Правила транспортировки крови на анализ

Согласно Приложению к приказу МЗ РФ №193 от 07.05.03г. «О внедрении в практику работы службы крови в РФ метода карантинизации свежезамороженной плазмы» возможны следующие сроки и режимы хранения свежезамороженной плазмы:

Условия, при которых будет храниться кровь или ее компоненты, должны отвечать ряду требований:

За соблюдением требований ведется непрерывный контроль.

Для обеспечения сохранности крови используется только надежное и проверенное оборудование. Исходя из этого, при его покупке и установке выдвигается ряд условий:

Каждый из отсеков с кровью необходимо маркировать. Запись температурного режима должна проводиться постоянно — в автоматическом или ручном режиме. Регистрация температуры проводиться дважды в день в «Журнале ежедневной макроскопической оценки и температурного режима хранения крови и её компонентов», приложение №8 к МР «Организация трансфузионной терапии в ЛПУ», утв. МЗ РФ 28.11.86г. Если холодильное оборудование имеет несколько отсеков, или же лаборатория оснащена несколькими холодильниками, журнал ведется отдельно для каждого из них.

Ввиду отсутствия собственной курьерской службы, лаборатории пользуются услугами компаний, которые занимаются перевозкой образцов биологического материала.

Правильная лабораторная диагностика требует соблюдения правил перевозки крови и ее компонентов.

Главная проблема хранения и перевозки крови состоит в том, что она не может сохранять свои свойства в течение длительного периода времени. Для проведения анализов в заборном центре ее центрифугируют, разделяя клеточное и жидкое содержимое. Полученная сыворотка может храниться в холодильнике в пробирках в течение недели.

Показатели ионограммы могут оставаться неизменными в течение 4-х дней при условии хранения сыворотки при температуре холодильника.

Эритроциты и гемоглобин сохраняются в закрытой пробирке в течение одного дня.

Плазма для проведения исследований свертывающей системы должна храниться не более 4 часов. Анализ газов крови проводится сразу.

В случае невозможности проведения неотложного анализа образцы крови хранятся 2 часа в бане с ледяной водой. Если транспортировки не избежать, контейнеры предохраняют от возможной тряски для предотвращения развития гемолиза. Температура может значительно повлиять на качество образцов для анализов. Рекомендуется избегать показателей ниже +4°С и выше +30°С. Пересылка образцов крови запрещена.

Правила транспортировки — самый существенный фактор сохранения образцов крови и ее компонентов в необходимом виде для удачного проведения анализов.

При транспортировке образцов в клиники, другой город, сельскую местность и т.д. нужно соблюдать:

Механическая травматизация может привести к разрушению эритроцитов. Именно поэтому транспортировку образцов крови необходимо осуществлять в спецупаковке. Выбирая тип транспорта для перевозки, предпочтение следует отдать самолету, если имеется такая возможность.

Упаковка должна обеспечивать перевозку образцов в вертикальном положении — так они меньше подвергаются взбалтыванию.

Температурный режим поддерживается изотермической тарой. Пределы допустимых перепадов температуры допустимы только в случае, если транспортировка длится более 6 часов. При этом температура должна удерживаться в пределах от +4°С до +12°С.

Длительная перевозка железнодорожным транспортом, катерами или автомобилем по грунтовой дороге способна сократить срок годности крови и ее образцов на 3-5 дней. Если кровь перевозится в таких же условиях вне изотермической тары, срок падает на 7-10 дней.

Основные условия правильной перевозки крови едины для всего мира:

Условия транспортировки крови и ее компонентов

Максимальное время хранения

Эритроциты и цельная кровь

В зависимости от используемой системы антикоагулянт – взвешивающий раствор

Свежезамороженная плазма и криопреципитат

5 дней при условии непрерывного помешивания

Перевозка крови и ее компонентов в рамках клинических исследований

КОРЕКС является партнером многих ведущих лабораторий в России и Европе. Мы осуществляем консалтинговую поддержку фармацевтических компаний и контрактно-исследовательских организаций для обеспечения бесперебойной перевозки крови и ее компонентов.

Некоторые проекты требуют доставки день-в-день или в течение суток. КОРЕКС может обеспечить доставку в направлении Санкт-Петербурга, Москвы, Твери, Тулы, Нижнего Новгорода за сутки из любого населенного пункта России. Мы используем доставку самолетами из самых отдаленных уголков страны. Все необходимые работы по сбору документации и предоставлению писем безопасности КОРЕКС выполняет самостоятельно.

Компания КОРЕКС занимается транспортировкой крови и ее компонентов по всей территории страны:

Используя наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie и пользовательских данных. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, пожалуйста, покиньте сайт. Узнать больше.

источник

Инфицированный материал транспортируйте в лабораторию в специальном контейнере, биксе с закрывающимися крышками из материала, который не портится при дезинфекции (6% раствор пероксида водорода, 96% этиловый спирт). Не допускайте перевозки материала в сумках, портфелях и других предметах личного пользования.

Взятую для использования цельную кровь доставьте в лабораторию в течение 24 ч с момента её взятия. В случае невозможности доставки образцов крови в указанные сроки материал доставляется только в виде сыворотки в течение 3 дней после взятия крови при условии, если она хранится до отправки в диагностическую лабораторию СПИД при температуре +4… +8°С.

Не допускайте помещения бланков направлений или другой документации внутрь бикса, ёмкости, транспортируйте их отдельно в полиэтиленовом пакете. Наружную поверхность бикса, ёмкости, пакета обрабатывайте дезинфицирующим раствором. Транспортируйте бикс, ёмкость с пробами в вертикальном положении, исключая их опрокидывание, вскрытие.

