Меню Рубрики

Результаты анализов крови у свиней

Исследование проводилось на площадке по доращиванию и заключительному откорму. Доращивание и откорм на данном предприятии проводится по интенсивной технологии сроком в 160 дней до 102-105 кг.

Для проведения данного исследования нами отбиралась кровь от поросят в возрасте 42-80 дней (рацион стартер-1); 80-105 дней (рацион стартер-2); 105-135 дней (рацион рост); 135-160 дней (финиш). В каждой отобранной группе поросят было по 4 головы. Для анализа использовались следующие показатели: кальций, общий белок, щелочная фосфатаза, билирубин общий, глюкоза, холестерин, креатинин, мочевина.

Показатели минерального обмена: кальций в этой группе находился в пределах 3-3,23 ммоль/л (при норме 2,9-6 ммоль/л).

Такой показатель, как щелочная фосфатаза, находился в верхних пределах физиологической нормы 150-180 ед/л.

Особый интерес представляют показатели белкового обмена, к которым относятся мочевина, креатинин в крови, общий белок крови. Общий белок 5,34-6,73 (при норме 5,8-8,9 г/л), количество мочевины превышало физиологические показатели и находилось в пределах 12-17 ммоль/л (при норме 3-9 ммоль/л); показатели креатинина в крови поросят данной группы также были выше физиологической нормы в пределах 238-276 ммоль/л (при норме 70-208 ммоль/л).

Кроме того исследовались показатели пигментного обмена: общий билирубин. У трех голов поросят он был в пределах физиологической нормы, 0,3-8,2 ммоль/л. И у одного выше нормы, 10,1 ммоль/л. Показатели углеводного и липидноого обмена, такие как глюкоза и холестерин, были в пределах физиологической нормы, соответственно, 3,7-6,4 ммоль/л; показатель липидного обмена – холестерин – также, 2,1-3,5 ммоль/л.

Показатели минерального обмена. Кальций в этой группе находился в пределах 3,24-3,35 ммоль/л (при норме 2,9-6 ммоль/л);

Щелочная фосфатаза находилась выше физиологической нормы, 153-275 ед/л.

Показатели белкового обмена: общий белок 6,61-7,18 (при норме 5,8-8,9 г/л) . Мочевина и креатинин в крови у поросят данной группы превышали физиологические значения. Так, у двух поросят эти значения находись в пределах нормы, 6,9-8,5 ммоль/л, а у двух голов количество мочевины превышало физиологические показатели и находилось в пределах 15,4-18,9 ммоль/л (при норме 3-9 ммоль/л); показатели креатинина в крови поросят данной группы также были выше физиологической нормы. Так, у двоих поросят показатель был в норме, 153-201 ммоль/л, а у двух животных выше нормы – 298-309 ммоль/л (при норме 70-208 ммоль/л).

Кроме того, исследовались показатели пигментного обмена, так общий билирубин у трех голов поросят был в пределах физиологической нормы, 3,9-6,3 ммоль/л. И у одного выше нормы, 9,3 ммоль/л.

Показатели углеводного и липидного обмена, такие как глюкоза и холестерин, были в пределах физиологической нормы, соответственно, 5,2-5,7 ммоль/л (при норме 3,7-6,4 ммоль/л) ; показатель липидного обмена – холестерин – у трех голов находился в пределах нормы, 3,1-3,5 ммоль/л, и у одного поросенка чуть выше нормы, 3,7 ммоль/л.

Показатели минерального обмена. Кальций в этой группе находился в пределах 3,23-3,61 ммоль/л (при норме 2,9-6 ммоль/л).

Щелочная фосфатаза находилась у трех голов в группе в пределах физиологической нормы, 132-179 ед/л, и у одного животного выше нормы – 198 ед/л.

Показатели белкового обмена: общий белок 7,24-8,13 (при норме 5,8-8,9 г/л) . Мочевина и креатинин в крови у поросят данной группы были в пределах физиологического значения. Так, у трех поросят эти значения находись в пределах нормы, 6,7-6,9 ммоль/л, а у одного поросенка количество мочевины превышало физиологические показатели и находилось в пределах 14,3 ммоль/л (при норме 3-9 ммоль/л); показатели креатинина в крови поросят данной группы у двух поросят были выше физиологической нормы. Так, у двоих поросят показатель был в норме 142-152 ммоль/л, а у двух животных выше нормы, 250-309 ммоль/л (при норме 70-208 ммоль/л).

Кроме того исследовались показатели пигментного обмена, так, общий билирубин у двух голов поросят был в пределах физиологической нормы, 3,9 ммоль/л.

Иу двух выше нормы, 9,3 ммоль/л. Показатели углеводного и липидного обмена, такие как глюкоза и холестерин, были в пределах физиологической нормы, соответственно, 5,2-5,4 ммоль/л (при норме 3,7-6,4 ммоль/л); показатель липидного обмена – холестерин – у двух голов находился в пределах нормы, 3,1 ммоль/л, и у двух поросят чуть выше нормы, 3,7 ммоль/л.

Показатели минерального обмена. Кальций в этой группе находился в пределах 3,04-3,40 ммоль/л (при норме 2,9-6 ммоль/л).

Показатели щелочной фосфатазы находились в группе в пределах физиологической нормы 142-175 ед/л.

Показатели белкового обмена: общий белок у трех поросят был в пределах физиологической нормы, 7,37-7,88 (при норме 5,8-8,9 г/л), и у одной головы выше нормы, 10,61 ммоль/л. Мочевина и креатинин в крови у поросят данной группы были в пределах физиологические значения. Так, у всех четырех поросят эти значения находись в пределах нормы, 6,7-7,2 ммоль/л; показатели креатинина в крови поросят данной группы были в норме, 137-159 ммоль/л.

Кроме того, исследовались показатели пигментного обмена, так, общий билирубин у двух голов поросят был в пределах физиологической нормы, 3,9 -7,8 ммоль/л.

Показатели углеводного и липидного обмена, глюкоза и холестерин, были в пределах физиологической нормы, соответственно, 4,8-5,6 ммоль/л (при норме 3,7-6,4 ммоль/л); показатель липидного обмена – холестерин – у трех животных был в пределах 2,6-3,0; а у одной головы чуть выше нормы, 4,0.

Таким образом, анализируя полученные результаты, можно сделать следующие выводы:

1. Уровень кальция и общего белка практически во всех возрастных группах был в пределах физиологической нормы;

2. Показатель щелочной фосфатазы находился в первых трех возрастных периодах на верхних границах физиологической нормы или незначительно выше ее. Такие высокие значения могут сигнализировать о ранних диагностических признаках различных нарушений заболеваний костей, рахите и т.д.;

3. Практически во всех возрастных группах у части животных наблюдались изменения показателей белкового обмена, таких как уровень общего белка, креатинина и мочевины. Данные изменения могут свидетельствовать о нарушениях в работе печени и почек;

4. Повышенный уровень билирубина в крови исследуемых животных также свидетельствует о возможных нарушениях функции печени, особенно на стадиях доращивания и в начале откорма;

5. Показатели углеводного и липидного обмена находятся на уровне физиологической нормы во всех возрастных категориях.

