. В процентном выражении верхняя норма равна 0,34-0,32%, а нижняя 0,48-0,46%.

Падение показателя менее 0,32% происходит из-за больших кровопотерь, при застойной желтухе, талассемии, гемоглобинопатии, после удаления селезенки, отдельных заболеваниях полицитемией, гемоглобинозе С. Повышение значения более 0,48% возможно при гемолитической анемии младенцев, семейной гемолитической анемии, а также при интоксикации свинцом. Расширение границы ОРЭ происходит при обострении пернициозной анемии и при остром начинающемся гемолитическом кризе.

Осмотическая резистентность эритроцитов характеризует стойкость оболочки красных кровяных клеток к деструктивным факторам. Здоровые эритроциты имеют максимальную устойчивость после выхода из органов кроветворения, а минимальную по окончании цикла жизни, после чего маркируются иммунной системой и утилизируются в селезенке. Главный метод определения ОРЭ – взаимодействие гипотонических растворов NaCl с кровью.

Анализ позволяет определить стабильность мембраны эритроцита и границы резистентности.

источник

Красные кровяные тельца (или эритроциты) — наиболее многочисленные клетки крови. Особое устройство мембраны позволяет им захватывать молекулы кислорода в капиллярах легких и транспортировать его к тканям и органам. Однако при определенных патологиях структура оболочки эритроцитов становится менее устойчивой и легко разрушается. Такие изменения приводят к значительному уменьшению количества красных телец в крови и последующему нарушению кислородного обмена в тканях организма.

Способность мембран красных клеток крови противостоять разрушению под воздействием неблагоприятных факторов получила название резистентность. Особое значение при диагностике заболеваний имеет осмотическая резистентность (ОРЭ) — сохранение устойчивости оболочки клетки в условиях изменения концентрации растворенных солей в окружающей ее среде.

Клетки крови способны нормально функционировать в изотоническом растворе (содержание ионов NaCl не превышает 0,85%). Такая концентрация NaCl соответствует количеству ионов соли в сыворотке крови. Те растворы, которые содержат большее количество солей, называются гипертоническими, а меньшее — гипотонические. Мембраны клеток, помещенных в такие растворы, быстро разрушаются.

Эритроциты здорового человека способны выдерживать изменения осмотического давления, то есть обладать прочной оболочкой. Для определения стойкости мембран клеток крови используют следующую методику:

1. В пробирки помещается раствор NaCl c разной степенью концентрации (начиная от самой большой — 0,7%, до наименьшей — 0,22%);
2. В каждую пробирку добавляется небольшое количество крови (не более 0,02 мл);
3. В течение следующего часа пробирки держат при температуре в 22-23°C;
4. Полученные растворы центрифугируют и по цвету содержимого высчитывают примерное время начала разрушения клеток крови и момент их полного гемолиза;

Чуть розовый раствор свидетельствует о том, что эритроциты только начали разрушаться, тогда как ярко-красный цвет — знак того, что произошел полный распад клеток.

При помощи этого анализа определяют минимальную и максимальную осмотическую резистентность кровяных телец. Максимальная соответствует тому значению содержания NaCl, при котором происходит полное разрушение клеток крови. Минимальная же определяется тем количеством, при котором клетки разрушаются меньше всего.

Расчет значений осмотической резистентности позволит определить причину нехватки эритроцитов в крови пациента. Для проведения анализа кровь берется из вены и сразу же помещается в пробирку с антикоагулянтом, чтобы избежать ее свертывания. В каких-либо особых приготовлениях перед сдачей анализа нет необходимости — пациент может не менять привычный ему режим питания.

Для взрослого человека нормальными показателями являются следующие значения:

• минимальная резистентность — не выше 0,48%;
• максимальная — не ниже 0,32%

Следует помнить, что у маленьких детей показатели устойчивости значительно выше, чем у взрослых пациентов, в то время как у пожилых — немного ниже нормы.