Для проведения иммуноферментного исследования кровь или сыворотку поместите в чистые пробирки или флаконы из-под антибиотиков с закольцованной пробкой (флаконы предварительно трёхкратно отмойте от антибиотиков дистиллированной водой). Для забора проб могут быть использованы другие ёмкости из стекла и нейтральных пластмасс с плотно закрывающимися резиновыми пробками. На флаконе обозначьте номер пробы. Образцы высушенной крови доставьте в планшетах, закрытых крышкой и заклеенных по краям пластырем в строго вертикальном положении, в течение 7 дней. Образцы крови, приготовленные на фильтровальной бумаге, герметично упакуйте в полиэтиленовый пакет и доставьте в течение 10-14 дней.

Распаковку материала, присланного в лабораторию для исследования, проводите с соблюдением мер предосторожности. Все материалы, направленные на исследование, рассматриваются как потенциально опасные.

Поступающий в лабораторию материал должен сопровождаться направлением в двух экземплярах, заполненным на одной стороне листа.

Постановление №147«Правила обращения с медицинскими отходами» 20.10.2005г. и дополнениями постановления № 207 от 01.12.2008г.

Группа А — «неопасные отходы»(маркировка мешка — белая), относятся твердые коммунальные отходы, которые образуются в административно-хозяйственных помещениях, пищеблоках, буфетах, палатах отделений (кроме инфекционных, кожно-венерологических, фтизиатрических, микологических) ЛПО или иных организаций и вне корпусной территории.

А1 – вторичные материальные ресурсы – бумага, строительный мусор;

А2– органические отходы – пищевые отходы кроме инфекционных, фтизиатрических и т. д;

А3 – другие неопасные отходы – мебель инвентарь, диагностическое оборудование, не содержащее токсичных элементов.

Группа Б– «опасные отходы»(маркировка мешка — жёлтая), отходы требующие особого внимания, которые образуются в операционных, ОИТР, процедурных, перевязочных, медицинских и патологоанатомических лабораториях, отделениях химиотерапии

Б1– анатомические отходы – это части тела, органы и ткани человека и животных, эмбрионы родильных домов;

Б2 – острые предметы – иглы, шприцы с иглами, дренажные трубки, скальпели, предметные стёкла, битая стеклянная посуда, ампулы, пробирки, пипетки;

Б3 – фармацевтические препараты, ставшие не пригодным;

Б4– отходы, загрязнённые кровью и биологическими жидкостями;

Б5 — списанные материалы или оборудование, лабораторные отходы (чашки и устройства для переноса) загрязнённые кровью, другими биологическими жидкостями, страдающих инфекционными заболеваниями (за исключением туберкулёза, микозов и ООИ);

Б6– отходы, образующиеся в результате использования цитостатических фармацевтических препаратов.

Классификация медицинских отходов:

Группа В – «чрезвычайно опасные отходы» (маркировка мешка — красная),

отходы списанные материалы или оборудование,

загрязнённые кровью и препаратами крови,

другими биологическими жидкостями больных страдающими ВИЧ-инфекцией, ООИ, туберкулёзом, микологическими заболеваниями,

анаэробной инфекцией, лабораторные отходы, работающих с микроорганизмами 1-2 групп патогенности.

Классификация медицинских отходов:

Группа Г – «отходы группа Г» или «опасные отходы» (маркировка — чёрная),

источник

Цель: Обеспечить доставку крови в лабораторию.

Показания: по назначению врача.

Оснащение: для транспортировки крови: контейнер, штатив, уплотнитель.

Пробирки, Для (формы № 50), резиновые перчатки, направление в лабораторию в полиэтиленовом мешке, пробирки с резиновыми пробками, лейкопластырь, жгут, стерильные ватные тампоны, стерильный пинцет, 70% этиловый спирт, 6% раствор перекиси водорода, 1% раствор борной кислоты, 1% раствор протаргола, 0,05% раствор перманганата калия, емкость для сбора отработанного материала, маска.

Последовательность действий (этапы)

Направление в лабораторию в полиэтиленовом мешке. Пробирки с резиновыми пробками.

Последовательность выполнения манипуляции

Стерильные ватные тампоны. Стерильный пинцет.

70% этиловый спирт. 6% раствор перекиси водорода.

Инфекционная безопасность, профилактика ВБИ

1% раствор борной кислоты. 1% раствор протаргола. 0,05% раствор перманганата калия.

Емкость для сбора отработанного материала.

Инфекционная безопасность, профилактика ВБИ

Закройте пробирки с кровью резиновыми пробками. Поставьте пробирки с кровью в штатив.

Поставьте штатив в контейнер, и вложите направление.

Исполнение должностной инструкции

Закройте крышку контейнера и закрепите ее лейкопластырем

Снимите перчатки, маску и обработайте их в соответствии с требованиями санэпидрежима.

Отнесите аккуратно контейнер в лабораторию.

Качественное выполнение манипуляции

Примечания: Перед допуском на работу с кровью медицинский персонал должен пройти инструктаж. В случае загрязнения кожи и слизистых кровью следует немедленно: Вымыть руки или пораженные участки теплой водой с мылом. Вытереть насухо. Обработать кожу 6% раствором перекиси водорода или 70% спиртом. Обработать слизистую глаз 1% водным раствором борной кислоты. Прополоскать рот 70% этиловым спиртом или 1 % раствором борной кислоты.

Обработать слизистую носа 1 % раствором протаргола. Обработать 3% раствором хлорамина поверхность рабочих столов в конце работы и при загрязнении в период работы. Сбросить ватные шарики загрязненные кровью и использованные шприцы в емкость с 3% хлорамином на 60 минут или 1.5% раствор гипохлорита кальция на 60 минут.

Тема: Способы временной и окончательной остановки кровотечения.

Цель: остановка кровотечения.

Показания: повреждение вен, мелких артерий и капилляров.

Противопоказания: профузное артериальное кровотечение.

Осложнения: при наложении чрезмерно тугой давящей повязки возможно нарушение кровообращения дистальнее ее.

Оснащение: стерильный пинцет, салфетка, бинт, вата, марлевые шарики или ППИ (пакет перевязочный индивидуальный), спирт, йодопирон

Последовательность действий (этапы)

Убедитесь в необходимости данной манипуляции или наличии раны, кровотечения.