источник

Биохимический и клинический анализы крови – одни из распространенных и доступных диагностических методов исследований. Кровь – это динамическая система, отражающая все изменения, происходящие в организме животного под действием физиологических и патологических факторов. В настоящее время в лабораторную диагностику внедрены автоматические и полуавтоматические методики биохимических и общих клинических методов исследования крови, снизив при этом погрешность получаемых результатов. Однако человеческий фактор в проведении анализа крови остается решающим при:

  • Заборе крови
  • Транспортировке и хранении образцов
  • Пробоподготовке перед проведением анализа
  • Выборе метода исследования
  • Трактовке полученных результатов

Каждый из этих этапов имеет определенный уровень погрешности, который складывается в суммарную погрешность. Чтобы свести ее к минимуму, необходимо знать некоторые особенности при отборе и транспортировке проб крови. Во-первых, кровь необходимо отбирать в вакуумные или шприц-пробирки, не допуская вспенивания, падения капель крови на дно, она должна набираться по стенке пробирки. Во-вторых, необходимо определиться, для каких исследований будет использована кровь, нужно ли ее стабилизировать. В настоящее время на рынке присутствуют пробирки с антикоагулянтом, шариками на дне для ускорения свертываемости крови. Во многих хозяйствах антикоагулянт вводят самостоятельно (при отсутствии условий точного взвешивания или определения объема), что может приводить к чрезмерному разведению крови, либо недостаточному внесению антикоагулянта и образованию небольших сгустков – все это является одной из причин получения ложных результатов общего клинического анализа. Использование шприц-пробирок с антикоагулянтом исключает возможность ошибки при его внесении. Однако остается вероятность неравномерного смешивания крови с антикоагулянтом. Считается, что после отбора крови пробирку необходимо плавно перевернуть не менее 10 раз.

Если кровь планируется использовать для приготовления мазков и выведения лейкоформулы, желательно это сделать в течение первого часа, оптимально – сразу после отбора. Если кровь поступает в пробирку, происходит перераспределение форменных элементов и нейтрофильная группа оседает на ее стенках.

Для биохимических исследований сыворотки крови отобранный образец стабилизировать не нужно, но необходимо отделить сыворотку в течение первых 2-х часов. В противном случае можно получить ложные результаты по аминотрансферазам, лактатдегидрогеназе, щелочной фосфатазе, меди, фосфору, железу, калию и хлоридам.

Определенные требования предъявляются к доставке проб сыворотки крови. Они должны быть помещены в термобокс при температуре 4 градуса, если планируется проведение исследований через сутки, если позже 24 часов, пробы необходимо заморозить при -20 градусах.

Данные рекомендации актуальны при проведении биохимических исследований сыворотки крови на практически любой анализируемый показатель. Если пробы отбираются целенаправленно, например, для анализа количества витаминов или микро- макроэлементов, или общего белка, альбуминов, мочевины – условия отбора и транспортировки могут изменяться сугубо под эти показатели. Возникает вопрос, для чего следовать указаниям по отбору и транспортировке проб? Ответ прост – мы анализируем не абсолютные, а относительные показатели и наша задача – получить результат при одинаковых условиях. В данном случае, если мы сравниваем полученный результат с нормами, мы должны знать, при каких условиях были получены эти нормы и сделать все аналогично. Поэтому каждое диагностическое учреждение должно предоставлять рекомендации по отбору и транспортировке проб крови, которым необходимо четко следовать. В идеале эти рекомендации должны быть унифицированы и одинаковы для каждого диагностического учреждения. На практике этого не наблюдается. Каждая лаборатория использует свои методы исследования и свои нормы для интерпретации полученных результатов (табл. 1, 2, 3).

Таблица 1. Нормативные показатели в сыворотке крови взрослых свиней отдельных лабораторий Беларуси и России

Таблица 2. Нормативные показатели сыворотки крови свиноматок отдельных лабораторий Беларуси

Таблица 3. Нормативные показатели биохимического состава крови для поросят в возрасте 50 дней

Как видно из табличных данных, нормативные показатели отличаются, и иногда существенно. Эти различие допускается при использовании для определения показателя различных методов исследований, но разница между референсными величинами должна находиться в пределах погрешности метода исследований. На сегодняшний день при определении нормативных показателей отдельные лаборатории учитывают физиологическое состояние животного, его возраст, но не учитывают генетические особенности, т.е. межпородные различия, а они иногда бывают существенными (Табл. 4).

Таблица 4. Биохимические показатели крови свиней в возрасте 10-12 недель в зависимости от породы

DL – немецкий ландрас, DE – немецкий йоркшир, Pietrain – петрен, Hybrid – помесные породы.

Из этой таблицы следует, что мясные породы свиней отличаются от материнских прежде всего уровнем белкового обмена, что видно по таким показателям, как мочевина, креатинин, общий белок, альбумины, кроме того у них протекает быстрее метаболизм, требующий активного участия ферментов.

Основываясь на результатах лабораторных биохимических исследований крови животных в различных хозяйствах Республики Беларусь, в особенности в передовых, регистрируется повышенный уровень креатинина, мочевины, общего белка, альбуминов. Если полученные результаты сравнить с приведенными выше немецкими нормами, то они находятся в пределах референсных величин. Передовые хозяйства РБ активно занимаются селекционной работой, у некоторых имеется нуклеус, включающий йоркшира и ландраса, закупаются чистопородные хряки – дюрок, петрен. Назрела необходимость выведения норм именно для этих животных.

Другой вопрос состоит в том, что ни одна лаборатория при проведении биохимических исследований не учитывает проведение ветеринарных обработок, которые оказывают влияние на биохимические показатели. В каждом хозяйстве схема индивидуальна и непрерывна, включает в себя вакцинации, витаминно-минеральные обработки, подкислители, ферменты в комбикормах, антибиотикотерапию, на некоторых комплексах готовят лечебные комбикорма, в которых присутствуют постоянно антибиотик, антгельминтики и т.д. В медицинской практике известно около 4500 лекарственных средств, которые влияют на биохимические показатели крови. В таблице 5 представлены некоторые лекарственные вещества, влияющие на биохимический состав крови животных. Так, например, известно, что практически все антибиотики увеличивают уровень креатинина в крови, введение декстранов увеличивает уровень глюкозы и т.д.

Таблица 5. Влияние некоторых препаратов на биохимические показатели крови животных

В заключениях лабораторий часто проводится индивидуальный анализ по каждой пробе, что является недопустимым. Целью биохимического исследования является определение среднего значения для поголовья хозяйства. Если, например, в хозяйстве отобрали кровь от 5 свиноматок, на комплексе их, к примеру, 1800. Что нам нужно узнать – какие изменения в крови у 5 животных или рассчитать средний показатель для 1800 животных с определением критерия достоверности полученных результатов? Исходя из этого, при анализе результаты необходимо статистически обрабатывать, определяя среднее значение показателя и его ошибку. Это позволит вычислить процент поголовья животных, для которых полученный показатель будет характерен. Стоит заметить, что чем больше выборка животных, у которых отбирается кровь, тем более достоверные результаты будут получены. Считается, что для получения более-менее адекватных значений биохимического исследования крови животных, количество проб должно быть не менее 7 от каждой исследуемой физиологической группы (при условии отсутствия в них гемолиза).

Так или иначе, каждый специалист решает сам, проводить или нет биохимический и общий клинический анализы крови в той или иной лаборатории. Ясно одно, что в современных условиях результаты биохимического исследования крови не могут адекватно отражать качество кормления и сбалансированность рациона. В этом случае более достоверными данными оценки уровня обмена веществ и интенсивности роста животного является среднесуточный прирост, уровень лактации (для свиноматок), масса поросят к отъему, сдаточный вес, выход мяса с туши, категорийность и т.д. Эти показатели определяются с учетом данных всего поголовья. Если они адекватны реализации генетического потенциала поголовья, то в проведении биохимического исследования крови нет необходимости. В противном случае пробы крови должны отбираться квалифицированно, с соблюдением правил отбора, о которых говорилось выше, и доставляться в лабораторию в кратчайшие сроки.

Читайте также:  Нет моноцитов в анализе крови

источник

Получение и подготовка крови к исследованию.