Существует несколько факторов, которые могут повлиять на достоверность данных анализа:

• недавнее переливание крови;
• присутствие во взятом образце патогенных микроорганизмов, которые вызывают гемолиз клеток;
• некоторые заболевания, при которых количество зрелых эритроцитов в крови минимально (тяжелые формы анемии);
• наконец, человеческий фактор — неосторожное обращение с наполненными пробирками может привезти к преждевременному гемолизу;

Если вышеперечисленные причины отсутствовали, а результат анализа выходит за пределы нормы, то можно говорить о серьезном заболевании, за которым последуют значительные нарушения обмена веществ в организме.

ОРЭ менее 0,33% развивается в следующих ситуациях:

• значительные кровопотери;
• при талассемии (наследуемое заболевание, при котором нарушен синтез белков, входящих в состав гемоглобина);
• при спленэктомии (удалении части селезенки — органа, активно участвующем в процессах кроветворения);
• при полицитемии (нарушение функций кроветворных клеток костного мозга);

Резистентность более 0,48% связана с такими заболеваниями как:

• наследственная гемолитическая анемия (передающаяся по наследству патология, при которой организм активно разрушает свои же клетки крови);
• гемолитическая анемия новорожденных (диагностируется в течение первых дней жизни младенца. Может быть как наследственной, так и приобретенной);
• отравление солями тяжелых металлов;

Как правило, отклонения от нормальных показателей резистентности сигнализируют о сбоях в работе организма, причем чаще всего диагностируемые патологии носят наследственный характер.

Как правило, причиной снижения резистентности клеток становятся наследственные заболевания. Пациенты, столкнувшиеся с такой проблемой, могут обратиться к генетику, чтобы рассчитать возможность появления такого же заболевания у их детей. В остальных случаях профилактика снижения плотности мембраны клеток крови сводится к ведению здорового образа жизни, отсутствию вредных привычек, созданию наиболее благоприятных условий для процесса кроветворения.

Еще до проведения анализа, пациент может найти у себя признаки снижения устойчивости мембран кровяных телец. Вот основные проявления подобного отклонения:

• Сонливость;
• Угнетенное состояние;
• Значительное снижение массы тела;
• Анемичность слизистых оболочек;
• Повышенная температура тела;
• Отсутствие интереса к еде;

Перечисленные симптомы должны стать серьезным поводом для беспокойства. При их обнаружении следует немедленно записаться на прием к врачу и пройти полное обследование. Чем раньше будет поставлен диагноз, тем быстрее можно будет начать лечение и тем меньший вред будет нанесен организму.

Плотность мембраны зависит не только от возраста клеток, но и от их формы. Сформировавшийся эритроцит приобретает вид двояковогнутого диска, однако также могут встречаться и дегенеративные формы эритроцитов: сферические, звездчатые, полулунные, серповидные и т.д. Для разных заболеваний характерны свои изменения клеток крови. К примеру, при серповидно-клеточной анемии развиваются серповидные эритроциты, талассемия характеризуется появлением овальных клеток, большинство видов анемий проявляют себя появлением сфероцитов — эритроцитов сферической формы.

Нормальную устойчивость мембраны имеют лишь эритроциты в форме двояковогнутого диска. Красные клетки крови другой конфигурации менее жизнеспособны — их резистентность составляет 0,4-0,6% при обычных показателях в 0,32-0,48%. Кроме того, такие клетки, как правило, не способны качественно выполнять свои функции. Из патологических форм чаще всего встречаются овальные эритроциты. Такие клетки можно наблюдать не только при болезнях крови, но и у полностью здоровых людей, поскольку, чем старше становятся эритроциты, тем более округлыми они становятся.

Таким образом, наиболее устойчивыми клетками являются молодые, недавно сформировавшиеся эритроциты, отличающиеся наиболее выраженной дисковидной формой.

Методика расчета осмотической устойчивости нередко применяется при обнаружении гемоглобинопатии и прочих заболеваний крови и отличается эффективностью и простотой. Наиболее часто его применяют для обнаружения гемолитической анемии и онкогематологии (в том числе и у новорожденных).