Определение показаний к манипуляции

Объясните пациенту смысл манипуляции и необходимость ее выполнения. Успокойте его.

Психологическая подготовка пострадавшего

Усадите пострадавшего и во время выполнения манипуляции и встаньте лицом к нему.

Возможность контроля за состоянием пострадавшего

Провести туалет раны, используя временный способ для остановки кровотечения.

На рану наложить стерильную салфетку, сверху – валик из ваты или марли или свернутых ватно-марлевых подушек ППИ (пилот).

Последовательное исполнение , гарантирует хорошую фиксацию

Туго прибинтовать его, используя перегиб бинта над пилотом зафиксировать булавкой.

Качественно выполненная манипуляция способствует улучшению состояния.

Проверяем правильность, эффективность, эстетичность данной повязки

источник

Приложение 4. Правила сбора, хранения и транспортировки образцов сыворотки крови и вируссодержащих материалов

Правила сбора, хранения и транспортировки образцов
сыворотки крови и вируссодержащих материалов

1. Сбор, хранение и транспортировка образцов сыворотки крови

Для лабораторной диагностики кори используются серологические методы исследования, основанные на выявлении вирусспецифических антител в одной или парных сыворотках крови.

В лабораторной сети Европейского региона для диагностики кори рекомендуют использовать метод иммуноферментного анализа (ИФА), предназначенный для обнаружения в сыворотке крови вирусспецифнческих IgM-антител, в редких случаях — IgG-противокоревых антител.

lgM-ИФА обладает высокой специфичностью и чувствительностью, требует для исследования одного образца сыворотки. Метод легко осуществим в лабораториях на местах, обеспечивает получение быстрых и достоверных результатов, на которые можно ориентироваться при проведении надзора за корью.

Только в случае получения сомнительных результатов в IgM-ИФА целесообразно использовать IgG-ИФА, однако при этом необходимо иметь для исследования две сыворотки, полученные от больного в активной фазе заболевания (4-5 день сыпи) и в период реконвалесценции (2-ую сыворотку допускается брать через 1-2 недели, но не позже 1,5 мес. с момента заболевания).

Техника взятия, маркировка и регистрация проб крови.

Для серологической диагностики кори можно использовать как капиллярную, так и венозную кровь.

Капиллярную кровь берут из пальца в асептических условиях. Перед взятием крови кисть руки пациента согревают горячей водой, затем насухо вытирают чистым полотенцем. Палец, протерев 70°С спиртом, прокалывают стерильным скарификатором одноразового пользования. Кровь в количестве 1,5 — 2,0 мл собирают в стерильную одноразовую центрифужную пробирку (или в специальные микропробирки для взятия капиллярной крови). После взятия крови место укола смазывают йодом, а пробирку закрывают резиновой пробкой.

Кровь из вены в количестве 5 мл берут стерильным шприцем в стерильную пробирку в строго асептических условиях, используя для этого специальное помещение, полностью соответствующее санитарно-эпидемиологическим требованиям.

На пробирку с кровью следует наклеить этикетку (лучше пользоваться полоской лейкопластыря) с указанием регистрационного (порядкового) номера, фамилии, имени, даты взятия крови.

При проведении серомониторинга к образцам крови (сыворотки) прилагается аккуратно заполненный сопроводительный документ — «Список лиц, подлежащих серологическому обследованию», в котором указывают город (район); N детского дошкольного учреждения и группы; школы и класса; название ВУЗа, факультета, группы; регистрационный (порядковый) номер (должен совпадать с номером на этикетке на пробирке с кровью); фамилию и имя пациента; дату рождения; дату вакцинации и ревакцинации ЖКВ; дату взятия крови; подпись ответственного лица.

При обследовании заболевшего корью или подозрительного на эту инфекцию, заполняется «Направление в лабораторию регионального центра» и пробы крови (или сыворотки) направляются в лабораторию Центра госсанэпиднадзора в Нижегородской области не позднее 48 часов с момента взятия крови.

На месте сбора образцов сывороток крови следует хранить дубликаты списков обследованных лиц и результаты исследования сывороток в течение не менее 1 года.

Техника первичной обработки крови.

Для получения сыворотки пробирку с кровью оставляют в наклонном (под углом 10°-20°) положении при комнатной температуре на 30 минут для образования сгустка, после чего пробирку с кровью встряхивают (для отделения сгустка от стенки пробирки), закрывают пробкой и ставят на ночь в холодильник при температуре + 4°- 8°С.

После отделения сыворотки от сгустка (пробирки можно обвести по внутренней поверхности пастеровской пипеткой), ее центрифугируют при 500g (1500 об/мин) в течение 7-10 минут. Затем сыворотку отсасывают пипеткой в стерильные центрифужные (пластиковые) пробирки (или эппиндорфы) с обязательным переносом на них этикетки с соответствующей пробирки.

Если в лаборатории нет центрифуги, то цельную кровь надо оставить в холодильнике до тех пор, пока не произойдет полная ретракция сгустка (отделение сгустка эритроцитов от сыворотки). Осторожно, тщательно избегая повреждения эритроцитов, перенести сыворотку в другую стерильную пробирку, снабженную этикеткой. Сыворотка должна быть прозрачной, светло-желтого цвета, без выраженного гемолиза.

Сыворотки можно хранить до передачи в вирусологическую лабораторию в бытовых холодильниках при температуре +4°С не более 7 дней.

Исследование сывороток осуществляется в вирусологической лаборатории регионального центра, где они должны храниться замороженными при температуре -20° С в течение 1 года. Многократное замораживание и оттаивание сыворотки не допускается, в связи с чем сыворотку перед замораживанием необходимо разлить в несколько эппиндорфов по 0,25 мл.

Транспортировка образцов сыворотки (крови).

Перед транспортировкой собранного материала очень важно принять меры предосторожности: проверить наличие маркировки и сопроводительной документации (аккуратно заполненные этикетки на пробирках. Списки и Направления), прочно закрыть пробирки пробкой, расположить пробы согласно их номерам, уложить сыворотки в пластиковый пакет.