Кровь рекомендуется брать лучше утром в одни и те же часы (до кормления и водопоя), после отдыха и успокоения животного.

Стабилизация крови.

Для предупреждения свертывания крови используют один из следующих антикоагулянтов (на 10 мл крови): щавелевокислый натрий (калий или аммоний) — 0,01-0,02 г: (оксалатная кровь); лимоннокислый натрий — 0,02 г (цитратная кровь); фтористый натрий — 0,01 г; гепарин — 1 капля раствора, содержащего в I мл 5000 ME гепарина (гепаринизированная кровь). Антикоагулянты вносят в пробирку, в которую затем собирают кровь; пробирку закрывают резиновой пробкой и тщательно смешивают содержимое 1-2 минуты.

Получение сыворотки крови. Собранную в пробирку или стеклянный цилиндр кровь ставят сначала в теплое место (на 15- 20 минут), а потом в холодное. Образовавшийся сгусток отделяют от стенок сосуда стеклянной палочкой или тонкой проволочкой. Полученную сыворотку осторожно отсасывают. Для лучшего отделения сыворотки от сгустка пробирку со свернувшейся кровью можно процентрифугировать 10-15 минут при 2-3 тыс. оборотов.

Получение плазмы.

Стабилизированную кровь наливают в пробирку и центрифугируют 10 минут при 1,5-2,0 тыс. оборотов в минуту. В результате оседания форменных элементов крови в пробирке образуется прозрачная жидкость — плазма, которую отсасывают и переносят в другую пробирку.

Исследование физических свойств крови.

Из физических свойств крови важное диагностическое значение имеет определение ее удельного веса, вязкости и скорости свертывания, а также реакции оседания эритроцитов.

Определение удельного веса крови.

Удельный вес крови опредетяют по методу Гаммершлага (в смеси бензола с хлороформом) или по способу Филиппса (в растворах медного купороса).
В норме удельный вес крови колеблется в следующих пределах: v крупного рогатого скота — 1,040-1,059; овцы — 1,037-1,049, козы — 1,041-1,061; яка — 1,045-1,063, лошади — 1,038- 1 062; свиньи — 1,042-1,060, кошки — 1,053-1,057, собаки — 1 044-1,056, кролика — 1,048-1,060, курицы — 1,039-1,057; гуся — 1,045-1,063.
Повышение удельного веса крови отмечается при поносах, рвоте, лихорадке, экссудативных и транссудативных процессах и гипергидрозах, диабете, нефритах, отравлении угарным газом. Понижение удельного веса наблюдается при истощении и различных анемиях.

Определение вязкости крови.

Вязкость крови определяют вискозиметром Гесса или Детермана. У здоровых животных вязкость крови составляет: у крупного рогатого скота — 4,6-5,2, овцы — 4,4-6,0, козы — 5,0-6,0, верблюда — 4,3-5,3, лошади — 3,4- 7,2, свиньи — 4,0-5,0, собаки — 3,8-5,5, кошки — 4,0-5,0, кролика — 3,5-4,5, курицы — 4,5-5,5.
Повышенная вязкость крови наблюдается при некоторых лихорадочных заболеваниях (плеврите, воспалении легких, перитоните), при сердечной недостаточности в период декомпенсации. Понижение вязкости встречается при первичных и вторичных анемиях, истощении.

Определение скорости свертывания крови.

На край хорошо обезжиренного предметного стекла, поставленного под углом 50°, наносят каплю крови. Стекая по стеклу, капля оставляет след. Через каждые 30 секунд по следу крови проводят острием иглы. Появление нитей фибрина на острие иглы указывает на начало свертывания крови. В норме скорость свертывания крови равна у крупного рогатого скота 5-6, лошади — 8-10, собак — 10 минутам.
Ускорение свертывания крови отмечается при миоглобинурии, крупозном воспалении легких, постгеморрагических анемиях. Замедление свертывания крови встречается при анемиях, нефритах, холемиях, сибирской язве, гемофилии, удушье.

Определение реакции оседания эритроцитов.

Реакцию оседания эритроцитов (РОЭ) нужно определять не позже двух часов после взятия крови. Реакцию оседания эритроцитов определяют или методом Неводова, или методом Панченкова.

Метод Неводова.

РОЭ определяют при помощи эритроседиометра, представляющего собой пробирку длиной 17 см и шириной 9 мм, с делениями от 0 до 100. Объем градуированной части пробирки равен 10 мл. В эритроседиометр вносят 0,02 г щавелевокислого натрия и наполняют кровью до отметки 100, закрывают резиновой пробкой и тщательно смешивают кровь с антикоагулянтом. Пробирку ставят в штатив и отмечают на часах начало исследования. Уровень столба эритроцитов определяют через 15, 30, 45 и 60 минут, а затем через 24 часа.
Метод Неводова обычно используется для определения РОЭ у лошадей. В норме у лошади РОЭ по этому методу через 15 минут составляет 40 (34-46), через 30 минут — 55 (49-61), через 45 минут — 58 (55-61), через 60 минут — 59 (56-62), через 24 часа — 65 (59-71), а у крупного рогатого скота — 2-4 деления за 24 часа.

Метод Панченкова.

РОЭ определяют в аппарате, состоящем из штатива и нескольких градуированных капилляров. Каждый капилляр градуирован от 0 до 100 делений, на уровне «0» (верхняя часть капилляра) нанесена метка «К» (кровь), а на уровне цифры «50» — метка «Р» (реактив). Объем градуированной части капилляра равен 100 мм3. Для постановки реакции капилляр смачивают 5%-ным раствором лимоннокислого натрия, а затем насасывают этот же раствор до метки «Р» и выдувают на часовое стекло. После этого тем же капилляром 2 раза набирают кровь до метки «К», каждый раз выдувая кровь на часовое стекло. Раствор и кровь на часовом стекле тщательно смешивают стеклянной палочкой, образовавшуюся смесь набирают в капилляр до метки «0». Капилляр устанавливают в штатив, учет высоты столба осевших эритроцитов ведут через 1 час и 24 часа.
В норме скорость оседания эритроцитов за один час по методу Панченкова колеблется в следующих пределах (в мм): у крупного рогатого скота — 0,5-1,5; овцы 0,5-1,0, козы — 0,3-1,0, верблюда — 1,0-4,0, лошади — 40,0-70,0, свиньи — 2,0-9,0, собаки — 2,0-6,0, лисицы серебристо-черной — 1,0-14,0, голубого песца — 1,0-5,0, норки — 1,0-3,0, соболя — 2,0-4,0, куницы- 2,0-4,0, кролика — 1,0-2,0, курицы — 2,0-3,0.
У молодых животных РОЭ более ускорена, чем у взрослых. Ускорение РОЭ наблюдается при многих лихорадочных инфекционных заболеваниях (инфекционная анемия, кровопятнистая болезнь, мыт, ангина и др.), лучевой болезни и т. д. Замедление РОЭ отмечается при механических илеусах и энцефаломиелите, желтухах, гастроэнтеритах, паралитической миоглобинурии лошадей и др.

Исследование химических свойств крови.

При исследовании химических свойств крови определяют: количество гемоглобина, билирубина, показатель резервной щелочности, количество в сыворотке крови общего белка, каротина, кальция и неорганического фосфора.

Определение количества гемоглобина (по Сали).