источник

Нормальная максимальная осмотическая резистентность эритроцитов составляет 0,34— 0,32 %, а минимальная — 0,48—0,46 %.

Под осмотической резистентностью эритроцитов понимается их устойчивость по от­ношению к гипотоническим растворам натрия хлорида. Минимальная резистентность

эритроцитов определяется максимальной концентрацией гипотонического раствора натрия хлорида (в серии растворов с постепенно уменьшающейся концентрацией), при которой начинается гемолиз наименее устойчивых эритроцитов, находящихся в растворе в течение 3 ч; максимальная — минимальной концентрацией гипотонического раствора натрия хло­рида, вызывающего в течение 3 ч гемолиз всех эритроцитов крови, помещенных в этот раствор.

Максимальная осмотическая резистентность ниже 0,32 % возможна после больших кро-вопотерь и спленэктомии, при гемоглобинозе С, застойных желтухах, а также в некоторых случаях полицитемии. Повышение осмотической резистентности эритроцитов ниже 0,32 % характерно для талассемии и гемоглобинопатии.

Минимальная осмотическая резистентность выше 0,48 % наблюдается при семейной ге­молитической анемии, гемолитической анемии новорожденных и отравлении свинцом. Можно обнаружить небольшие изменения и при токсикозах, бронхопневмониях, туберкуле­зе, малярии, лейкемии, миелосклерозах, лимфогранулематозе, циррозе печени. Случаи рас­ширения границ осмотической резистентности (одновременное понижение минимальной и повышение максимальной резистентности) наблюдаются в начале острого гемолитического криза и в остром периоде пернициозной анемии.

Кислотная резистентность эритроцитов (проба Хема)

В норме проба Хема отрицательная.

Кислотную резистентность определяют на основании различной кислотоустойчивости эритроцитов по отношению к НС1.

При анемии Маркиафавы и некоторых других гемолитических анемиях в подкисленной пробирке по сравнению с контролем обнаруживают ясный гемолиз.

В норме проба на серповидность эритроцитов отрицательная.

Пробу применяют для диагностики гемоглобинопатии. Гемоглобин S при понижении парциального давления кислорода кристаллизуется в форме тактоидов и придает эритроцитам форму серпа. Среди гемоглобинопатии чаще всего встречается серповидно-клеточная анемия, поэтому выявление эритроцитов в виде серпа позволяет установить этот вид анемии.

Эритроцитометрия — измерение диаметра эритроцитов. В процентном отношении диа­метры эритроцитов у здоровых людей распределяются следующим образом: 5 мкм — 0,4 % всех эритроцитов; 6 мкм — 4 %; 7 мкм — 39 %; 8 мкм — 54 %; 9 мкм — 2,5 %. Графическое изображение соотношения содержания в крови эритроцитов с различными диаметрами на­зывают эритроцитометрической кривой Прайс-Джонса, где по оси абсцисс откладывают ве­личину диаметра эритроцитов (мкм), а по оси ординат — проценты эритроцитов соответст­вующей величины. В норме эритроцитометрическая кривая имеет правильную, с довольно узким основанием, почти симметричную форму (рис. 1.1).

Результаты эритроцитометрии важны для уточнения характера анемии. При железоде-фицитной анемии, как правило, возможны микроцитоз эритроцитов до 30—50 % всех эрит­роцитов и соответственно сдвиг эритроцитометрической кривой влево. Увеличение процен­та микроцитов наблюдается также при наследственном микросфероцитозе, талассемии, свинцовом отравлении. При микроцитозе и сфероцитозе эритроцитометрическая кривая растянута и неправильна, сдвинута влево, в сторону меньших диаметров.