Для транспортировки крови (сыворотки) следует использовать термоконтейнеры (сумки-холодильники, термос, пенопластовую коробку). Если используются холодильные элементы (они должны быть заморожены), то положите их на дно, и по бокам контейнера (коробки), а затем внутрь поместите пластиковый пакет с образцами сыворотки, а сверху — вновь положите замороженные элементы. Сопроводительные документы (списки и направления на лабораторное исследование), указав время и дату отправления, поместите в полиэтиленовый пакет, положите его под крышку термоконтейнера или коробки.

Когда приготовления к отправке будут закончены, проинформируйте получателя о времени и способе транспортировки.

При транспортировке образцов цельной крови в зимнее время года следует особенно следить за ее сохранением, не допуская замораживания.

Образцы крови должны быть доставлены как можно скорее. Не ждите пока образцы накопятся!

Обработка медицинского инструментария.

Обработка лабораторного инструментария и перевязочного материала, а также сбор и утилизация отходов медицинского назначения осуществляется в соответствии с действующими нормативными документами.

2. Сбор, транспортировка и хранение вируссодержащих образцов

В ходе реализации эпиднадзора за корью на этапе ее элиминации необходимо наладить слежение за циркуляцией вируса с помощью идентификации штаммов вируса кори и генетической характеристики вирусных изолятов.

Вирус кори можно выделить в продромальной стадии заболевания и в стадии высыпания из различных материалов от больного: из мочи, назофарингеальных секретов и из лимфоцитов периферической крови. Интенсивность экскреции вируса быстро падает. Обнаружение и идентификация вируса кори на культуре клеток занимает несколько недель. Эти исследования должны проводиться на базе Национального центра по надзору за корью для слежения за биологическими свойствами циркулирующих на территории России штаммов вируса кори.

Выделение изолятов вируса кори позволяет в дальнейшем проводить их генетический анализ и сравнивать штаммы, полученные из различных мест в разные годы. Таким образом, можно получить исчерпывающую информацию об их происхождении и проследить пути передачи вируса. Для проведения молекулярно-эпидемиологического анализа надо иметь коллекции местных штаммов вируса из эндемичных стран.

Выделение вируса — это достаточно дорогостоящий и трудоемкий метод, который занимает много времени и требует наличия вирусологической лаборатории, оборудованной специально для работы с культурами клеток и выделения вирусов. Вирус кори чрезвычайно чувствителен к повышению температуры. Поэтому образцы материалов, предназначенные для выделения вируса, должны быть транспортированы в лабораторию как можно быстрее и в условиях строгого соблюдения холодовой цепи.

Сбор и транспортировка вируссодержащих образцов проводится на базе региональных центров по надзору за корью.

Сбор, транспортировка и хранение образцов мочи.

Для исследования берут пробы мочи в объеме 10-50 мл. Целесообразно использовать первую утреннюю порцию мочи, содержащую большее число эпителиальных клеток, из которых, как правило, и выделяется вирус кори. Наиболее успешно удается выделение вируса из образцов мочи, полученных на самых ранних стадиях болезни — в момент появления сыпи и максимум в течение 3 дней от момента высыпания.

Мочу собирают в стерильную емкость, охлаждают до +4 — 8°С, центрифугируют в ближайшие несколько часов после забора. Центрифугирование проводят при 500g (1500 об/мин) в течение 5 мин. при +4°С. Надосадочную жидкость выливают, а осадок ресуспендируют в 1 мл вирусной транспортной среды (см. Примечание) или питательной среды для культур клеток (RPMI, ИГЛА и другие).

Ресуспендированный осадок может храниться при температуре 4°С не более 48 часов перед доставкой его в центр госсанэпиднадзора в Нижегородской области. В противном случае осадок должен быть заморожен в транспортной вирусной среде при -70°С и отправлен с сухим льдом в герметично закрытых пробирках, предохраняющих этот осадок от воздействия углекислого газа.

В герметично закрытых емкостях, при 4°С, можно транспортировать образцы цельной мочи, но лучше мочу отцентрифугировать в течении 24 часов после сбора и транспортировать ресуспендированный осадок.

Ресуспендированный осадок не следует замораживать, если можно его отправить на исследование в течение ближайших 48 часов.

Образцы мочи не следует замораживать до окончания процедур концентрирования.

Сбор, транспортировка и хранение назофарингеальных образцов.

Назофарингиальные образцы (образцы носоглоточных смывов) должны быть взяты у больного как можно раньше, не позднее 3 дня с момента появления сыпи. В это время в этих образцах будет наиболее высокая концентрация вируса.

Назофарингиальные образцы могут быть взяты у больного одним из следующих способов, перечисленных в порядке возможности выделения вируса:

— Аспирация носового секрета. Производится путем введения в нос 2-3 миллилитров стерильного физиологического раствора шприцем через надетый на него тонкий резиновый зонд, после чего жидкость отсасывают и помещают в центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой, в которой находится специальная транспортная среда для вирусов.

— Полоскание (промывные воды). Со слизистых оболочек носоглотки получают путем полоскания горла небольшим количеством физиологического раствора (2-3 мл); промывные воды вносят в транспортную среду для вирусов.

— Назофарингиальные смывы. Для взятия используют ватный тампон, которым протирают слизистую оболочку носоглотки с достаточным усилием, чтобы снять часть эпителиальных клеток. Тампоны помещают в маркированные стерильные пробирки с завинчивающимися крышками, в которых содержится 2-3 мл транспортной среды для вирусов.