Количество гемоглобина определяют в гемометре ГС-2, состоящехм из колодки с тремя гнездами, градуированной пробирки, капиллярной и глазной пипеток. В двух крайних гнездах находятся или стандартные пробирочки, содержащие раствор солянокислого гематина, или стеклянные палочки соответствующего цвета. В среднее гнездо вставляют градуированную пробирку, имеющую две шкалы. Одна шкала (от 2 до 23) показывает количество гемоглобина в граммпроцентах (г%), а другая (от 10 до 140) — в процентах (в единицах гемометра); 10006 соответствует 16,67 г% гемоглобина.
В градуированную пробирку до метки «10» вносят глазной пипеткой 0,1 н. раствор соляной кислоты. Капиллярной пипеткой насасывают 20 мм 3 крови и осторожно выдувают ее в раствор кислоты. Затем этот раствор втягивают и выдувают обратно в пробирку несколько раз, чтобы смыть оставшуюся в пипетке кровь. Перемешивают и оставляют на 5 минут. В результате смешивания крови с соляной кислотой гемоглобин переходит в солянокислый гематин, раствор при этом приобретает коричневый цвет. Затем по каплям добавляют дистиллированную воду, постоянно помешивая до тех пор, пока цвет жидкости в пробирке не сравняется с цветом боковых стандартных пробирок. По делению шкалы, которое соответствует уровню раствора в пробирке, устанавливают количество гемоглобина.

Гиперхромемия — увеличение количества гемоглобина в крови — отмечается при поносах, рвоте, потливости, при образовании экссудатов и транссудатов.

Определение билирубина в сыворотке крови (по Ван-ден-Бергу).

В центрифужную пробирку берут 1 мл сыворотки крови к 2 мл спирта, смешивают и центрифугируют 20 минут. Затем к 1 лед прозрачного центрифугата прибавляют 0,5 мл спирта и 0,25 мл свежеприготовленной смеси диазореактивов Эрлиха (см. ниже). Окрасившуюся жидкость переносят в стаканчик колориметра и колориметрируют, сравнивая ее со стандартом, находящимся во втором стаканчике. Расчет производят по формуле:

где: С1 — количество билирубина (в мг%), С2 — концентрация стандартного раствора, Н1 — высота столба исследуемой жидкости (в мм), Н2 — высота столба стандарта (в мм), 5 — степень разведения сыворотки.

Смесь диазореактивов Эрлиха готовят из двух растворов:

1) сульфаниловая кислота — 0,2 г, соляная кислота (удельный, вес 1,19) З мл, дистиллированная вода — 200 мл;

2) азотнокислый натрий — 0,5 г, дистиллированная вода — 100 мл.

Оба раствора хранят в темной посуде. Для анализа приготовляют смесь двух растворов, для чего берут 10,0 мл первого раствора и 0,3 мл второго.
В качестве стандарта применяют раствор сернокислого кобальта (2,161 г предварительно высушенного реактива доводят дистиллированной водой до 100 мл), который хранят в темноте.
Для определения разновидностей билирубина и, следовательно, для дифференциации желтух применяют прямую и непрямую реакции.

Прямая реакция.

На 1 мл сыворотки крови наслаивают 0,5 мл смеси диазореактивов. Появление на границе жидкостей бордово-красного кольца указывает на наличие билирубина, проведенного через печень.
Положительная реакция всегда свидетельствует о патологии. Если кольцо появляется быстро, то это указывает на механическую желтуху, замедленная реакция отмечается при катаральной желтухе, циррозе печени, болезнях сердца.

Непрямая реакция.

К 1 мл сыворотки крови прибавляют 2 мл спирта, смешивают и центрифугируют. Затем 1 мл прозрачного центрифугата наслаивают в другой пробирке на смесь диазореактивов (1,5 мл). На границе жидкостей появляется цветное кольцо от розового до красно-фиолетового цвета. Положительная реакция зависит от наличия в сыворотке крови билирубина, не проведенного через печень. В норме эта разновидность билирубина обнаруживается у лошади. Повышенное содержание такого билирубина наблюдается при гемолитической желтухе.
В норме в сыворотке крови содержится билирубина у лошадей от 0,37 до 1,35 мг%, крупного рогатого скота — 0,01-0,30 мг%;
У других животных содержание билирубина в сыворотке очень незначительное (следы).

Определение резервной щелочности (по Неводову).

К 10 мл 0 01 н. раствора соляной кислоты прибавляют 0,2 мл крови, смешивают и титруют из микробюретки 0,1 н. раствором едкого натра до появления мути и выпадения хлопьев. Расчет производят по формуле:

где: х — резервная щелочность (в мг%),
а — количество миллилитров 0,1 н. раствора едкого натра, израсходованного на титрование.

Периодически для контроля к 10 мл 0,01 н. раствора соляной кислоты добавляют 1-2 капли 1%-ного спиртового раствора фенолфталеина и титруют 0,1 н. раствором едкого натра, до появления розовой окраски (нейтрализация). На титрование должен быть израсходован 1 мл раствора щелочи.
У животных в норме показатели щелочного резерва крови по Неводову составляют (в мг%): у крупного рогатого скота — 460-540, овцы — 460-520, козы — 380-520, верблюда 700-780, яка — 520-620, лошади — 470-620, лисицы серебристо-черной 340-500.
Ацидоз — снижение щелочного резерва — возникает в результате нарушения обмена веществ при белковом перекармливании, скармливании силоса, содержащего масляную кислоту, при атониях преджелудков, родильном парезе, ацетонемии, диабете, ящуре и других заболеваниях.
Алкалоз, или базеоз — повышение щелочного резерва — встречается редко и наблюдается главным образом при пироплазмозе и кровопятнистой болезни лошадей, селикозе, фибринозном воспалении легких, шоке.

Определение общего белка в сыворотке крови.

Общий белок определяют рефрактометрически, а белковые фракции — методом электрофореза на бумаге. Количество общего белка и соотношение белковых фракций в сыворотке крови здоровых животных приведены в табл. 37.

Определение каротина в сыворотке крови (по Ф. А. Рачевскому).

В пробирку вносят 0,2 мл свежей сыворотки крови, приливают
4 мл спирта (96°) и тщательно смешивают. Добавляют 2 мл петролеиного эфира или чистого бензина с температурой кипения ниже /о . Содержимое пробирки хорошо перемешивают и оставляют на несколько минут. Затем приливают по каплям 2 мл дистиллированной воды, в результате чего между спиртом и эфиром образуется поверхность раздела. Каротин находится в петролейном эфире бензине) и окрашивает верхний слой жидкости в желто-зеленоватыи цвет. Петролеиныи эфир с каротином насасывают в микропику и наливают его по каплям в фарфоровую чашечку, подогрело до 40 . После нанесения каждой капли ожидают полного высыхания её.

Для проверки результатов рекомендуется параллельно ставить такую же пробу со стандартным раствором каротина.
Содержание каротина в сыворотке крови вычисляют но формуле:

где: х — количество каротина (в мг%),
К — количество миллилитров эфирного (или бензинового) экстракта каротина, израсходованного на образование j желтого кольца.
В норме у крупного рогатого скота содержится в сыворотке крови от 0,5 до 3,0 мг% каротина, у кур — 0,3-0,5 мг%.

Определение кальция в сыворотке крови (по де-Ваарда).

В центрифужную пробирку (лучше с остроконечным дном) берут 1 мл сыворотки крови, прибавляют 0,5 мл насыщенного раствора щавелевокислого аммония, тщательно смешивают, оставляют на 30 минут, после чего жидкость центрифугируют 15 минут при 1,5-2 тыс. оборотов в минуту. Затем отсасывают жидкость над осадком пастеровской пипеткой с грушей (или сливают). К осадку добавляют 2 мл 2%-ного раствора аммиака, смешивают встряхиванием и центрифугируют 10 минут; промывание осадка повторяют еще два раза. В заключение отсасывают жидкость над осадком, к осадку добавляют 0,3 мл 50%-ного раствора серной кислоты, смешивают. Ставят пробирку в водяную баню при температуре 50-70° и выдерживают до растворения осадка, изредка помешивая жидкость стеклянной палочкой.
После растворения осадка жидкость титруют 0,01 н. раствором перманганата калия до появления бледно-розового окрашивавия, сохраняющегося не менее 1-2 минут.
Одновременно ставят «слепой» опыт. В пробирку берут вместо 1 мл сыворотки крови 1 мл дистиллированной воды, а все остальное производят таким же образом, как и в основном опыте.
Подсчет количества кальция производят по формуле:

Читайте также:  Нет крови при взятии анализа

х = 0,2-(а — б)*К*100,

Где: х — искомое количество кальция в сыворотке крови (в мг%)

а — количество миллилитров 0,01 н. раствора перманганата калия, израсходованного на титрование в основном опыте,
б — количество миллилитров 0,01 н. раствора перманганата калия, израсходованного на титрование в «слепом» опыте.