Увеличение числа макроцитов является признаком макроцитарной анемии, наблюдаю­щейся при В,₂-дефицитных и фолиеводефицитных состояниях, при которых их содержание может достигать 50 % и более, при этом в небольшом числе (1—3 %) находят и мегалоциты (эритроциты с диаметром 12 мкм и более). При этих формах анемии эритроцитометрическая кривая имеет неправильную пологую форму с широким основанием и сдвинута вправо, т.е. в сторону больших диаметров. Макроцитоз эритроцитов может наблюдаться независимо от анемии при алкоголизме, диффузных поражениях печени.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Рис. 1.1. Эритроцитометрическая кривая Прайс-Джонса в норме.

Гистограмма распределения эритроцитов по объему, получаемая с помощью современ­ных гематологических анализаторов, по сравнению с такой же по диаметру (кривая Прайс-Джонса) имеет ряд особенностей [Титов В.Н., Наумова И.Н., 1995]. Коэффициент вариации в 3 раза выше при определении объема, чем при определении диаметра. Если кривая распре­деления диаметров эритроцитов симметрична, то распределение клеток по объему будет иметь сдвиг вправо, пропорционально коэффициенту вариации. Если кривая распределения диаметров полимодальна (имеет несколько пиков), то гистограмма распределения эритроци­тов по объему может оказаться унимодальной (одновариантной), что является недостатком автоматизированного метода.

источник

Анализ на осмотическую резистентность эритроцитов практически никогда не назначается врачом — терапевтом, кардиологом, гастроэнтерологом. А вот врач-гематолог, который занимается диагностикой и лечением заболеваний крови, выписывает Пациенту направление на этот анализ довольно часто. Что это за исследование? Для чего оно проводится, и какие значения определяются у здорового человека?

Чтобы выяснить это, следует вспомнить, что такое эритроциты, что такое резистентность, и какое отношение она имеет к осмосу. Прежде всего, следует заменить красивое слово «резистентность» его синонимом: устойчивость. Поэтому речь пойдет о феномене осмотической устойчивости эритроцитов.

Известно, что эритроциты, или красные кровяные тельца — это главные клетки нашей крови, которые выполняют функцию обеспечения тканевого дыхания. Эритроциты переносят из лёгких кислород в органы и ткани, и забирают из них отработанный углекислый газ, который вновь несут в лёгкие для второй фазы газообмена. Эритроциты никогда не отдыхают. Они ежесекундно производятся в огромных количествах в красном костном мозге, и сразу же включаются в работу. Они постоянно находятся в кровотоке, из крупных сосудов они постепенно перемещаются во всё более мелкие, затем попадают в капилляры. Капилляры настолько узкие, что эритроциты с трудом через них протискиваются.

Для того, чтобы выполнить свою функцию наилучшим образом, эритроциты лишены всех внутренних структур, которые могут помешать размещению в них молекул гемоглобина. Для этого из эритроцитов удаляются ядра, и такие молодые красные кровяные тельца, в которых ещё остались следы ядерных структур, называются ретикулоцитами. Обычно ретикулоциты не попадают в кровоток, или имеются в нём в незначительном количестве. Для того чтобы увеличить площадь эритроцита, и, следовательно, площадь газообмена, эти клетки напоминают по форме двояковогнутые диски. Это очень мудрый ход природы. Если бы они были выпуклыми, они бы при той же площади занимали больший объём, и не могли бы проходить через узкое пространство капилляров.

Каждая эритроцит живет примерно 120 дней, или четыре месяца, и затем разрушается в селезенке. Это значит, что в течение 4 месяцев полностью обновляется весь объем крови, который для взрослого человека составляет более 5 л. Говоря иными словами, ежедневно обновляется около 40 миллилитров крови, в расчёте на красные кровяные тельца. Каждый час красный костный мозг производит около 2 мл крови. А это значит, что каждую секунду красный костный мозг выпускает более 2 миллионов красных кровяных телец, и столько же их разрушается в органе РЭС, или ретикулоэндотелиальной системы. Главным органом РЭС является селезенка.