Образец носового секрета, взятого любым из перечисленных выше способов и помещенный в вирусологическую транспортную среду *, должен быть доставлен для исследования в день забора на холоде (при температуре 4-8°С). Если условия не позволяют быстро отправить образец смыва из носоглотки, пробирку с тампоном следует энергично встряхнуть так, чтобы смыть клетки, а затем извлечь тампон. Назальные аспираты или смывы центрифугируют при температуре 4°С при 500g (1500 об/мин) в течение 5 минут, затем осадок ресуспендируют в 2 мл питательной среды для клеточных культур. Ресуспендированный осадок и надосадочную жидкость хранят раздельно при температуре -70°С и транспортируют в лабораторию на сухом льду в герметично закрытых флаконах, чтобы избежать попадания в них углекислоты.

Поскольку вероятность выделения вируса максимальна в первые 3 дня с момента появления сыпи, не следует задерживаться со сбором клинического материала для изоляции вируса; не ожидать результатов лабораторного подтверждения клинического диагноза кори.

Если нет в наличии специальной транспортной вирусологической среды, ее можно заменить физиологическим раствором или средой для клеточных культур.

Сбор, транспортировка и хранение крови.

Для выделения вируса из лимфоидных клеток кровь берут из вены в строго асептических условиях на 1-3 день сыпи в объеме 1,0-2,0 мл. Кровь берут в стерильную пробирку с плотно закрытой пробкой. В пробирке должно находиться 0,1 мл гепарина — 500 ME (в 1 мл жидкого гепарина — 5000 МЕ). Непосредственно перед взятием крови пробирку с гепарином раскатывают по твердой поверхности для смачивания стенок пробирки гепарином, что предотвращает образование сгустков (пробку не мочить!). Хранить при +4°С не более 24 часов. Как можно раньше отправить в центр госсанэпиднадзора в Нижегородской области, соблюдая холодовой режим (+4°С).

1. Транспортная среда для выделения вирусов:

Основной раствор Хенкса рН 7,4 с ХЕПЕС буфером (имеется концентрированный коммерческий раствор 10 Х)

Бычий сывороточный альбумин — 2,0 г

Раствор пенициллина со стрептомицином (см. ниже) — 1,0 мл

феноловый красный, 0,4 %-ный раствор — 0,2 мл

Растворите 2,0 г бычьего сывороточного альбумина в 100 мл дистиллированной воды. Добавьте к 80 мл дистиллированной воды 10 мл раствора Хенкса, затем добавьте 10 мл 2 %-ного раствора бычьего сывороточного альбумина и 0,2 мл раствора фенолового красного. Стерилизуйте фильтрованием. Добавьте 1 мл раствора пенициллина со стрептомицином, разлейте в стерильные флаконы и храните при 4°С.

2. Раствор пенициллина со стрептомицином

Кристаллический пенициллин С

Растворите 10 в 6 ЕД пенициллина и 1,0 г стрептомицина в 100 мл стерильного ФБР. Разлейте во флаконы по 5 мл и храните при -20°С. Добавление 1 мл этого раствора к 100 мл питательной среды позволяет получить раствор с окончательной концентрацией 1200 ЕД пенициллина и 100 мкг стрептомицина в 1 мл раствора.

3. Доставка вируссодержащих образцов в Центр госсанэпиднадзора.

Направление в лабораторию центра госсанэпиднадзора
с функциями контроля за корью
(форма прилагается к каждому образцу сыворотки крови, взятой у
больного корью или подозрительного на эту инфекцию, и направляемой
на исследование)

* / Дата — указать число, месяц, год

**/состояние сыворотки считается удовлетворительным, если она светло — желтого цвета, прозрачная, без выраженного гемолиза, доставлена в количестве не менее 0,5 мл в контейнере (пакете, коробке) с хладоэлементами.

***/в случае выявления в сыворотке больного противокоревых IgM антител исследование на IgG антитела не проводится.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

источник

Наиболее щадящим и удобным видом транспорта для доставки крови на фронт являются самолеты. Наряду с этим иногда может быть использован и железнодорожный транспорт. Перевозка крови на большие расстояния в автомашинах нежелательна, так как неизбежное в таких условиях длительное взбалтывание крови неблагоприятно сказывается па продолжительности жизни ее форменных элементов.

Доставка крови в пределах фронтового и армейского тыла должна осуществляться преимущественно санитарными самолетами и вертолетами. Последние должны использоваться и для транспортировки крови в лечебные учреждения, хотя в медсб доставлять ее, по-видимому, чаще будут автомобилями, на которых эвакуируют раненых. Поэтому целесообразно станции переливания крови размещать вблизи сортировочных госпиталей, располагающихся, как правило, на главных путях эвакуации раненых.

При транспортировке крови важное значение имеет соблюдение правильного температурного режима, что достигается помещением ампул с кровью в специальные изотермические ящики. В зависимости от температуры окружающего воздуха в боковые металлические банки изотермических ящиков наливают теплый парафин или кладут лед.

Оптимальная температура в изотермическом ящике может поддерживаться в течение 24—48 часов. Использование изотермических ящиков особенно целесообразно при доставке крови на вертолетах, когда такой ящик, помещенный в специальный грузовой контейнер, может быть доставлен в медицинское учреждение без посадки вертолета.

Консервированная кровь, доставленная на фронтовые или армейские склады, должна быть обязательно заприходована путем регистрации каждой ампулы и каждого флакона. Такой учет дает возможность при необходимости произвести изъятие ампулы в том учреждении, куда она была выдана. Примерный образец учетного документа крови представлен в табл. 4. Что касается различных плазмозаменителей, то их учет должен производиться с регистрацией общего количества отдельных видов средств и с указанием их серии, заготовительного учреждения и даты заготовки.

Система учета и документации крови и плазмозаменителей на войне предусматривает строгую регистрацию и учет всех гемотрансфузий. Для этого в каждом учреждении, где производится переливание крови и плазмозамещающих жидкостей, должен вестись специальный журнал.

Хранение крови в полевых условиях может производиться в приспособленных помещениях или в специально вырытых для этой цели ямах-погребах. Обязательное требование, предъявляете к хранилищу,— возможность соблюдения в нем оптимального температурного режима. Наиболее благоприятной температурой для хранения крови является температура от +4 до +6°.