К — фактор к титру 0,01 н. раствора перманганата калия. В норме у животных количество кальция в сыворотке составляет (в мг %): у крупного рогатого скота — 9,5-12,5, овцы — 11-12,5, козы — 11,0-13,0, верблюда — 9,1-13,3, лошади — 12,0-16,0, свиньи — 11,5-12,5, собаки — 9,5-12,0, курицы — 170-22,0.

Гипокальцемия — уменьшение количества кальция в сыворотке крови — встречается при рахите, остеомаляции, нефрозе, родильном парезе, бронхопневмонии, экссудативном плеврите, анемии, лейкемии, диабете, остро протекающих тяжелых заболеваниях, хроническом сепсисе, тетании, недостаточности паращитовидных желез, лейшманиозе, контагиозной плевропневмонии, кровопятнистой болезни и др.
Гиперкальцемия — увеличение содержания кальция в сыворотке крови — наблюдается при остеомаляции, деформирующих артритах, гипервитаминозе, гиперпаратиреоидизме, сердечной недостаточности и т. д.

Определение неорганического фосфора в сыворотке крови (по Аммону и ГинсСергу).

В пробирку вносят 1 мл сыворотки крови, добавляют 3 мл дистиллированной воды и 1 мл 20%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, хорошо смешивают и, дав постоять 10 минут, фильтруют через бумажный фильтр или центрифугируют.
Затем берут две широкие пробирки и в одну из них (опыт) вносят 2,5 мл фильтрата сыворотки, 0,5 мл раствора молибдена, 1 мл 1 %-ного раствора аскорбиновой кислоты и до 6 мл дистиллированной воды. В другую пробирку (стандарт) вливают 1 мл рабочего стандартного раствора фосфора, 1 мл дистиллированной воды, 0,5 мл 20°о-ного раствора трихлоруксусной кислоты, 0,5 мл раствора молибдена, 1 мл 1 %-ного раствора аскорбиновой кислоты и до 6 мл дистиллированной воды. Реактивы в обе пробирки следует вносить по возможности одновременно. Содержимое пробирок хометре размешивают и через 10 минут колориметрируют в колори.

Количество неорганического фосфора определяют по формуле:

Где; X искомое количество неорганического фосфора (в мг%),
H1 — высота столбика жидкости с фильтратом сыворотки крови (в мм),
H2 — высота столба жидкости со стандартным раствором фосфора (в мм).

Раствор молибдена готовят смешиванием двух растворов:

1) молибденовокислого аммония — 25 г, дистиллированной воды — 300 мл;

2) дистиллированной воды — 125 мл, концентрированной серной кислоты — 75 мл.

Рабочий стандартный раствор фосфора готовят из основного стандартного раствора фосфора. Для приготовления последнего (его готовят впрок) берут 4,388 г однозамещенного фосфорнокислого калия, предварительно высушенного в эксикаторе, и добавляют дистиллированной воды до 1 л. Хранят раствор в темной посуде с добавлением к нему 0,5 мл хлороформа.
Для приготовления рабочего стандартного раствора фосфора, что делают в день исследования, берут 1 мл основного раствора и добавляют к нему дистиллированной воды до 50 мл; в 1 мл рабочего раствора содержится 0,02 мг фосфора.
Для приготовления 1-ного раствора аскорбиновой кислоты необходимо взять 1 г аскорбиновой кислоты и добавить 0,1 н. раствора соляной кислоты до 100 мл. Раствор хранят в темной посуде, годен не более одного месяца.
В сыворотке крови животных в норме содержится неорганического фосфора (в мг%): у крупного рогатого скота 4,5-7,5, овцы — 7-8, козы — 6-8, верблюда — 5,1-6,7, лошади — 7-7,3,: свиньи — 5-6, собаки — 3-5,8, кошки — 6-8, кролика — 6-7.

Гипофосфатемия— уменьшение количества неорганического фосфора в сыворотке крови — наблюдается При рахите, остеомаляции, гиперпаратиреоидизме, сахарном диабете, недостатке витамина D.
Гиперфосфатемия — увеличение содержания неорганического фосфора — отмечается при гипервитаминозе D, заживлении переломов костей, нефрозах, гломерулонефритах, гипопаратирериДизме.

Подсчет форменных элементов крови у животных.

В клинической практике обычно определяют количество эритроцитов и лейкоцитов, а иногда и тромбоцитов.

Определение количества эритроцитов.

Подсчет количества эритроцитов производят в счетной камере с сеткой Горяева (камера Горяева). Кровь набирают в смеситель (меланжер) до метки «0,5», а затем до метки «101» насасывают жидкость-разбавитель, при этом кровь разбавляют в 200 раз. В качестве разбавителя применяют 0,9%-ный или 3%-ный раствор поваренной соли, жидкость Гайема (сулема — 0,5 г, хлористый натрий — 1 г, сернокислый натрий — 5 г, дистиллированная вода — 200 мл) или раствор йода (йод кристаллический — 0,3 г, йодистый калий — 0,4 г, лимоннокислый натрий — 2 г, дистиллированная вода — 100 мл).
Кровь с разбавителем тщательно перемешивают 2-3 минуты, удаляют 2-3 капли из капилляра меланжера, а следующую каплю наносят под заранее притертое покровное стекло на сетку камеры- Заряженную камеру закрепляют на предметном столике микроскопа и выжидают 2-3 минуты, чтобы эритроциты осели на дно. Для обнаружения сетки камеры пользуются объективом 8, а при подсчете эритроцитов применяют объектив 40. Подсчет начинают с левого большого квадрата (разделенного на 16 маленьких квадратиков), а затем подсчитывают эритроциты еще в 4 больших квадратах, расположенных по диагонали сеткикамеры.
Количество эритроцитов в 1 мм3 крови определяют по формуле:

где: х — искомое количество эритроцитов в 1 мм 3 крови,
а — сумма эритроцитов, подсчитанных в 5 больших квадратах,
б — степень разведения крови,
в — количество маленьких квадратиков в 5 больших квадратах,
4000 объем разбавленной крови над одним маленьким
квадратиком сетки камеры (в мм 3 ). При разведении крови (1 : 200) и подсчете эритроцитов в 5 больших квадратах формула значительно упрощается и будет выглядеть так:

х = а * 10 000.

Эритропения, или олигоцитемия, — уменьшение количества эритроцитов — характерна для первичных и вторичных анемий. Сопоставление числа эритроцитов с количеством гемоглобина позволяет делать важные дифференциально-диагностические заключения.

Эритроцитоз, или нолицитемия — увеличение числа эритроцитов — встречается при сгущении крови вследствие потери организмом воды при обильном потоотделении, поносах, во время образования экссудатов и транссудатов, в начальной стадии инфекционных и лихорадочных процессов, при непроходимости тонкого отдела кишечника.
Здоровых животных приведено в табл. 38.