Как видно из вышеприведенных фактов, на эритроциты постоянно приходится большая нагрузка. И главным структурным компонентом этих клеток, который позволяет выдерживать все нагрузки, является мембрана эритроцитов. Но мембрана испытывает не только физические воздействия в кровотоке, трение о стенки кровеносных сосудов и так далее. Мембрана очень четко реагирует на изменение концентрации поваренной соли, или хлорида натрия в плазме крови.

Известно, что среди всех растворов, которые вводятся внутривенно во всех больницах мира, первое место по объемам занимает стерильный раствор хлорида натрия, который называется изотоническим. Его концентрация — 0,9%, или, точнее — 0,85%. Понятие «изотонический» означает, что раствор этой крепости имеет точно такую же солёность, как и плазма крови, внутренняя среда нашего организма. Для сравнения, обычная морская вода значительно солонее крови: в ней содержится вчетверо больше соли (3,47%).

Именно для такой концентрации поваренной соли и «рассчитана» устойчивость мембран всех клеточных структур, в том числе — и эритроцитов. Но что будет, если с целью эксперимента красные кровяные тельца лишить этой комфортной, физиологической солености и начать ее изменять? Что будет, если помещать красные кровяные тельца в раствор с уменьшающейся концентрацией соли, или, наоборот, с увеличивающейся? Это и будет проверкой на осмотическую стойкость, или резистентность эритроцитов.

Представим, что у нас есть сосуд, разделённый пополам особой плёнкой, который является проницаемой. Если в обеих половинах сосуда находится раствор соли одной и той же концентрации, то ничего происходить не будет, точно так же, как и при одинаковом уровне воды в сообщающихся сосудах: это состояние устойчивого осмотического равновесия. Равенство концентраций вызывает состояние осмотического покоя.

А теперь представим себе, что в одну половину сосуда налита дистиллированная вода без всяких примесей: абсолютно пресная и несоленая. А во второй половине сосуда — концентрированный раствор поваренной соли. Теперь в действие сам собой приходит осмотический насос. Поскольку мембрана является проницаемой, то природа стремится выровнять эти концентрации. А это значит, что молекулы воды устремятся через мембрану из пресной части в соленую. Этот процесс будет происходить до тех пор, пока концентрации не станут одинаковыми по обе стороны мембраны.

Энергия осмоса может использоваться, и уже используется в практических целях. Существует единственная в мире осмотическая электростанция в Норвегии, которая черпает энергию за счёт разной концентрации соли в морской и пресной воде. В результате развивается избыточное давление, который вращает турбину и вырабатывает электроэнергию. Пока мощность этой осмотической электростанции незначительна, и вырабатывает она не более 4 кВт-часов, но зато это непрерывный, возобновляемый источник практически неисчерпаемой энергии, и при этом электростанция не загрязняет окружающую среду.

Примерно такой же процесс происходит во время хранения банки с солёными помидорами. Все знают, что в банку хозяйка складывает помидоры гладкие, с ровной и тугой кожицей. А вот через несколько месяцев, после того как помидоры подают к новогоднему столу, их кожица будет сморщенной, зато рассол приобретает приятный вкус и аромат. Почему это произошло? Просто потому, что кожица помидора — это и есть та самая проницаемая мембрана. Помидоры потому и сморщились, что из них более пресный помидорный сок вышел в рассол и насытил его. А теперь представим, что вместо помидоров — эритроциты.

Вернемся к эритроцитам. Что будет, если взять кровь в пробирке и долить в нее дистиллированной воды? Тогда произойдет обратный процесс. Внутри эритроцитов такая же среда, как в организме, 0,85% хлорида натрия. Снаружи, в дистиллированной воде — 0%. Поэтому дистиллированная вода очень быстро поступает внутрь эритроцитов, чтобы выровнять концентрацию внутри и снаружи.

Клетки постепенно раздуваются, поглощая воду, становятся шарообразными, и, наконец, лопаются. Происходит так называемый гемолиз, и кровь становится прозрачной. Эритроцитов там уже нет. Все их мембраны разрушены, и пигмент гемоглобин растворен в воде. Такая кровь называется «лаковой», так как очень напоминает красноватый лак.