Температура воздуха в кровехранилище контролируется показаниями термометра, которые должны регистрироваться 2 раза в сутки. При невозможности соблюсти нужный температурный режим сроки годности крови сокращаются.

Небольшие количества консервированной крови могут храниться в изотермической таре. Флаконы с кровью должны находиться в вертикальном положении, при котором создаются наилучшие условия для оседания форменных элементов и последующего определения годности крови к переливанию по просветленному слою плазмы.

В складах, где сосредоточивается большое количество консервированной крови, целесообразно иметь четыре отдельных стеллажа:
а) для отстаивающейся крови,
б) для отстоявшейся крови — годной к переливанию,
в) для «сомнительной» крови,
г) для непригодной к переливанию, подлежащей списанию.

Для отстаивания крови, поступившей на склад после транспортировки, требуется от 18 до 24 часов. После этого кровь, признанная годной, может быть помещена на соответствующий стеллаж. Иногда через указанный срок кровь полностью не отстаивается или слой плазмы оказывается не совсем прозрачным. Ампулы с такой кровью для дальнейшего наблюдения помещают на стеллаж для «сомнительной» крови.

Не пригодной к переливанию считается гемолизированная кровь, кровь, имеющая бактериальное загрязнение, и кровь с массивными сгустками. При наличии мелких сгустков кровь можно переливать после фильтрования ее через 3—1 слоя марли.

При необходимости в срочном переливании неотстоявшейся крови проверка ее на гемолиз может быть произведена по цвету плазмы, полученной при центрифугировании крови. Для установления гемолиза пользуются также пробой И. С. Колесникова, которая выполняется следующим образом.

В две пробирки наливают физиологический раствор хлористого натра. В одну из пробирок закапывают 3 капли исследуемой крови. После оседания эритроцитов сравнивают этот раствор с раствором в контрольной пробирке. При наличии гемолиза физиологический раствор окрашивается в красный цвет.

Размещение крови на стеллажах создает удобства для текущей работы и облегчает учет и контроль находящейся в хранилище крови.

Плазмозаменители при хранении не требуют столь строгого соблюдения температурного режима, как консервированная кровь, и сохраняют свою годность даже при длительном хранении в условиях «комнатной» температуры.

Фронтовые СПК должны постоянно контролировать правильность хранения и учета крови и плазмозаменителей в медицинских учреждениях.

Как уже отмечалось, во время прошлой войны в основном производилось переливание консервированной крови, причем заготовка се была целиком возложена на соответствующие институты и станции переливания крови Министерства здравоохранения.

Стремление продвинуть заготовку консервированной крови ближе к районам боевых действий нашло свое осуществление в организации передвижных станций. В настоящее время процесс этот в полевых условиях значительно упрощен благодаря внедрению способа двухэтапиой заготовки крови.

При этом способе флаконы, в которые берется кровь от доноров, заготавливают и заполняют консервирующими растворами в глубоком тылу фабричным способом. В учреждениях, осуществляющих заготовку крови, производится только подбор доноров и взятие у них крови. Все это очень упрощает процесс заготовки, что весьма важно для полевых условий.

источник

• Главная
• ПРИКАЗ Минздрава РФ от 21.03.2003 N 117 «О РЕАЛИЗАЦИИ «ПРОГРАММЫ ЛИКВИДАЦИИ КОРИ В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ К 2010 ГОДУ»

ПРАВИЛА СБОРА, ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВКИ ОБРАЗЦОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ И ВИРУССОДЕРЖАЩИХ МАТЕРИАЛОВ

Для лабораторной диагностики кори используются серологические методы исследования, основанные на выявлении вирусспецифических антител в одной или парных сыворотках крови.

В лабораторной сети Европейского региона для диагностики кори рекомендуют использовать метод иммуноферментного анализа (ИФА), предназначенный для обнаружения в сыворотке крови вирусспецифических LgM-антител, в редких случаях — LgG-противокоревых антител.

LgM-ИФА обладает высокой специфичностью и чувствительностью, требует для исследования одного образца сыворотки. Метод легко осуществим в лабораториях на местах, обеспечивает получение быстрых и достоверных результатов, на которые можно ориентироваться при проведении надзора за корью.

Только в случае получения сомнительных результатов в LgM-ИФА целесообразно использовать LgG-ИФА, однако при этом необходимо иметь для исследования две сыворотки, полученные от больного в активной фазе заболевания (4 — 5 день сыпи) и в период реконвалесценции (2-ую сыворотку допускается брать через 1 — 2 недели, но не позже 1,5 мес. с момента заболевания).

1.1. Техника взятия, маркировка и регистрация проб крови

Для серологической диагностики кори можно использовать как капиллярную, так и венозную кровь.

Капиллярную кровь берут из пальца в асептических условиях. Перед взятием крови кисть руки пациента согревают горячей водой, затем насухо вытирают чистым полотенцем. Палец, протерев 70 °C спиртом, прокалывают стерильным скарификатором одноразового пользования. Кровь в количестве 1,5 — 2,0 мл собирают в стерильную одноразовую центрифужную пробирку (или в специальные микропробирки для взятия капиллярной крови). После взятия крови место укола смазывают йодом, а пробирку закрывают резиновой пробкой.

Кровь из вены в количестве 5 мл берут стерильным шприцем в стерильную пробирку в строго асептических условиях, используя для этого специальное помещение, полностью соответствующее санитарно-эпидемиологическим требованиям.

На пробирку с кровью следует наклеить этикетку (лучше пользоваться полоской лейкопластыря) с указанием регистрационного (порядкового) номера, фамилии, имени, даты взятия крови.

При проведении серомониторинга к образцам крови (сыворотки) прилагается аккуратно заполненный сопроводительный документ «Список лиц, подлежащих серологическому обследованию» (Приложение 5), в котором указывают город (район); N детского дошкольного учреждения и группы: школы и класса; название вуза, факультета, группы; регистрационный (порядковый) номер (должен совпадать с номером на этикетке на пробирке с кровью), фамилию и имя пациента; дату рождения; дату вакцинации и ревакцинации ЖКВ; дату взятия крови; подпись ответственного лица.