Лейкоцитоз, или гиперлейкоцитоз — повышение количества лейкоцитов — встречается очень часто. Лейкоцитоз может быть:

1) физиологическим — при беременности, у новорожденных, после сильной физической нагрузки и т. д.; 2) медикаментозным — после введения белковых препаратов, алкалоидов, жаропонижающих средств и т. д., 3) патологическим — при инфекционных болезнях, воспалительных процессах, интоксикациях и др.

Лейкопения — понижение числа лейкоцитов — наблюдается при тяжелых инфекционных и токсических состояниях и свидетельствует об угнетении кроветворных органов или об их истощении.
Подсчет количества тромбоцитов (по Реес-Эккеру). В смеситель для лейкоцитов набирают до метки «0,5» консервирующую тромбоциты жидкость (лимоннокислый натрий — 3,8 г, 40%-ный формальдегид — 0,2 мл, бриллианткрезиловая синь — 0,1 г, дистиллированная вода — до 100 мл). Затем в смеситель до метки «1» набирают капиллярную кровь из уха и до метки «И» раствор Тюрка (для гемолиза эритроцитов) и хорошо размешивают (2- 10 минут). После этого заряжают счетную камеру, которую на 15-20 минут ставят в чашку Петри с комочком мокрой ваты на дне для ускорения оседания тромбоцитов.
Тромбоциты подсчитывают в 20 больших квадратах сетки (т. е. в 320 маленьких квадратиках). Определяют количество тромбоцитов в 1 мм 3 крови по формуле:

где: х — искомое количество тромбоцитов в 1 мм3 крови, а — количество подсчитанных клеток, б — степень разведения крови (в 20 раз), в — количество сосчитанных маленьких квадратиков (320),
1/4000 — объем разведенной крови в камере над одним маленьким квадратиком сетки (в мм 3 ). сокращенном виде формула выглядит так:

Тромбоцитоз — увеличение числа тромбоцитов — встречается при инфлюэнце лошадей, плеврите, миоглобинурии, саркоматозных поражениях и др.

Тромбоцитопения — уменьшение количества тромбоцитов — наблюдается при инфекционной анемии лошадей, кровопятнистой болезни, стахиботриотоксикозе.

Подсчет форменных элементов крови у птиц.

Техника подсчета кровяных клеток у птиц несколько затруднена. Это объясняется тем, что у них как эритроциты, так и тромбоции — формы и имеют ядра, поэтому в обычных условиях не дифференцируются. Эти кровяные клетки не разрушаются уксусной кислотой, что препятствует определению числа лейкоцитов. В связи с этим при подсчете форменных элементов крови у птиц вначале в счетной камере подсчитывают общее количество клеток (эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов), а затем в окрашенном мазке каждые 1000 эритроцитов устанавливают число лейкоцитов и тромбоцитов. В заключение перерасчетом определяют абсолютное количество отдельных видов клеток в 1 мм 3 крови.

Определить количество клеток в крови у птиц можно также прямым способом в камере Горяева, для чего применяют раствор с красителями. По К. С. Фоминой и В. И. Шмельковой, берут 0,1%-ный раствор азура на изотоническом растворе поваренной соли (раствор можно использовать в течение месяца). Кровь разводят в большом меланжере в соотношении 1 : 100 теплым раствором азура (38-40°). Немедленно после заполнения меланжера проиводят тщательное размешивание Крови встряхиванием кровомесителя. Через 10-15 минут заряжают камеру. Эритроциты подсчитывают в 5 больших квадратах, лейкоциты и тромбоция определяют по всей сетке камеры (225 больших квадратов)Я Вычисление количества кровяных клеток производят по обычным формулам.

Определение лейкоцитарной формулы.

Лейкоцитарную формулу определяют в окрашенных мазках крови.
Приготовление мазков крови. Мазки готовят на чистых обезжиренных предметных стеклах.
Хороший мазок доля;ен быть тонким, равномерным (несколько уже предметного стекла), длинным (не менее 2/3 стекла) и иметь свободные концы.
Фиксация мазков. Мазки высушивают па воздухе фиксируют в метиловом спирте 3-5 минут или используют другие фиксаторы: этиловый спирт — 20 минут, смесь эфира со спиртом поровну — 20 минут, ацетон — 5 минут.I
Окраска мазков. Мазки окрашивают красками, растворенными в нейтральной дистиллированной воде. Для определения реакции воды применяют следующий метод. 50 мл воды,в химический стаканчик, добавляют одну каплю 0,2%-ного раствора. При кислой реакции вода окрашивается в красно-фиолетовый, при нейтральной — в бледно-розовый, а прощелочной — в желтовато-соломенный цвет. Усредняют кислую воду 1%-ным раствором двууглекислой соды, а щелочную 1%-ным раствором уксусной кислоты.

Указанные растворы добавляют по каплям к окрашенной индикатором воде до появления темно-розового цвета. Затем вычисляют количество усредняющего створа на больший объем дистиллированной воды. Раскраску мазков производят по Романовскому-Гимза. Для этого помещают над чашкой на стеклянные палочки мазком вверх, наливают на них раствор краски Романовского — Гимза (на 1 мл нейтральной дистиллированной воды берут 1-2 капли краски) и красят 20-35 минут в зависимости от температуры окружающего воздуха. Можно также мазки положить в чашку Петри на спички (мазком вниз) и подлить под них краску. Затем мазок промывают дистиллированной водой и высушивают на воздухе. Правильно окрашенный мазок должен иметь розовато-фиолетовый оттенок.

Мазки можно окрашивать и без предварительной фиксации их. Для этого на высушенный мазок наносят 20 (30) капель спиртового раствора краски Романовского -Гимза (на 20 мл спирта берут 5 мл краски). Через 5 минут И краске добавляют 20 (30) капель дистиллированной воды и продолжают окрашивать еще 20-25 минут. Краску смывают водопроводной водой. Мазки сушат на воздухе.

Техника выведения лейкоцитарной формулы.

Лейкоцитарная формула выражает процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов. В норме она слагается из соотношения базофилов, эозинофилов, нейтрофилов (юных, палочко ядерных и сегменто ядерных), лимфоцитов, моноцитов (табл. 39).
Для определения лейкоцитарной формулы в окрашенном мазке крови обычно подсчитывают 200 лейкоцитов. Количество клеток каждой формы лейкоцитов делят на 2, получая процентное выражение.
При подсчете лейкоцитов используют метод Шиллинга. Для этого на препарате выбирают 4 участка — два в начальной и два в конечной его части. В каждом участке отыскивают под иммерсионной системой микроскопа край мазка, подсчитывают здесь лейкоциты и передвигают препарат вглубь последовательно еще на 3 поля зрения. Затем смещают мазок на одно поле в сторону и возвращаются снова к краю препарата. Такие смещения мазка производят до тех пор, пока не будет подсчитано 50 лейкоцитов на одном участке. После этого находят таким же образом по 50 лейкоцитов на каждом другом участке мазка. Всего должно быть подсчитано 200 лейкоцитов.
Регистрацию отдельных форм лейкоцитов осуществляют или на специальном одиннадцати клавишном счетчике или в таблице Егорова.

Определение лейкоцитарного профиля.

Для более точного и полного суждения об изменениях в лейкоцитарном составе крови необходимо определить лейкоцитарный профиль, который выражает абсолютное содержание отдельных форм лейкоцитов в 1 мм3 крови. С этой целью подсчитывают общее количество лейкоцитов

Читайте также:  Рак яичка у мужчин анализ крови

в 1 мм 3 крови и выводят лейкоцитарную формулу. Затем количество лейкоцитов умножают последовательно на процент каждого вида клеток лейкоцитарной формулы и делят на 100.
В лейкоцитарной формуле при различных заболеваниях могут происходить следующие основные изменения:

1) увеличение или уменьшение процента тех или иных клеток — нейтрофилия или нейтропения (резкая нейтропения называется агранулоцитозом), лимфоцитоз или лимфопения, эозинофилия или эозинопения, моноцитоз или моноцитопения, базофилия;

2) появление молодых незрелых форм (юные, миелоциты и даже промиелоциты);

3) появление дегенеративных изменений в лейкоцитах — токсической зернистости и вакуолей в протоплазме, пикноза, лизиса, вакуолизации или полисегментации ядра, появление гигантских форм нейтрофилов.