Если поместить эритроциты в гипертонический раствор, то он, напротив, будет высасывать из них всю воду, и они, в конце концов, сморщатся, как те самые помидоры. Все мы знаем, что гипертонические повязки с раствором крепкой поваренной соли, будучи положены на гнойные раны, способствуют их очищению, поскольку забирают всё раневое отделяемое, а полоскания воспаленных и рыхлых миндалин при ангинах соленой водой уменьшают отек и боль. Вот на таких простых принципах и построен этот анализ.

Осмотическая резистентность эритроцитов — это та предельно низкая концентрация в крови поваренной соли, при которой клетки крови ещё не разрушаются. Если чуть-чуть уменьшить эту концентрацию, то все клетки лопаются, и происходит гемолиз. Если осмотическая резистентность эритроцитов высокая, то тогда гемолиз произойдет, когда концентрация соли в диагностическом растворе будет достаточно низкой: мембраны клеток здоровы и упорно сопротивляются разведению.

Если же резистентность эритроцитов плохая, то уже незначительное уменьшение концентрации поваренной соли в растворе вызовет их разрушение. Отсюда можно сделать простой, но важный вывод. Если клеточная мембрана эритроцитов является дефектной, синтезированной «с браком», то тогда резистентность будет ниже, чем у здоровых клеток крови. А это значит, что этот простой анализ позволяет если не определить, то заподозрить наследственные заболевания крови, например, различные виды гемолитических анемий, талассемии, и других болезни.

Каковы же нормальные значения? Какова норма осмотической резистентности эритроцитов?

Итак, в пробирку с кровью добавляют гепарин, чтобы кровь не свернулась раньше времени, и начинают эксперимент. Взятый образец крови делят на части, и добавляют его в пробирки с заранее известной концентрации хлорида натрия.

Какова максимальная и минимальная резистентость эритроцитов в норме? В норме эритроциты полностью устойчивы в диапазоне от нормы, то есть от 0,85% NaCl, и до 0,5%, или до концентрации 5 г поваренной соли на литр. Уже при достижении 0,5% начинается гемолиз эритроцитов, и он продолжается до разведения 0,3%. После того, как соленость крови разведена до 0,3%, вся кровь полностью становится лаковой. Все клетки разрушены.

Если же у пациента с подозрением на гемолитическую анемию гемолиз начинается при более высоких концентрациях, например, на уровне 0,7%, то это — верный признак некачественных мембран эритроцитов. Этот феномен может быть при болезни Минковского-Шоффара, наследственных гемолитических анемиях, некоторых аутоиммунных заболеваниях.

Таким образом, определение осмотической резистентности эритроцитов — это простой, дешевый и одновременно очень информативный анализ. Если резистентность низкая, то врач — гематолог начинает прицельный поиск наследственных гемоглобинопатий, талассемий, наследственных гемолитических анемий, и других заболеваний.

источник

Под резистентностью эритроцитов понимают их устойчивость к различным разрушающим факторам: механическим, тепловым и другим. Особое значение в лабораторных исследованиях имеет осмотическая резистентность эритроцитов, то есть устойчивость к гипотоническим растворам NaCl разной концентрации. С помощью специального теста определяют, при какой концентрации хлорида натрия начинается распад красных кровяных телец (гемолиз).

Эритроциты для нормального функционирования должны сопротивляться осмотическому давлению, то есть должны быть прочными. Способность к сопротивлению и называется осмотической устойчивостью, или резистентностью. Если красные тельца становятся слабыми, иммунная система их маркирует как отработанный материал и удаляет из организма.

Физраствор – это дистиллированная вода с растворенной в ней поваренной солью. Физиологический раствор с концентрацией 0,85 процентов называют изотоническим. В нем разрушения эритроцитов не происходит.

Если концентрация соли ниже, раствор называют гипотоническим, если выше – гипертоническим. При помещении в такие растворы эритроциты начинают разрушаться. В гипертоническом, или гиперосмотическом, они теряют воду и сморщиваются. В гипотоническом, или гипоосмотическом, они поглощают воду и набухают.