При обследовании заболевшего корью или подозрительного на эту инфекцию заполняется «Направление в лабораторию регионального центра» и пробы крови (или сыворотки) направляются в лабораторию ЦГСЭН субъекта Федерации не позднее 48 часов с момента взятия крови (Приложение 2).

На месте сбора образцов сывороток крови следует хранить дубликаты списков обследованных лиц и результаты исследования сывороток в течение не менее 1 года.

1.2. Техника первичной обработки крови

Для получения сыворотки пробирку с кровью оставляют в наклонном (под углом 10° — 20°) положении при комнатной температуре на 30 минут для образования сгустка, после чего пробирку с кровью встряхивают (для отделения сгустка от стенки пробирки), закрывают пробкой и ставят на ночь в холодильник при температуре +4° — 8 °C.

После отделения сыворотки от сгустка (пробирки можно обвести по внутренней поверхности пастеровской пипеткой), ее центрифугируют при 500 g (1500 об./мин.) в течение 7 — 10 минут. Затем сыворотку отсасывают пипеткой в стерильные центрифужные (пластиковые) пробирки (или эппиндорфы) с обязательным переносом на них этикетки с соответствующей пробирки.

Если в лаборатории нет центрифуги, то цельную кровь надо оставить в холодильнике до тех пор, пока не произойдет полная ретракция сгустка (отделение сгустка эритроцитов от сыворотки). Осторожно, тщательно избегая повреждения эритроцитов, перенести сыворотку в другую стерильную пробирку, снабженную этикеткой. Сыворотка должна быть прозрачной, светло-желтого цвета, без выраженного гемолиза.

Поступившие в лабораторию ЦГСЭН в субъекте Российской Федерации сыворотки можно хранить до передачи в вирусологическую лабораторию регионального центра в бытовых холодильниках при температуре +4 °C не более 7 дней.

Исследование сывороток осуществляется в вирусологической лаборатории регионального центра, где они должны храниться замороженными при температуре -20 °C в течение 1 года. Многократное замораживание и оттаивание сыворотки не допускается, в связи с чем сыворотку перед замораживанием необходимо разлить в несколько эппиндорфов по 0,25 мл.

1.3. Транспортировка образцов сыворотки (крови)

Перед транспортировкой собранного материала очень важно принять меры предосторожности: проверить наличие маркировки и сопроводительной документации (аккуратно заполненные этикетки на пробирках, списки и направления), прочно закрыть пробирки пробкой, расположить пробы согласно их номерам, уложить сыворотки в пластиковый пакет.

Для транспортировки крови (сыворотки) следует использовать термоконтейнеры (сумки-холодильники, термос, пенопластовую коробку). Если используются холодильные элементы (они должны быть заморожены), то положите их на дно и по бокам контейнера (коробки), а затем внутрь поместите пластиковый пакет с образцами сыворотки, а сверху вновь положите замороженные элементы. Сопроводительные документы (списки и направления на лабораторное исследование), указав время и дату отправления, поместите в полиэтиленовый пакет, положите его под крышку термоконтейнера или коробки.

Когда приготовления к отправке будут закончены, проинформируйте получателя о времени и способе транспортировки. При пересылке проб железнодорожным или воздушным транспортом лабораторию необходимо известить (по телефону, телеграммой) о номере поезда и вагона (рейса), дате и времени отправки и прибытия, количестве проб и пр.

При транспортировке образцов цельной крови в зимнее время года следует особенно следить за ее сохранением, не допуская замораживания.

Образцы крови должны быть доставлены как можно скорее. Не ждите, пока образцы накопятся!

1.4. Обработка медицинского инструментария

Обработка лабораторного инструментария и перевязочного материала, а также сбор и утилизация отходов медицинского назначения осуществляются в соответствии с действующими нормативными документами.

В ходе реализации эпиднадзора за корью на этапе ее элиминации необходимо наладить слежение за циркуляцией вируса с помощью идентификации штаммов вируса кори и генетической характеристики вирусных изолятов.

Вирус кори можно выделить в продромальной стадии заболевания и в стадии высыпания из различных материалов от больного: из мочи, назофарингеальных секретов и из лимфоцитов периферической крови. Интенсивность экскреции вируса быстро падает. Обнаружение и идентификация вируса кори на культуре клеток занимает несколько недель. Эти исследования должны проводиться на базе Национального центра по надзору за корью для слежения за биологическими свойствами циркулирующих на территории России штаммов вируса кори.

Выделение изолятов вируса кори позволяет в дальнейшем проводить их генетический анализ и сравнивать штаммы, полученные из различных мест в разные годы. Таким образом можно получить исчерпывающую информацию об их происхождении и проследить пути передачи вируса. Для проведения молекулярно-эпидемиологического анализа надо иметь коллекции местных штаммов вируса из эндемичных стран.

Выделение вируса — это достаточно дорогостоящий и трудоемкий метод, который занимает много времени и требует наличия вирусологической лаборатории, оборудованной специально для работы с культурами клеток и выделения вирусов. Вирус кори чрезвычайно чувствителен к повышению температуры. Поэтому образцы материалов, предназначенные для выделения вируса, должны быть транспортированы в лабораторию как можно быстрее и в условиях строгого соблюдения холодовой цепи.

Сбор и транспортировка вируссодержащих образцов проводится на базе региональных центров по надзору за корью.

2.1. Сбор, транспортировка и хранение образцов мочи

Для исследования берут пробы мочи в объеме 10 — 50 мл. Целесообразно использовать первую утреннюю порцию мочи, содержащую большее число эпителиальных клеток, из которых, как правило, и выделяется вирус кори. Наиболее успешно удается выделение вируса из образцов мочи, полученных на самых ранних стадиях болезни — в момент появления сыпи и максимум в течение 5 дней от момента высыпания.