Наиболее частым и практически самым важным является нейтрофильный лейкоцитоз. При этом лейкоцитозе наблюдается увеличение количества (повышение процента) незрелых нейтрофильных клеток в периферической крови, что именуется «сдвигом (ядра) влево», так как при записи лейкоцитарной формулы молодые клетки принято ставить слева от зрелых нейтрофилов.
По степени регенерации нейтрофильный лейкоцитоз разделяют на следующие три группы:

1) нейтрофилия с простым регенеративным сдвигом — количество палочкоядерных нейтрофилов возрастает не более чем на 13% при нормальном или несколько уменьшенном количестве сегментоядерных;

2) нейтрофилия с резким регенеративным (гиперрегенеративным) сдвигом — появляются юные, миелоциты и даже промиелоциты;

3) нейтрофилия с дегенеративным сдвигом — уменьшается количество сегментоядерных нейтрофилов, появляются атипичные клетки с дегенеративным ядром и протоплазмой, «сдвиг влево» углубляется за счет палочкоядерных, но без дальнейшего увеличения процента более молодых форм.

Определение качественных изменений клеток крови.

Исследование мазков крови, кроме определения лейкоцитарной формулы и лейкоцитарного профиля, позволяет также установить наличие тех или иных морфологических изменений эритроцитов и лейкоцитов, включая появление ядерных форм эритроцитов. В специально окрашенных мазках можно определить количество гранулоцитов (ретикулоцитов), т. е. эритроцитов с зернистой субстанцией. По количеству таких форм эритроцитов можно судить о степени регенерации крови.

источник

проф., д-р с.-х. наук, заведующий кафедрой генетики, разведения и кормления сельскохозяйственных животных Одесского государственного аграрного университета,
Украина, г. Одесса

аспирант Одесского государственного аграрного университета,
Украина, г. Одесса

THE INFLUENCE OF GLUTANIC ACID ON MORPHOLOGICAL AND BIOCHEMICAL BLOOD INDICATORS OF PIGS

Aleksey Karunskiy

professor, the Doctor of Agricultural Sciences Head of the department of genetics, breeding and feeding farm animals

Odessa State Agrarian University,

Yanina Rybachenko

a graduate student of the Odessa State Agrarian University,

В данной статье рассмотрено влияние добавки глутаминовой кислоты к основному рациону. Установлено, что количество эритроцитов в крови свиней уменьшилось, а лейкоцитов – увеличилось, хотя эти показатели не выходили за границы физиологической нормы. В биохимических показателях крови свиней под влиянием исследуемого фактора отмечено уменьшение альбуминов и β-глобулинов и повышение содержания α-глобулиновых и γ-глобулиновых фракций белка.

In this article we examine the influence of glutamic acid additive to the main ration and it was found that the number of red blood cells in the blood of pigs decreased and white blood cells – increased, although these indicators do not go beyond the limits of physiological norm. The blood biochemical parameters of pigs indicated the decrease of albumin and β-globulins, and the increase of α-globulin and γ-globulin protein fractions under the influence of the factor under study.

Ключевые слова: глутаминовая кислота; баланс азота; заменимые аминокислоты; синтетические аминокислоты; откорм свиней.

Keywords: glutamic acid; nitrogen balance; replaceable amino acids; essential amino acids; fattening pigs.

Производство и потребление свинины в мире постоянно растёт. Чтобы получать от свиней качественное и полезное мясо в оптимальные сроки, необходимо их правильно кормить. Свиньи – моногастричные животные, рацион которых должен состоять из быстропереваримых компонентов высокого качества. Известно, что максимальная наследственно обусловленная продуктивность, хорошее здоровье и высокие воспроизводительные способности животных проявляются только в том случае, когда удовлетворяются все их потребности в энергии, аминокислотах, минеральных веществах и витаминах [3, с. 14].

Глутаминовая кислота по химической природе относится к заменимым аминокислотам и входит в состав белков, а также содержится в протеине кормов в свободном состоянии в виде амида (глутамат). Эта кислота всегда присутствует в тканях организма в свободном состоянии и участвует в связывании аммиака, превращаясь при этом в глутамин. Установлено, что в почках и печени под действием фермента глутаминазы глутамин распадается на аммиак и глутаминовую кислоту, которая вновь может быть использована для переноса аммиака из органов и тканей [5, с. 159].

Материалы и методы исследований. Работа была выполнена в ООО «Мрия» Красноокнянского района Одесской области на свиньях крупной белой породы. Было сформировано две группы свиней методом групп-аналогов – контрольная и опытная. Возраст животных от 4 месяцев с одинаковой живой массой 65,6 кг.

Рацион кормления животных составляли два раза в месяц по существующим нормам с учетом возраста и живой массы подопытных свиней. На основе проведенных анализов состава и питательности рационов регулярно осуществляли их сбалансированность по всем 28 показателям. Согласно схеме опыта, животным первой контрольной группы давали рацион без добавления глутаминовой кислоты, а животные второй опытной группы получали рацион, в который добавляли глутаминовую кислоту в количестве 2 г в сутки на 1 голову свиней. Рацион свиней в научно-хозяйственном опыте состоял из следующих кормов (% по питательности): отруби ячменные – 33,0, отруби пшеничные 11,0, отруби гороховые – 17,0, отруби кукурузные – 20,0, силос комбинированный – 12, свекла кормовая – 7. Продолжительность опыта составляла 107 дней. В опыте изучали влияние глутаминовой кислоты на производительность и затраты корма на 1 ц продукции. Схема научно-хозяйственного опыта приведена в таблице 1.

Схема научно-хозяйственного опыта

Количество животных, голов

Продолжительность уравнительного периода

Продолжительность основного периода, дней

источник

Биохимические показатели Ед. изм. Свиноматки Поросята
Новорожден-ные до кормления 4-6 дни жизни
Сыворотки крови Белок общий г% 7,5-8,5 2,5-3,5 5,2-6,3
Гамма-глобулин г% 1,8-2,5 0-0,32 1,0-1,2
Альбумины г% 3,0-3,4
Кальций общий мг% 10-12 10-13 10-13
Фосфор неорганический мг% 5,0-7,0 5,0-9,5 5,0-8,0
Мочевина мг% 30,0-40,0
Активность щелочной фосфатазы ед. Бод. 1,0-2,0 3,0-15 3,0-15
Витамин А мкг% 20-40 10-40 10-80
Витамин Е мг% 0,25-0,70 0,25-1,2 0,25-1,2
Витамин В3 мкг% 70-85 44-70
Витамин С мг% 0,5-0,7 0,2-1,0 0,2-1,0
Витамин В12 ммкг/мл 0,2-0,4
Железо в сыворотке мкг% 160,0-200,0
Йод (СБЙ) мкг% 4,0-6,0
Цельная кровь Гемоглобин г% 10-12 8-10 8-12
Эритроциты млн/мкл 5,0-6,0 4,5-6,5 4,5-6,5
Гематокрит 38-46 30-46 30-46
Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) мм/час 15,0-25,0
Лейкоциты тыс/мкл 12-16 8-12 10-15
Кетоновые тела мг% 1,0-2,0
Витамин В12 мкг% 10-15 10-25 10-12
Витамин В2 мкг% 5,0-10,0 5,0-20,0 5-25
Глюкоза мг% 60-80 80-120 80-120
Фосфор неорганический мг% 5,0-7,0
Медь мкг% 80-100 110-140 70-100
Цинк мкг% 200-300 110-140 100-150
Марганец мкг% 10-20 10-16 12-18
Кобальт мкг% 4,0-6,0 5-8,5 2,3-5,3
Магний мг% 3,4,0
Печень Витамин А мг% 4,0-15,0 0,6-0,9 0,4-1,2

Оптимальные параметры микроклимата для свиней.