Чтобы провести пробы на осмотическую резистентность эритроцитов, в пробирки помещают гипотонический раствор NaCl разной концентрации (от 0,7 % до 0,22%). В каждую пробирку добавляют одинаковое количество крови, как правило – 0, 02 мл. В течение часа держат при комнатной температуре, после чего центрифугируют и по цвету раствора определяют начало разрушения эритроцитов и полный гемолиз. Если раствор слегка порозовел, это говорит о начале разрушения. При полном распаде раствор приобретает ярко-красный цвет.

В результате получают два параметра – максимальную и минимальную резистентность, которая выражается в процентах.

Для взрослых людей нормой считается:

• максимальная резистентность – от 0,34% до 0,32%;
• минимальная – от 0,48% до 0,46%.

У детей до двух лет осмотическая устойчивость в норме выше, чем у более старших. У пожилых людей – немного ниже нормы.

Причин отклонения от нормы много. Максимальная резистентность (ниже 0,32%) наблюдается при:

• талассемии;
• некоторых случаях полицитемии;
• гемоглобинопатии;
• спленэктомии;
• массивных кровотечениях;
• застойной желтухе;
• гемоглобинозе;
• атеросклерозе;
• злокачественных опухолях ЖКТ.

Минимальная осмотическая стойкость (выше 0,48%) связана:

• с гемолитической анемией новорожденных;
• с отравлением свинцом;
• с гемолитической анемией наследственной.

Незначительное снижение может происходить при следующих состояниях:

• туберкулезе;
• лейкозе;
• циррозе печени;
• некоторых случаях полицитемии.

К причинам снижения осмотической резистентности также можно отнести:

• присутствие в крови шарообразных эритроцитов, что обусловлено генетически;
• сердечную недостаточность, при которой красные клетки набухают, принимают сферическую форму, что сокращает их продолжительность жизни;
• старение эритроцитов, завершающий этап их жизни, во время которого они приобретают шарообразную форму, при этом проницаемость их стенок значительно увеличивается.

Симптомы такого отклонения бывают следующими:

• повышение температуры тела, иногда до высоких значений;
• быстрая утомляемость;
• плохой аппетит;
• общая слабость;
• бледность слизистых оболочек;
• снижение веса;
• сонливость.

Осмотическая стойкость зависит от формы и возраста клеток. В норме эритроциты имеют невысокий индекс сферичности, но в крови могут присутствовать элементы шарообразной формы, которые отличаются более низкой устойчивостью к разрушению. При такой форме значительно снижается резистентность, которая в этом случае составляет 0,4-0,6 % при норме 0,32-0,44. Сферическая форма может быть наследственно обусловлена. Кроме того, она наблюдается у клеток, которые завершают свой жизненный цикл.

Таким образом, можно сделать вывод о том, что более резистентные – это молодые красные тельца, появляющиеся в крови после выхода из костного мозга и имеющие небольшой индекс сферичности.

источник

Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ)

Если кровь предохранить от свертывания (гемокоагуляция) и оставить на некоторое время в сосуде, то с течением времени в силу тяжести эритроциты осядут.

СОЭ характерна для каждого вида, пола, возраста животных (очень медленно СОЭ идет у крупного рогатого скота, овец и коз, умеренно быстро у свиней, очень быстро у лошадей) и зависит от состояния организма. При некоторых физиологических состояниях (например, беременность), аллергиях и при целом ряде заболеваний (туберкулез, анемия, гнойное воспаление и др.) СОЭ ускоряется. Поэтому определение СОЭ имеет важное диагностическое значение.

СОЭ зависит от скорости склеивания (агглютинации) эритроцитов. При этом образуются так называемые «монетные столбики». Агглютинация эритроцитов зависит от изменения отрицательного заряда (вследствие чего они отталкиваются друг от друга) на положительный. Электроположительный заряд сообщается эритроцитам за счет адсорбции (поглощения) на их поверхности грубодисперсных белков-глобулинов.