Мочу собирают в стерильную емкость, охлаждают до +4 — 8 °C, центрифугируют в ближайшие несколько часов после забора. Центрифугирование проводят при 500 g (1500 об./мин.) в течение 5 мин. при +4 °C. Надосадочную жидкость выливают, а осадок ресуспендируют в 1 мл вирусной транспортной среды (см. Примечание) или питательной среды для культур клеток (RPMI, ИГЛА и другие).

Ресуспендированный осадок может храниться при температуре 4 °C не более 48 часов перед доставкой его в Национальный центр по надзору за корью или другую лабораторию, занимающуюся молекулярно-генетическим типированием вируса кори. В противном случае осадок должен быть заморожен в транспортной вирусной среде при -70 °C и отправлен с сухим льдом в герметично закрытых пробирках, предохраняющих этот осадок от воздействия углекислого газа.

В герметично закрытых емкостях, при 4 °C, можно транспортировать образцы цельной мочи, но лучше мочу отцентрифугировать в течение 24 часов после сбора и транспортировать ресуспендированный осадок.

Ресуспендированный осадок не следует замораживать, если можно его отправить на исследование в течение ближайших 48 часов.

Образцы мочи не следует замораживать до окончания процедур концентрирования.

2.2. Сбор, транспортировка и хранение назофарингиальных образцов

Назофарингиальные образцы (образцы носоглоточных смывов) должны быть взяты у больного как можно раньше, не позднее пятого дня с момента появления сыпи. В это время в этих образцах будет наиболее высокая концентрация вируса.

Назофарингиальные образцы могут быть взяты у больного одним из следующих способов, перечисленных в порядке возможности выделения вируса:

Аспирация носового секрета. Производится путем введения в нос 2 — 3 миллилитров стерильного физиологического раствора шприцем через надетый на него тонкий резиновый зонд, после чего жидкость отсасывают и помещают в центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой, в которой находится специальная транспортная среда для вирусов.

Полоскание (промывные воды). Со слизистых оболочек носоглотки получают путем полоскания горла небольшим количеством физиологического раствора (2 — 3 мл); промывные воды вносят в транспортную среду для вирусов.

Назофарингиальные смывы. Для взятия используют ватный тампон, которым протирают слизистую оболочку носоглотки с достаточным усилием, чтобы снять часть эпителиальных клеток. Тампоны помещают в маркированные стерильные пробирки с завинчивающимися крышками, в которых содержится 2 — 3 мл транспортной среды для вирусов.

Образец носового секрета, взятого любым из перечисленных выше способов и помещенного в вирусологическую транспортную среду , должен быть доставлен для исследования в течение 48 часов на холоде (при температуре 4 — 8 °C). Если условия не позволяют быстро отправить образец смыва из носоглотки, пробирку с тампоном следует энергично встряхнуть так, чтобы смыть клетки, а затем извлечь тампон. Назальные аспираты или смывы центрифугируют при температуре 4 °C при 500 g (1500 об./мин.) в течение 5 минут, затем осадок ресуспендируют в 2 мл питательной среды для клеточных культур. Ресуспендированный осадок и надосадочную жидкость хранят раздельно при температуре -70 °C и транспортируют в лабораторию на сухом льду в герметично закрытых флаконах, чтобы избежать попадания в них углекислоты.

Если нет в наличии специальной транспортной вирусологической среды, ее можно заменить физиологическим раствором или средой для клеточных культур.

Поскольку вероятность выделения вируса максимальна в первые 3 дня с момента появления сыпи, не следует задерживаться со сбором клинического материала для изоляции вируса; не ожидать результатов лабораторного подтверждения клинического диагноза кори.

2.3. Сбор, транспортировка и хранение крови

Для выделения вируса из лимфоидных клеток кровь берут из вены в строго асептических условиях на 1 — 3 день сыпи в объеме 1,0 — 2,0 мл. Кровь берут в стерильную пробирку с плотно закрытой пробкой. В пробирке должно находиться 0,1 мл гепарина — 500 МЕ (в 1 мл жидкого гепарина — 5000 МЕ). Непосредственно перед взятием крови пробирку с гепарином раскатывают по твердой поверхности для смачивания стенок пробирки гепарином, что предотвращает образование сгустков (пробку не мочить!). Хранить при +4 °C не более 24 часов. Как можно раньше отправить в Национальный центр, соблюдая холодовой режим (+4 °C).

Примечания. 1. Транспортная среда для выделения вирусов:

основной раствор Хенкса pH 7,4 с ХЕПЕС буфером (имеется концентрированный коммерческий раствор 10X);

бычий сывороточный альбумин — 2,0 г;

раствор пенициллина со стрептомицином (см. ниже) — 1,0 мл;

феноловый красный, 0,4%-ный раствор — 0,2 мл.

Растворите 2,0 г бычьего сывороточного альбумина в 100 мл дистиллированной воды, добавьте к 80 мл дистиллированной воды 10 мл раствора Хенкса, затем добавьте 10 мл 2%-ного раствора бычьего сывороточного альбумина и 0,2 мл раствора фенолового красного. Стерилизуйте фильтрованием. Добавьте 1 мл раствора пенициллина со стрептомицином, разлейте в стерильные флаконы и храните при 4 °C.

2. Раствор пенициллина со стрептомицином:

кристаллический пенициллин С;

Растворите 10 в 6 ЕД пенициллина и 1,0 г стрептомицина в 100 мл стерильного ФБР. Разлейте во флаконы по 5 мл, храните при -20 °C. Добавление 1 мл этого раствора к 100 мл питательной среды позволяет получить раствор с окончательной концентрацией 1200 ЕД пенициллина и 100 мкг стрептомицина в 1 мл раствора.

3. Доставка вируссодержащих образцов в Национальный центр осуществляется по запросу Национального центра с заполнением части А «Направления в лабораторию центра госсанэпиднадзора с функциями контроля за корью» (Приложение N 2).

Приложение N 5
к Приказу
Министерства здравоохранения
Российской Федерации
от 21 марта 2003 г. N 117

источник