№ пп Параметры микроклимата Свино-матки первого периода супорос-ности и холос-тые Свино-матки второго периода супорос-ности Свино-матки подсос-ные Порося-та-отъемы-шы Свиньи на откорме
1. Температура, 0 С
2. Относительная влажность, %
3. Скорость движения воздуха, м/сек: В холодный и переходный период года 0,3 0,15 0,15 0,2 0,3
В теплый период года 1,0 1,0 0,4 0,6 1,0
4. Концентрация вредных газов: Углекислого газа, % 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2
Аммиака, мг/м 3
5. Естественная освещенность, ед. КГО 1,2 1,2 1,2 1,2 0,5
6. Отношение площади остекления к площади пола 1:10 1:10 1:10 1:10 1:20
7. Искусственная освещенность в зоне размещения животных, люкс 50-100 50-100 50-100 50-100 30-60

Мероприятия по диагностике и профилактике паразитарных заболеваний.

Диагноз на кишечные нематодозы ставят на основании микроскопического исследования фекалий и посмертно при обнаружении взрослых гельминтов в кишечнике или их личинок (аскарид – в легких и печени, эзофагостом и трихоцефал в соскобах слизистой оболочки ободочной и слепой кишки соответственно).

Для обнаружения яиц гельминтов в фекальных массах применяют насыщенные растворы аммиачной селитры и плотностью 1,3, поваренной соли 1,2. Личинки аскарид из легочной и печеночной ткани выделяют по Берману.

Гельминтокопрологическому исследованию на кишечные нематодозы подлежат животные не моложе 2,5-3-месячного возраста в количестве не менее 10 % от имеющегося поголовья.

Эффективность дегельминтизации проверяют через 10 дней после ее проведения.

Для дегельминтизации применяют фенбендазол (в лекарственной форме 22,2 % панакура гранулята, 22 % фенкура) в дозе 0,005 г/кг массы животного в течение трех дней подряд групповым способом с кормами или в дозе 0,030 г/кг однократно, а также в дозе 0,015 г/кг в течение двух дней; мебендазол в дозе 0,0066 г/кг живой массы в течение трех дней подряд; ринтал – в дозе 0,005 г/кг однократно, ивермектин в дозе 0,0001 г/кг в течение двух дней.

Для повышения эффективности дегельминтизации наряду с антигельминтиками следует применять иммуностимуляторы (градекс в дозе 0,1 мг/кг, фумаровая кислота в дозе 0,1 г/кг).

Химиопрофилактику необходимо проводить в связи с тем, что поросята-сосуны заражаются кишечными нематодами с первых дней жизни. Раннюю химиопрофилактику проводят, применяя поросятам с 2-недельного возраста ежедневно в течение 45 дней групповым способом с кормами пиперазина адипината в дозе 0,12 г/кг. 20 %-ный тетрамизол гранулят в дозе 0,004 г/кг; фенбендазол один раз в неделю в дозе 0,001 г/кг или мебендазол в дозе 0,002 г/кг, а также ринтал в дозе 0,002 г/кг массы тела до отъема.

Высокоэффективным химиопрофилактическим действием обладает ивермектин, применяемый супоросным свиноматкам за неделю до опороса в дозе 0,0003 г/кг с кормом и через три недели после опороса в такой же дозе.

Прижизненный диагноз ставят путем микроскопии рвотных масс больного животного, а посмертно – путем исследования соскобов со слизистой оболочки желудка в области фульдальных желез. Исследование соскобов проводят с использованием компрессория на трихинеллоскопе, трихинном микропроекторе или под микроскопом с предварительным перевариванием проб в искусственном желудочном соке по методу Ф.А. Волкова (1980) и осаждением гельминтов.

— ивомек в дозе 1 мл на 33 кг массы тела подкожно однократно;

— ринтал в дозе 5-10 мг/кг массы тела с кормом групповым способом однократно (по АДВ);

— пирантел в дозе 25 мг/кг массы тела с кормом групповым способом два раза в день (по АДВ);

— фенкур в дозе 15 мг/кг массы тела с кормом групповым способом однократно (по АДВ).

Смешанные паразитозы.

Для диагностики смешанных паразитозов свиней необходимо проводить комплексные исследования на гельминтозы и протозоозы. На гельминтозы (аскаридоз, эзофагостомоз, трихоцефалез, стронгилоидоз и др. нематодозы), а также на кокцидиоз диагностические исследования проводить по методу Г.А. Котельникова и В.М. Хренова (1974), на балантидиоз – методом нативного мазка и количественным методом по Н. Манжосу (1982). Гельминтокопроскопические исследования проводят на гельминтозы (аскаридоз, трихоцефалез, эзофагостомоз) через 50-60 дней после предполагаемого заражения, на стронгилятоз – через 8-10 дней, на кокцидиоз через 2-3 недели, на балантидиоз – через 1-2- недели.

Для профилактики паразитозов хряков обследуют на гельминтозы и протозоозы не реже 2 раза в год и при необходимости проводят лечебные мероприятия. В репродукторных, племенных и репродукторно-откормочных хозяйствах свиноматок обследуют на паразитозы и за месяц до опороса проводят химиотерапию с проверкой ее эффективности через 10 дней. При отсутствии возможности осуществлять преимагинальные дегельминтизации, поросят начинают обследовать и дегельминтизировать по достижении 2,5-3-месячного возраста.

Для профилактики смешанных паразитозов свиней используют антигельминтики широкого спектра действия: фенбендазол (в форме 22,2 % панакура или 22 % фенкур) в дозе 0,015 г/кг (по АДВ) два раза подряд; ринтал, мебенвет гранулят 10 %, ивермектин и др. в сочетании с фармазином в дозе 0,02 г/кг массы 2 раза в день в течение 3 дней или сочетание сульгина и сульфадимезина соответственно в дозах 0,075 г/кг и 0,04 г/кг массы в течение 4 дней; трихопол назначают поросятам весом 5-40 кг в дозе 0,25 г, свыше 40 кг – 0,5 г 2 раза в сутки в течение 3 дней; ампролиум в дозе 0,025-0,065 г/кг массы животного два раза в день три-четыре дня подряд и др.

Криптоспоридиоз.

Диагноз ставят на основании обнаружения ооцист криптоспоридий в фекалиях (методом нативного мазка и флотационные методы). Ооцисты выявляют в мазках после окрашивания из по Циль-Нильсену с докрашиванием 1%-ным бриллиантовым зеленым на 10 0 спирте, по Циль-Габбету, по Козлову.

Обследуют поросят с 3-4-дневного возраста, у павших поросят берут соскобы слизистой оболочки нижней части подвздошной кишки.

Для лечения криптоспоридиоза применяют перорально сульфадимезин в дозе 0,05 г/кг два раза в день и фумаровую кислоту в дозе 0,1 г/кг однократно в течение 5 дней, сульфадимезин в дозе 0,05 г/кг и ампролиум в дозе 0,2 г/кг два раза в день в течение 5 дней.

ПРИЛОЖЕНИЕ 6

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКОМУ ОБСЛЕДОВАНИЮ

источник