Капилляр промывают 5% раствором цитрата (лимоннокислый натрий). Затем набирают цитрат до метки Р и выдувают его в чашку Петри. Затем, в этот же капилляр, двукратно набирают кровь животного до метки К. Обе порции крови смешивают с имеющимся в чашке Петри цитратом. Полученную смесь крови с цитратом (в соотношений 4:1) набирают в капилляр до метки О и ставят капилляр в штатив. Через час смотрят какова высота в миллиметрах образовавшегося верхнего столбика плазмы в капилляре. Его величина и является мерой СОЭ.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)

Крупный рогатый скот – 0,5-1,5; овцы, козы – 0,5-1; кролики – 1-2; куры – 2-3; собаки – 2-6; свиньи – 2-9; лошади – 40-70 мм/ч. Человек: мужчины – 3-9, женщины 7-12, новорожденные – 0,5, беременные – 45мм/ч.

Воспроизведение гемолиза

Гемолиз –выход гемоглобина из эритроцитов через измененную оболочку в плазму. Гемолиз может происходить как в сосудистом русле, так и вне организма.

1. Вне организма гемолиз может быть вызван гипотоническими растворами – осмотический гемолиз.

Изотонический (физиологический) раствор – раствор хлористого натрия (0,85-0,9% раствор NaСl), имеющий осмотическое давление, одинаковое с осмотическим давлением крови.

Эритроцит + физиологический раствор → эритроцит

Гипертонический раствор – раствор с более высоким осмотическим давлением, чем давление крови.

Эритроцит + гипертонический раствор→сморщивание

Гипотонический раствор – раствор с более низким осмотическим давлением, чем давление крови.

Эритроцит + гипотонический раствор→эритроцит разбухает, оболочка разрушается, гемоглобин выходит в раствор

2. Механический гемолиз. Наблюдается при резком встряхивании, перемешивании крови.

3. Химический гемолиз. Возникает при действия кислот, щелочей, эфира, хлороформа. спирта, гемолизинов, которые вызывают денатурацию (свертывание) белков, разрушение липидов и нарушение целостной оболочки эритроцита.

4. Физический гемолиз. Низкая температура вызывает разрушение эритроцитов. Высокая — денатурацию белков оболочки эритроцитов.

5. Биологический гемолиз. Возникает при укусах ядовитых змей, скорпионов, множественных укусах пчел, при малярии, переливании несовместимой крови. В здоровом организме сосудистый гемолиз происходит лишь в печени, селезенке, красном костном мозге. Такой гемолиз не сопровождается появлением гемоглобина в плазме циркулирующей крови, Биологический гемолиз вызывает появление гемоглобина в плазме крови (гемоглобинемия) и выделение его с мочой (гемоглобинурия).

В штатив ставят три пробирки: в 1-ю наливают 2 мл физ.раствора, во 2-ю — 2 мл физ.раствора и 5 капель нашатырного спирта, в 3-ю — 2 мл дистиллированной воды. Затем каждую пробирку добавляют по 2 капли крови и, слегка встряхивая пробирки, перемешивают их содержимое. При наличии гемолиза раствор в пробирке становится прозрачным с «лаковым» оттенком.

Определение осмотической резистентности эритроцитов

Осмотическая резистентность эритроцитов — свойство их противостоять разрушительному воздействию неблагоприятных факторов (физических, химических, механических и др.).

Сущность метода определения осмотической резистентностью эритроцитов заключается в определении устойчивости их к действию гипотонических растворов хлористого натрия. Осмотическая резистентность эритроцитов определяется той концентрацией раствора, при которой еще не наступает гемолиз.

1 2 3 4 5 1% раствор NaCl, мл 1 3 5 7 9 Дистиллированная вода, мл 9 7 5 3 1 Всего, мл 10 10 10 10 10 Концентрация NaCl, % 0,1 0,3 0,5 0,7 0,9